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兽医科技

首页 技术专栏 猪
首页 技术专栏 猪
  • 非洲猪瘟弱毒株防控策略及检测试剂

    已知疫苗毒和耐受猪中,有无症状传播者和无症状带源者在免疫力下降时会快速散出强毒(无症状抗体阳性猪受外环境强刺激后排毒,如:发情、分娩、发病)。非洲猪瘟弱毒株防控策略1人员固定①生产区人员一定要严格固定工作岗位及活动区域,目前场内传播最多的是人员交叉。②不要为了方便夫妻工或其他原因中途交换饲养猪群。③人员进出猪舍每天换衣服、换鞋、洗澡是有效的,进入非瘟阳性区域清除人员连续工作一个月,消毒洗澡后检测都是阴性,也未见传播到其他区域。2生产上无价值猪坚决扑杀①已知疫苗毒和耐受猪中,有无症状传播者和无症状带源者在免疫力下降时会快速散出强毒(无症状抗体阳性猪受外环境强刺激后排毒,如:发情、分娩、发病)。②抗体检测(猪只感染超过21天后形成抗体,可携带8-24个月;仔猪可通过初乳从母猪得到抗体)。③无价值猪只,不仅本身没有经济价值,在猪群里可能还是一个“定时炸弹”,及早处理、减少散毒、控制污染面是关键(要统一员工思想,部分员工可能出于个人感情,不愿意扑杀弱猪。笔者就多次遇到因饲养员不愿意扑杀弱猪,导致病毒扩散,造成更大的损失)。3准确的检测是最低的成本①例行检测必须做,不能因为连续阴性降低例行检测频率;②场内公猪定期要做抗体筛查;③猪群异常而检测连续阴性时,要送样到对标实验室检测,实验室定期做盲样检测。4风机是很重要的传染源①非洲猪瘟弱毒株可随粉尘传播,目前集约化养殖都使用高速风机;②一旦猪群有小飞阳性无症状猪存在,它排出的阳性粉尘大概率会出现在风机口;③猪场定期进行风机采样是很好的检测方式,异常栏舍一旦连续3-5天风机口检测阳性就意味着整舍污染;④高速风机可以把粉尘送出35米,出现阳性的栏舍外使用喷水降尘是降低污染面的措施。如果使用除尘袋也要定时喷洒消毒液。5关于雾化减毒① 在高风速的影响下,粉尘传播和污染是存在的;② 非洲猪瘟在猪群中传播的一个主要途径就是经口鼻传播;③ 雾化可以有力降尘,同时把消毒药带到猪的呼吸道前段,雾化能无死角消毒猪舍。非洲猪瘟检测试剂2020年8月28日,农业农村部发布《农业农村部办公厅关于非洲猪瘟病毒诊断制品生产经营使用有关事宜的通知》,非洲猪瘟病毒检测是非洲猪瘟防控工作的重要举措,意义重大。为进一步提高非洲猪瘟病毒检测结果准确性,规范非洲猪瘟病毒诊断制品生产、经营和使用行为,现就非洲猪瘟病毒诊断制品生产、经营和使用有关事宜通知相关事宜。自2021年1月1日起,各有关部门和单位在动物检疫或疫病监测、诊断中,对生猪及其产品开展非洲猪瘟病毒检测,应当使用已取得我部核发的产品批准文号的非洲猪瘟病毒诊断制品,确保检测结果准确。牧科传媒小编通过中国兽药信息网整理汇总,截止2022年1月30日,有14家生产企业获得16个非洲猪瘟病毒检测试剂盒/条的生产批准文号(有效期内)。2021年7月2日,中国动物疫病预防控制中心公布了通过专家评审的非洲猪瘟病毒抗体检测试剂盒名单。(本次评价对各单位送检的试剂盒中试产品进行了实验室评测和专家评审,检测样品类型仅限于猪血清。)来源:上海申亚技术服务中心、牧科传媒整理
    04-14

    2022

  • 猪圆环病毒病的特点及防控策略

    摘要:猪圆环病毒病是近几年发现的一种新型疾病,我国养殖的规模化和集约化发展导致该病的发生率和死亡率增加,并继发断奶仔猪多系统衰竭综合征、猪皮炎肾病综合征、繁殖障碍等病症,严重威胁养殖正常发展,因此,本文就猪圆环病毒病的特点及防控策略进行简述,以期提高养殖者对该病的重视和防控。关键词:猪圆环病毒;仔猪;接种;防控猪圆环病毒病于1991年首次在加拿大被发现,此后迅速在包括我国在内的很多国家流行。特别是我国养殖规模的不断扩大,该病呈蔓延态势,给养殖场带来巨大的经济损失。1 流行特点猪圆环病毒病是由猪圆环病毒(PCV)引起的一种传染病,PCV是迄今发现的一种最小的动物病毒,结构呈二十面体对称、无囊膜,属于单股环状DNA病毒,有PCV1和PCV2两个血清型,其中PCV1是非致病性的病毒,对猪没有致命性。而PCV2是致病性的病毒,是断奶仔猪多系统衰竭综合征的主要病原,主要对仔猪造成危害。并且该病毒对外界的抵抗力较强,对氯仿不敏感,在外界环境中能存活较长时间而不被灭活。该病的易感动物是猪,且不分年龄、性别和品种,其中哺乳仔猪和保育仔猪较易感,多见于6~8周龄的猪群,极少感染乳猪,发病率和病死率分别为3%~50%和8%~35%,病猪和带毒猪是主要传染源,病毒可经由呼吸道、口腔水平传播、胎盘垂直传播、精液传播、被污染的衣服和设备、病猪的移动等多种途径传播。在急性发病的猪群中,病死率可达10%,而且耐过猪后期的发育明显受阻,并且经常与猪伪狂犬病病毒、猪蓝耳病病毒等混合感染,不仅增加了该病的淘汰死亡率,也增加了鉴别和防治难度。导致该病发生的原因有多种,包括饲养管理、环境条件差、受环境应激、饲养密度大、免疫效果差等。2 临床表现2.1 新生仔猪的先天性颤抖初产母猪所产的仔猪有这种症状,颤抖程度由轻微到严重不等,如果颤抖严重的病猪常在出生7d左右因吃乳困难而被饿死。如果仔猪耐过1周,则在3周龄内出现两侧性、持续性地颤抖,只在躺卧或睡眠时颤抖停止,3周龄后逐渐康复,但有的终生不断发生震颤。通常来说,外部刺激如突然声响或寒冷等能引发或增强颤抖。2.2 断奶后仔猪的多系统衰竭综合症该症状出现在断奶后的仔猪,开始表现为食欲不振,甚至厌食、体重减轻、身体消瘦、生长停滞、体温升高、皮肤苍白、被毛蓬乱等。而后出现腹泻、呼吸困难等症状,如果发生继发感染,则导致病情加重,可能出现淋巴病变(体表浅淋巴结肿大、可触摸到腹股沟浅淋巴结)、严重贫血、中枢神经系统紊乱等症状。此类型的发病率低,但死亡率高。2.3 种母猪、种公猪的繁殖障碍患病母猪的临床表现为:体表温度升高、食欲不振、出现产死胎、木乃伊胎、弱仔、流产、所产仔猪先生性震颤等,病后治愈的母猪的受胎率低或不孕。发病公猪的性欲低下、精液质量和体质变差、失去种用能力等,只能淘汰。2.4 皮炎肾病综合症常发生在保育猪和育肥猪,感染率和死亡率低。临床表现为:皮肤出现圆形或不规则的呈红色或黄色、中央黑色的坏死灶的斑点状丘疹,而后逐渐破溃,融合成条状和斑块的结痂,逐渐遍及全身。此病症一般可自行康复,但是严重的病猪会出现发热、跛行、厌食、生长缓慢等症状。3 防控策略3.1 健全生物安全体系该病常与其他病原体混合感染导致猪群发病严重,损害猪场利益。因此,一定要健全严格、系统的生物安全体系,避免病原的继发感染。首先,要坚持“全进全出”的饲养原则,特别在产房和保育阶段一定不要将不同日龄的猪群混群,以免因接触机会增加而增加感染率。其次,要严格引种。禁止从疫区购买或引进病猪,如果需要引种,要做严格的检疫、监测、隔离等措施,避免将病毒带入场内。然后,做好灭鼠杀虫工作,减少传播途径。最后,要做好消毒管理,定期进行卫生和消毒,一方面清除粪污、污染用品、垫料后,可交叉使用烧碱、抗毒威和过氧乙酸等消毒剂消灭多种病原,要将清洁和消毒工作贯穿在整个养殖过程中;另一方面可对粪污等进行无公害化处理,以切断传播途径,降低发病率。3.2 加强饲养管理饲养方式要根据不同年龄、性别、用途的猪群进行灵活选择,符合其生长规律。比如日粮的营养配比要科学而全面,保证蛋白质、维生素、微量元素等的均衡,不饲喂霉变、受病毒污染的饲料,以增强整体猪群的体质,进而增强抵抗力。此外,还要减少转群、换料、混群、疫苗接种等不良应激。同时,控制适宜的饲养密度,避免饲养密度过大而增加感染疫病的几率。最后,提供温度、湿度、通风良好的生活环境,保障其正常生长。3.3 疫苗接种  当前我国常用的疫苗有PCV2重组杆状病毒灭活疫苗、猪圆环病毒2型灭活疫苗(LG株)、猪圆环病毒2型灭活疫苗(SH株)。进行疫苗接种时,一定要严格按照免疫程序进行,以提高免疫效果。不同类型猪群的接种日龄、次数、使用剂量等存在差异,比如能繁母猪在产前5~6周接种2mL/头,3周后加强免疫1次;仔猪2~5周龄接种1次,2mL/头。而且在疫苗接种后在饲料中添加适量的黄芪多糖可提高猪群的免疫力。因为该病容易与其他猪疫病混合感染,因此,还要对猪群按照免疫程序进行猪高致病性蓝耳病、猪瘟、猪口蹄疫、猪伪狂犬病等的疫苗接种,以降低感染风险。3.4 使用药物,避免继发感染如果猪圆环病毒病受到其他病菌的继发感染,会大大增加防控难度,因此可用卡那霉素、林可霉素、氟苯尼考等抗菌药物减少并发感染。此外,对仔猪肌肉注射头孢噻呋,在妊娠母猪的饲料中添加金霉素、阿莫西林等药物也能增强其抗病力,提高防控效果。4 小结如果在猪场中发现有患猪圆环病毒的猪,已经没有治疗的价值。因此,一定要预防大于治疗,而疫病的防控涉及到生物安全体系的建立、饲养管理、免疫接种和药物预防等多方面的工作,必须重视每个工作环节,才能避免疫病的发生,进而减少猪场损失,促进我国养殖业的可持续发展。参考文献:略作者:许国龙/辽宁省凌源市城郊动物卫生监督所
    04-14

    2022

  • 雨季猪场安全及非瘟防控注意事项

    近来很多地方雨水较多,进入了雨季,非瘟防控压力非常大,那么雨季如何进行非瘟防控呢?一、提前准备(1)关注当地的气象灾害发布系统,确保能及时收到相关预警信息,及时准备和应对特大洪涝灾害等情况;(2)排涝、防漏检查和维修:清理排水沟渠,污水池尽量清空;料线、料仓、饲料仓库、猪舍防漏检查维修;(3)用水用电安全:雨天是事故多发期,容易造成漏电事故,因此猪场要及时检查老旧设备,提前调试或者增加自己的发电设备,做好相应防护措施,安排好无水无电等突发情况的应对措施,以免造成不必要的损失。同时对洪涝灾害等相关气象情况做好应急预案;(4)水源安全和消毒管理:避免使用地表水,对水源进行消毒。考核点:各场负责人近期整理气象灾害预警信息获得、排涝、防漏、用水、用电自检报告。二、生产管理要求(1)做好猪群生产周转计划:持续了解猪场当地的雨水情况,提前安排销售/转群计划并充分沟通,尽量杜绝雨天猪只转移,不可控条件下谨慎进行猪群转移;按异常监测规范进行异常猪只的及时监测;(2)物资准备:多雨地区的场线,按仓库容量一次尽可能多的储备生活生产物资,特别是消毒相关物资;消毒过程总考虑雨水的稀释、覆盖等问题进行规范浓度消毒剂全覆盖的清洗;并确定物资进仓库,转运的时间和频次;(3)人员管理:做好休假计划,减少人员进出频次,避免/减少雨天人接触或者进入猪场次数。(4)车辆管理:雨天减少车辆的使用,使用后充分消毒;特别是外部销售猪车,落实外部车辆和内部车辆分开洗消的关键点。考核点:各场相关负责人每月跟踪转猪、物资、人员、车辆进出时间规范和进出记录,每月提交报告进行检核,同时通过监控实时检查,依据违规情况进行考核。三、生产健康管理建议(1)保证有效消毒:雨后无法防水的消毒池和消毒盆等消毒设备及时更换消毒药;下雨后对猪场环境进行消毒,特别是污水沟和消毒池,可适当提高消毒液浓度;雨天或者下雨后车辆先清洗,沥干后再进行消毒;(2)保证栏舍干燥:在高温高湿条件下,增强通风,保持猪舍环境卫生清洁;对猪场周围外环境挖隔离防疫沟,保证猪场内的水能排出去,无倒灌、无积水现象;猪舍内喷洒高吸水性的养殖环境改善剂,能快速使环境干燥、去氨除臭、驱除虫蝇;加强通风;(3)采取各种措施降低应激:降低饲养密度;尽可能减少猪群移动、免疫、采血等操作;科学处理采血、注射、断脐、断尾等伤口;预防疥螨,做好猪体表驱虫,环境蚊蝇老鼠等的驱除工作;(4)预防保健:多雨季节易引发一些皮肤病和传染疾病,如传胸、丹毒等。因此,提前按需求做好保健和免疫工作,并提前进行相关疾病防控培训;(5)雨季正是霉菌繁殖旺季,饲料贮存不当会容易发生霉变。各场线做好饲料计划管理,配送时间进行充分沟通与安排;饲料中转仓要保持干燥、阴凉、通风良好、排水通畅,吨包料下方进行垫底,饲料上方及周围注意留有空隙,以保持空气畅通,同时,仓库内也要保持清洁、卫生。
    04-14

    2022

  • 重磅!杀灭非洲猪瘟病毒新材料研发成功了,灭菌能力99.8%,成本仅需4元!

    利用半导体材料的“光合作用”能杀死非洲猪瘟病毒,不但环保,成本还仅是传统方式的五分之一!3月17日,重庆日报记者从市畜科院获悉,由重庆自主研发的“国猪灭瘟灵1号”消毒液日前通过官方授权的第三方机构证实,能有效杀灭非洲猪瘟病毒。这是一种基于光触媒反应原理的半导体光催化杀菌消毒材料,在我国乃至全球畜牧行业中开创了用“材料消毒”替代“药品消毒”先河,目前已开始量产并在生猪养殖行业推广。“非洲猪瘟病毒给生猪行业带来巨大损失,其传染性高、致死率高,能够在异常寒冷或炎热的气候条件下长时间生存。”重庆市畜科院科研人员付利芝介绍,过去对非洲猪瘟病毒的消杀主要靠烧碱、强酸等化学溶剂,对环境和人体有危害。去年3月,重庆市畜科院联合国家生猪技术创新中心、重庆深盟新材料科技有限公司组建了科研团队,依托荣昌年出栏80万头生猪的产业规模,探索光触媒反应在非洲猪瘟病毒灭活领域的应用,开展带病灭杀、预防性灭杀等各类养殖临床实验。“就是将二氧化钛作为半导体光催化材料,利用其在普通可见光照射下生成的羟基和自由基,破坏病毒DNA合成,从而起到消杀作用。可以将其想像成一种‘光合作用’。”付利芝说,将该技术用于非洲猪瘟病毒的灭活,在全球范围内尚属首次。“我们无数次调整消毒材料的浓度、成分配比等,使其能有效防御和抗击非洲猪瘟病毒,并大幅降低已感染养殖场所的生猪死亡率。”深盟公司副总经理杜锦兴说。在重庆市畜科院实验室内,科研人员将涂有非洲猪瘟病毒的检测板置于自然光中,再喷涂上这种半导体消毒液。静置2小时后,其病毒核酸荧光定量检测CT值便降低了99%以上。据了解,该消毒液还能有效广谱杀灭畜禽中的蓝耳、禽流感等病毒,同时自动形成具有附着力和长效性的薄膜,为生猪全生命周期和全流程提供科学防护。杜锦兴算了一笔账:“采用传统化学药品手段,养殖场每隔三四天就要消毒一次,一头猪从猪仔到出栏需要约20元消毒成本。而依托光催化杀菌,喷洒后10天以内,其灭菌能力都能维持在99.8%左右,成本只需约4元。”目前,该技术已通过中国农业科学院兰州兽医研究所的第三方科学检测。重庆市畜科院和深盟公司将积极推动新产品走向市场,让更多养殖户享受到科技红利。
    04-14

    2022

  • 规模化猪场ASFV核酸自检过程中的注意事项

    来源:温氏华农养猪训练营
    04-14

    2022

  • 非洲猪瘟诊断技术研究进展

    04-14

    2022

  • 猪蓝耳病免疫防控:困惑与出路

    猪病诊治本公众号主要用来发布一些猪病的诊断和防控方面的文章,一些文章为本人觉得质量较好的,直接从网络转载,以期更多的人能看到和学习,如果有侵权行为可联系本人,予以删除,一些是本人的原创作品,以期为猪场相关工作者对猪病的防控和诊断工作提供参考。10篇原创内容公众号
    04-14

    2022

  • 中国非洲猪瘟防控策略及猪场复养进展

    一、介绍非洲猪瘟 (ASF) 是由非洲猪瘟病毒 (ASFV) 感染引起的高度传染性病毒性疾病,发病率和死亡率接近 100%。这种疾病最初是在1921年报道于肯尼亚,从那时起几个重要的洲际传播已经发生。2018年8月,辽宁省沈阳市发现中国首例ASF病例。此后,ASFV以极快的速度在全国蔓延,导致生猪数量大幅减少[ 7]],给养猪业造成重大损失。根据中国农业农村部(MARA)和国际动物卫生组织(OIE)发布的数据,截至2021年11月,中国已报告203例ASF病例,扑杀生猪119.3万头。在中国 ASFV 爆发之初,世界上 50% 以上的猪都是在中国饲养的;99%以上的中国养猪场是年产猪不到500头的小型农场。这些农场的生物安全水平要么非常低,要么几乎没有。据估计,ASF如果在美国爆发,第一年可能会造成165亿美元的损失。重要的是,中国饲养的生猪数量是美国的六倍。因此,可以推测,ASF大流行在中国造成的直接经济损失远不止于此。此外,它还对整体经济发展和人民生活产生重大影响。因此,迫切需要有效防控非洲猪瘟,恢复生猪生产。本综述总结了 ASFV 传播、预防和控制的关键要素,并为养猪场复养提供了关键的技术支持。2. ASFV 传播的三个关键要素2.1. 感染源ASFV的来源如图 图1. 受感染的家猪,野猪,软蜱,污染的饲料(包括原材料和泔水),水,精液,猪肉,人员,车辆和工具是ASFV 的主要来源。此外,苍蝇、水蛭和其他吸血昆虫也可能是 ASFV 的来源。MARA 发布的数据报告称,2018 年 8 月至 11 月期间,34% 的 ASF 爆发是由猪粪引起的,46% 是人和车辆引起的,19% 是由生猪和猪肉制品引起的。据报道,在 100 例 ASFV 感染病例中,42% 是由泔水喂养引起的,40% 是由受污染的人和车辆引起,16% 是由感染的猪和携带病毒的产品引起的,2% 是由野猪引起的。图1 ASFV 感染源。受感染的家猪、野猪、软蜱、受污染的饲料、水、精液、猪肉、人员、车辆和工具是 ASFV 的主要来源。苍蝇和其他昆虫(水蛭、接吻虫和猪虱)可能会传播 ASFV。流行病学调查显示,受感染的家猪和野猪以及受污染的饲料、人员、车辆和猪肉是中国的主要感染源。传染源长期携带病毒,是非洲猪瘟防控的难点之一。非洲疣猪、丛林猪和Ornithodoros spp 的软蜱是 ASFV 的宿主。O. marocanus携带病毒 655 天甚至 5 年,与其他Ornithodoros蜱,如O. porcinus porcinus,在沙漠疣猪(Phacochoerus aethiopicus)和软蜱之间保持 ASFV 森林循环。此外,目前尚不清楚恢复的猪可以携带病毒多长时间以及它们多久可以排出病毒。然而,据报道,康复的猪在 ASFV 感染 6 个月后仍可排毒并感染易感猪。由于易感猪的持续存在,ASFV 可以在猪群中持续很长时间。顽强的生命力和难以灭活是使此类流行病难以控制的另外两个方面原因。ASFV 在室温下的粪便中可存活 11 天,在受污染的围栏中可存活 1 个月,在 4°C 下储存的血液中可存活 18 个月,在冷冻肉中可存活数年。只有使用推荐浓度的消毒剂并确保接触时间才能对 ASFV 进行有效消毒。用 0.8% 氢氧化钠、2.3% 氯制剂、3% 邻苯基苯酚、0.3% 福尔马林和 1% 氢氧化钙灭活 ASFV 需要 30 分钟。然而,猪场的实际消毒时间远短于此,且受到蛋白质等多种有机物的破坏,难以杀灭环境中或物体表面的病毒。2.2. 传播途径2.2.1. 口腔传播摄入受病毒污染的饲料、饮用受污染的水和吞咽来自传染源的病毒颗粒是 ASFV 传播的最重要途径。在 ASFV 从欧洲到美国的模拟跨洋运输研究中,在不同的饲料中检测到活病毒,表明饲料携带传染性病毒。Niederwerder 等人证明摄入了被乔治亚州 2007/1 毒株污染的饲料的猪感染了最低感染性剂量 为10^4 TCID 50,中位感染剂量为 10^6.8 TCID 50。令人惊讶的是,饮用水中 ASFV 的最小感染剂量仅为 1 TCID 50并且在同一研究中的中位感染剂量为 10 TCID 50,表明 ASFV 通过饮用水传播比通过饲料传播更有效。据报道,通过摄入受污染的饲料,一种高毒力的坦桑尼亚 ASFV 菌株的口服感染中位剂量为10^5.4 HAD 50。到目前为止,我们对通过受污染饲料传播 ASFV 的重要因素仍然知之甚少。考虑到感染猪的潜伏期为3-19天,感染后第2天,大量病毒排出体外即可在口腔液中检测到病毒。因此,集约化猪场应把饮水和饲养安全摆在特别重要的位置。亚洲猪场流行的传统的怀孕母猪舍通槽饮水喂料模式,应改为独立饮水器和料槽的新模式。一些研究报道鼻液,直肠液,尿等排泄物中检测到来自非洲猪瘟病毒感染的猪有活病毒。蒙哥马利在他的研究中表明,家猪在食用受粪便和尿液污染的饲料时会被一种有毒的肯尼亚 ASFV 毒株感染。此外,据报道,9.7%~36.1%的感染猪在急性ASFV感染早期出现口腔、鼻腔、肛门或阴道流血症状,血液中病毒滴度非常高。因此,它很容易造成环境污染,包括饲料和饮用水,并在周围的猪群中传播。因此,尽早识别和扑杀受感染的猪很重要。此外,泔水(厨房剩菜)喂养已被证明是历史上传播 ASFV 的重要方式,这也是 ASFV 在中国早期传播过程中的重要传播途径。此外,最近的流行病学调查表明,被传染性野猪分泌物污染的鲜草和种子可能是家庭农场的感染源。例如,中国、俄罗斯远东和韩国北部报告了 11 起源自野猪的 ASFV 感染病例。然而,亚洲野猪的种群分布以及亚洲野猪种群中ASFV的流行病学信息尚不清楚。2.2.2. 气溶胶传输感染 ASFV 的猪通过排泄物和分泌物将病毒释放到环境中,在急性期,其口腔液、鼻液、粪便和尿液中的病毒滴度特别高。当猪出现打喷嚏和咳嗽的症状时,这些传染性分泌物可能会被雾化并转化为携带病毒的气溶胶。当携带病毒的粪便或尿液干燥时,动物运动引起的漂浮粉尘也可能产生携带病毒的气溶胶,且空气中ASFV的滴度与粪便排出的病毒量呈正相关。在 ASF 急性期,当粪便中出现高滴度 ASFV 时,周围空气中也检测到高 ASFV 载量。但是,空气中的ASFV载量与口腔和鼻腔分泌物中的病毒排泄水平之间没有直接相关性,推测空气中的病毒很可能来自携带病毒的粪便。ASFV 在空气中的半衰期为 19.2 分钟(qPCR 测试,评估 ASFV 的物理衰减)或 14.1 分钟(病毒滴定,评估物理和生物 ASFV 衰减)。病毒可能会持续漂浮在猪舍的空气中或随气流到达出风口。每立方米空气中大约有 3 log 10 TCID 50当量的病毒。一头体重 25 公斤的猪每分钟吸入 15 升空气,据计算每天暴露于 4 log 10 TCID 50当量的病毒,这足以在易感猪中引起感染。威尔金森等人证明 ASFV 可以通过空气传播,病猪和健康猪之间的最大传播距离为 2.3 m,但在空气中未检测到该病毒。据报道,在感染病毒的猪舍的空气和出风口中定量检测到 ASFV。奥尔森等人证实 ASFV 可以通过气溶胶传播。总之,ASFV可以以气溶胶形式在猪舍内传播,这可能是ASFV在猪场传播的重要方式。2.2.3. 昆虫传播ASFV 是唯一可以通过载体传播的已知 DNA 病毒。到目前为止,仅发现Ornithodoros spp 的软蜱促进 ASFV 复制,并且是最常见的病毒载体。20世纪60年代,西班牙记录了第一例蜱类(O.erraticus)中分离出ASFV的病例。从那时起,已发现八种Ornithodoros物种与 ASFV 的传播有关。ASFV 可以在Ornithodoros蜱中水平、性、跨卵巢和跨性别传播。某些Ornithodoros蜱虫在感染后可长时间携带这些病毒。Ornithodoros蜱喜欢生活在野猪的巢穴中,成虫可以在不进食的情况下存活数十年,使得Ornithodoros软蜱成为理想的 ASFV 宿主,并在沙漠疣猪 ( Phachochoerus aethiopicus )之间维持 ASFV 的森林循环。已确认能够将 ASFV 传播给易感猪的Ornithodoros蜱包括O. coriaceus、O. puertoricensis、O. turicata、O. erraticus、O. marocanus、O. moubata complex、O. moubata porcinus和O. savignyi。然而,它们在中国的分布迄今尚未见报道。其他钝缘蜱种(O. tartakovskyi,O. tholozani,O.兔纽曼,澳papillipes和O. lahorensis诺依曼)在中国有分布,但不清楚这些物种是否参与传播非洲猪瘟病毒。据报道,网状革蜱(Dermacentor neticulatus)是一种硬蜱,也感染ASFV,可持续感染56天。2018 年在中国发现了一种可以感染硬蜱(D. silvarum和D. niveus)的新型 ASFV,这种新型 ASFV 可以通过卵巢传播,从D. niveus雌性成虫到第一代幼虫。然而,这两项研究均未表明硬蜱能够将 ASFV 传播给易感猪。其他可能传播 ASFV 的昆虫也有报道。例如,苍蝇 ( Stomoxys calcitrans ) 可以被 ASFV 感染并保持可检测的病毒数量至少两天 ]。此外,研究证实,苍蝇不仅可以机械地将 ASFV 传播给易感猪,还可以通过叮咬传播病毒。据报道,即使摄入了感染 ASFV 的苍蝇也会引起感染。然而,目前尚不清楚稳定的苍蝇在 ASFV 流行中扮演什么角色。此外,最此外,最近的研究表明,ASFV可能在水蛭(水蛭属)和接吻虫(科:水蛭科,亚科:水蛭亚科)中存在。在从实验感染的家猪身上采集的猪虱子(猪血蜱)中也检测到ASFV,而蝇蛆不是ASFV宿主,不能机械传播ASFV。2.2.4. 医源性传播ASFV 可能通过受污染的医疗设备从携带病毒的猪传播到易感猪,例如共用免疫针头,称为医源性传播。几项研究报告称,感染 ASFV 的猪的血液携带的病毒足以传播感染 ,因此医源性途径可能在 ASFV 传播中发挥重要作用。然而,该途径的感染效率及其在 ASFV 流行病学中的重要性仍不清楚。在中国观察到,在集约化养猪场ASF爆发初期,怀孕母猪往往比其他猪群(如保育猪和育肥猪)受影响的速度更快。这可能与 ASF 潜伏期内多次免疫期间共用针头污染有关。通过舍弃部分疫苗、减少大规模接种频次、严格实行单头单针接种等措施,近期我国爆发的非洲猪瘟疫情中,母猪发病率明显下降。2.2.5. 精液传播没有直接证据表明 ASFV 是否通过精液传播。然而,一些研究表明,在感染公猪的精液中可以检测到 ASFV。世界动物卫生组织(Office International des Epizooties,OIE)颁布了陆生动物卫生法典,规定公猪精液不得携带ASFV。2.2.6. 垂直传播Schlafer 和 Mebus 报告说,ASFV 感染导致母猪在实验条件下流产,但未能从流产胎儿收集的组织中分离病毒。据推测,流产可能是由母猪的感染应激引起的,而不是病毒本身的垂直传播。Antiabong 等提供了病毒垂直传播的分子证据。在该研究中,在表现出 ASF 临床症状的母猪的胎盘和胎儿器官中检测到 ASFV DNA,表明 ASFV 可能发生跨胎盘的垂直传播。但是,到目前为止,还没有其他病例的报道。我们总结了 ASFV 的不同传播途径及其特点和传播效率表格1.表1 ASFV 的不同传播途径及其特点和传播效率传播途径特征传输效率口腔传播摄入受病毒污染的饲料、饮用受污染的水或吞咽病毒颗粒。ASFV最重要的传播途径;通过饮用水的传播效率远高于通过饲料的传播效率。气溶胶传播空气中ASFV的滴度与粪便排出的病毒量呈正相关。ASFV 可以通过气溶胶在猪舍中短距离传播。虫媒传播ASFV 是唯一已知的昆虫传播 DNA 病毒;该钝缘蜱是最常见的载体,但其他昆虫(厩蝇,水蛭,接吻虫和猪虱)也传播非洲猪瘟病毒。Ornithodoros软蜱是维持沙漠疣猪和Ornithodoros蜱种之间 ASFV 森林循环的理想病毒库。医源性传播携带病毒的猪和易感猪用同一针进行免疫或注射治疗药物。医源性传播的感染效率及其在 ASFV 流行病学中的重要性尚未得到充分认识。精液传输ASFV 可以从受感染公猪的精液中分离出来,但没有直接证据表明 ASFV 可以通过精液传播;《陆生动物卫生法典》规定,公猪精液不应携带 ASFV。缺乏令人信服的数据。垂直传输除了一项报告病毒垂直传播的分子证据的研究外,仍然缺乏关于 ASFV 垂直传播的知识和数据。目前很难得出结论。2.3. 易感动物ASFV主要感染猪科(Suidae)的成员,如家猪、野猪和野猪,以及Ornithodoros软蜱。然而,临床症状仅见于家猪、野猪和欧洲野猪,而疣猪(非洲野猪和P. aethiopicus)、丛林猪(Potamochoerus porcus和P. larvatus)和巨型森林猪(Hylochoerus meinertzhageni)无症状ASFV 的携带者并充当病毒的宿主。人工感染其他动物(牛、小牛、马、羊、狗、猫、豚鼠、牛、刺猬、仓鼠、大鼠、小鼠和各种家禽)的尝试都失败了。几项研究表明,ASFV 可以在经过多次实验感染修饰后在兔和山羊中繁殖。从立陶宛和俄罗斯受 ASF 影响的农场采集的啮齿动物和鸟类血液样本的 ASFV 检测呈阴性 。陈等人。经测试的皮肤硬蜱(硬蜱科)(D. nuttalli、D. silvarum和D. niveus) 和绵羊和牛血,并在D. silvarum、D. niveus和绵羊血样本中检测到 ASFV DNA 片段。进一步的 DNA 序列分析表明它来自一种新型 ASFV。PCR 证实了这种新型 ASFV 在皮肤硬蜱(硬蜱科)硬蜱(D. niveus)中的跨卵巢传播。作者认为,这种新的 ASFV 毒株的宿主范围更广,例如绵羊、牛和硬蜱。不过,由于研究人员并没有分离出病毒并进行动物感染实验,因此应谨慎对待这一结论。三、防控策略3.1. 非洲猪瘟疫苗接种疫苗是控制家畜病毒性疾病的最佳措施之一。但是,目前没有有效的 ASF 疫苗可用。ASFV是一种结构复杂、基因组大(170~190 kb)的大型双链DNA病毒。它编码多种蛋白质(约 170 种蛋白质),包括多种免疫干扰蛋白。虽然部分病毒蛋白具有免疫原性,但主要抗原表位尚未确定,保护反应的确切机制尚不明确,阻碍了ASF疫苗的研制。ASF 疫苗的开发始于 1960 年代。研究人员探索并测试了不同类型的 ASF 疫苗,包括灭活疫苗,DNA疫苗,亚单位疫苗和病毒载体疫苗。不幸的是,几乎所有开发 ASF 疫苗的努力都失败了。灭活疫苗被证明是无效的,因为它们似乎不会诱导细胞免疫,即使添加了免疫佐剂。当主要中和抗原尚未确定时,亚单位疫苗可能无法很好地发挥作用。大多数 DNA 疫苗仅产生部分保护作用,甚至不产生保护作用,但最近显示出 100% 保护的一组载体疫苗除外 。有趣的是,ASFV 减毒活病毒疫苗 (LAV) 将更有前景。例如,最近一些基因缺失的 LAV 已显示出巨大的潜力。然而,没有合适的传代细胞系来支持 ASF LAV 的生产。此外,需要开发区分 ASFV 感染与接种动物 (DIVA) 的差异标记技术,并需要妥善解决安全问题。这些是目前限制 ASF LAV 发展的关键因素。3.2. 抗 ASFV 药物在过去的几十年中,一些化合物或市售药物证实在体外具有抗 ASFV 活性。据报道,aUY11 是一种芳香核苷衍生物,不仅对甲型流感病毒 (IAV) 和丙型肝炎病毒 (HCV) 等病毒具有显着的抑制活性,在 Vero 细胞中还可以以剂量依赖的方式抑制 ASFV 的增殖。此外,Freitas 和 Mottola 等人发现氟喹诺酮类药物可以通过阻断 ASFV 的 DNA-Topo II 来抑制病毒复制。加拉多等人发现白藜芦醇和氧化白藜芦醇等多酚可以通过抑制病毒 DNA 复制和晚期病毒蛋白合成来抑制 ASFV 的增殖。桑切斯等人报道临床上用于治疗水肿性疾病的药物阿米洛利作为巨噬细胞的有效抑制剂,对 Vero 细胞具有显着的抗 ASFV 活性。然而,对这些化合物的研究仅停留在体外条件的细胞水平上,它们对 ASFV 感染猪的潜在影响仍有待确定。3.3. 抗 ASFV 猪一个世纪以来,世界各地的科学家们一直在不知疲倦地筛选和探索抗 ASFV 的猪,但收效甚微。世界上最早关于抗ASFV猪的报道可以追溯到1914-1917年。通过攻击试验,蒙哥马利证实 ASFV 对家猪和非洲野猪(非洲丛林猪和疣猪)的致病性完全不同;家猪的攻击引起广泛的心、肺、脾、胃、肾和淋巴组织损伤,导致100%的死亡率。至于野猪和疣猪,几乎没有临床症状,也没有死亡病例,但有2头死于ASFV以外的不明原因,有轻度肠胃炎(1只野猪)和双肺严重肺炎(1只疣猪)。没有其他组织和器官损伤 。本研究首次证实非洲丛林猪和疣猪对 ASFV 具有抗性。事实上,非洲疣猪、丛林猪和巨型森林猪作为 ASFV 的宿主,可以无症状感染 ASFV,并表现出明显的 ASFV 耐受性;然而,几乎所有各个年龄和品种的家猪都对 ASFV 易感,导致不同程度的临床症状。虽然 ASFV 抗性的差异可能与不同猪种的遗传差异有关,但我们仍然不知道 ASFV 易感性的遗传决定因素。帕尔格雷夫等人比较疣猪和家猪的基因组,发现这两个物种之间在参与 NF-κb 细胞因子信号转导的 Rel-like 结构域含有蛋白 A(RELA,也称为 P65)的差异,表明这种基因差异可能是疣猪和家猪对 ASFV 感染易感性不同的遗传基础。利利科等人利用基因编辑技术,将家猪RELA基因替换为疣猪RELA同源基因;然而,结果表明,将疣猪 NF-κB 基序替换到家猪的 RELA 中不足以赋予对 ASFV 的抗性。一项早期研究发现,CD163 是 ASFV 感染的巨噬细胞特异性受体,这表明可能通过敲除 CD163 基因来产生 ASFV 抗性猪。有趣的是,据报道 CD163 缺失的猪对 PRRSV 感染具有抗性。然而,随后的研究证实 CD163 不是 ASFV 感染的必需受体,从而降低了这一假设的可行性。除了基因编辑技术,另一种培育抗ASFV猪的方法是收集和筛选在ASFV爆发国家或地区存活的耐受猪。通过科学实验验证,可以筛选出天然抗ASFV的猪。彭里斯等人在莫桑比克北部获得了一组对 ASFV 具有较高抗性(ASFV 循环抗体流行率高)的家猪,以研究它们的后代是否具有遗传性 ASFV 抗性;不幸的是,在 105 个后代受到挑战后,其中 104 个发展为急性 ASF 并最终死亡。事实上,筛选天然抗ASFV猪是一项长期、大样本、耗时、费力的工作,或许还需要一点运气。2020年3月,来自中国的研究团队报道了抗ASFV家猪LS-2,这是全球首次成功鉴定抗ASFV家猪,这对ASFV-抗性家猪的筛选具有重要意义。抗性猪研究在BSL-3实验室进行,通过对基因II型ASFV强毒株的攻毒试验,结合抗感染反应特征分析,发现LS-2猪对口腔感染具有显着抗性。口服10^6.0 TCID 50 ASFV SY18 株后,与普通家猪相比,LS-2猪在攻击后存活率、病毒血症、临床症状和抗体反应均有明显改善,炎症因子表达也有显着差异。报告提出了另一种 ASFV 防控的可能性,即培育自然抗 ASFV 的家猪。为此,有必要进一步探讨 LS-2 家猪对 ASFV 的抗性:(1) 应使用多种 ASF 病毒株,包括来自不同基因型的病毒株来攻击 LS-2 猪,以探索其广泛的ASFV 抗性。(2) 经口途径和医源性途径均是猪感染ASFV的可能途径;因此,在实验条件下,病毒攻毒还需要采用不同的感染方式,如口服、肌内注射等,来综合验证LS-2猪在这些不同情况下的ASFV抗性。(3)双向哨兵猪试验,设置两个实验组:普通家猪和LS-2猪在同一圈内饲养,对一组普通家猪进行挑战,观察对LS-2猪生产性能的影响;另一组LS-2猪也受到挑战,观察对普通家猪生产性能的影响。(4)应评估LS-2仔猪后代对ASFV的抗性,探索其抗病毒特性是否可以遗传,尤其需要评估LS-2与杜洛克杂交后代是否具有ASFV抗性。(5)抗ASFV猪的抗病毒机制需要在分子水平上进行探索,为抗病育种提供理论依据。我们将上述五个研究问题归纳为三个层次图2.图2 需要进一步探索的三个级别的 LS-2 ASFV 抗性特征3.4. 高效消毒消毒是使用化学或物理试剂消灭传染性生物的方法。有效的消毒策略需要充分了解 ASFV、正确的消毒剂、消毒方法、工作浓度和持续时间、消毒剂的合适操作温度以及可能的其他参数。此外,应考虑仔细设计的消毒前清洁和严格的消毒后监测程序。有几篇论文各种条件下描述ASFV的生存能力,核心信息总结在表 2, 不同的消毒方法及其常见的应用见于 表3. 一般情况下,猪场与外界接触的区域需要进行常规消毒,如售货仓、料场、员工入口、后备母猪领取区等。消毒前清洁是消毒过程中最关键的要素。在养猪场,当动物不能转移时,消毒通常是无效的。因此,采用全进全出饲喂模式,减少田间病原体循环,在“停工期”进行猪舍消毒更为实际有效。需要避免足浴和轮浴的不当操作,以达到理想的消毒效果。例如,消毒剂应每 2-3 天补充一次,避免雨淋,因为这会稀释消毒剂,并远离雪以防止冻结;此外,靴子上的粪便、泥土或其他杂物在浸泡在消毒剂中之前要彻底冲洗干净,并需要确保浸泡时间。总之,成功的消毒需要多方面的仔细考虑,而失败的消毒只需要一个小错误,包括使用过稀释的消毒剂、清洁不彻底、接触时间不足、温度、湿度、pH值不合适等。最后,ASFV必须进行核酸检测以监测消毒效果。表 2 ASFV 在不同条件下的生存能力状况可行性特征温度37 °C/11–22 天56 °C/60–70 分钟60 °C/15–20 分钟耐低温性强,但对高温敏感酸碱度3.9 pH 13.4,不含血清/21 小时pH 13.4,含血清/7 天广泛的pH耐受性,可以通过血清增强血液血液储存在 4 °C/18 个月腐败血液/15 周血液增强 ASFV 的生存能力粪肥/围栏粪便 4 °C/8 天粪便 37 °C/3–4 天尿液 4 °C/15 天尿液 21 °C/5 天尿液 37 °C/2–3 天受污染的猪圈/1 个月ASFV在粪便中的生存力受温度影响,低温有利于病毒存活猪肉/内脏肉 4–8 °C/84–155 天咸肉/182 天干肉/300 天带骨或不带骨的肉、碎肉/105 天熟肉(在 70 °C 下至少 30 分钟)/0 天熏肉/30天冷冻肉/1000天冷肉/110天内脏/105天皮肤/脂肪(甚至干燥)/300天脾脏储存在冰箱里/>204天骨髓(去骨肉中)/180-188天组织或器官中的病毒可以存活很长时间,高温有利于病毒的消灭饲料/水饲料,被传染性血液污染,4 °C/30 天水,被传染性血液污染,4 °C/>60 天污染饲料,室温/1 天污染水,室温/50 天污染饲料,4 °C/> 30 天污染饲料,4 °C/> 60 天ASFV 在水中比在饲料中存活得更好化学品/消毒剂0.8% 氢氧化钠/30 分钟2.3% 氯(次氯酸盐)/30 分钟0.3% 福尔马林/30 分钟3% 邻苯基苯酚/30 分钟1% 氢氧化钙/30 分钟消毒剂的规定浓度和接触时间是灭活ASFV的关键表3 不同的消毒方法及其常见的应用类型特征应用水热水溶解无机盐,乳化脂肪,冲走有机碎片,轻松杀死ASFV。猪圈清洁和消毒时,避免烫伤工人或旁观者。氧化钙石灰洗涤(与水混合的氧化钙)对细菌和病毒(包括 ASFV)具有杀菌作用。种群减少后散布于地面或埋葬尸体。氯消毒剂浓度、pH 值、天然蛋白质的存在和氨会影响氯基消毒剂的功效。常用于高浓度的水消毒和污水处理,而粪便通常对次氯酸钠基消毒剂有抑制作用。碘和碘基消毒剂碘伏是碘与各种载体化合物的组合。硬水和有机物质会降低碘伏的活性。碘伏用于一般清洁和消毒,例如乳头浸液和手术擦洗。氢氧化钠具有腐蚀性和刺激性,对环境和人有潜在危险。设备、车辆和污水消毒。酚类化合物强烈的气味,包膜病毒对它很敏感,猪也一样;小剂量对猪可能是致命的。用作动物设施入口处的足浴消毒剂。有机酸杀菌和温和的杀病毒特性使有机酸成为食品加工中消毒剂的理想选择。用于饮用水、饲料和蔬菜消毒。甲醛甲醛熏蒸只有在温度在13℃以上,相对湿度在70%以上时才能完成。用于熏蒸车辆、房间,甚至可以密封的建筑物。3.5. 高水平的生物安全国际机场、码头、火车站等海关部门要严格检验检疫猪源产品,防止国际旅客携带任何猪肉产品入境。国际航班、轮船或火车上的剩菜应妥善处理。一旦一个农场被确认为ASFV阳性,应在感染农场周围实施3公里的保护区和10公里的监测区,并严格限制生猪在这些区域内的运输。受影响的养猪场应清零,扑杀的猪应焚烧、深埋或堆肥,最后,对养殖场区域以及所有设备进行彻底消毒、清洁和干燥至少 40 天。科学设计猪场结构和实施严格的生物安全措施是有效切断ASFV传播途径的前提,从而保护易感动物免受ASFV感染。一个典型的猪场生物安全主要包括八个方面,如图表 4. 其中,人员入口和隔离室需要特别考虑。人员出入口及隔离室结构图如图图 3. 员工入口分为脏区、过渡区、洁净区三部分,两个不同区域之间设置实木长凳(屏障),避免交叉污染。员工将“脏”的衣服、鞋、帽留在脏区,在过渡区洗手、洗澡,然后换上干净的工作服和靴子进入隔离室,并在那里停留2天。在此期间,在实验室中收集并测试鞋底、手指和头发的拭子。如果测试结果为阴性,他们将被允许进入农场。由于人员是 ASFV 感染的重要来源、养猪场要注意员工入口和隔离室的基础设施建设,有严格的准入流程,并确保落实。图 3 员工入口走廊及隔离室结构图。箭头代表单向步行路线。员工将“脏”的衣服、鞋、帽留在脏区,在过渡区洗手、洗澡,然后换上干净的工作服和靴子进入隔离室,并在那里停留2天。干燥中心(60℃,>20min)和消毒室(不能耐高温的材料,如特殊药物或疫苗产品,臭氧熏蒸,或紫外线照射[ 101 ]可用于对材料进行消毒)物品消毒。控制室和储藏室分别用于监控人员进出和消毒物品的存放。表 4 典型猪场生物安全系统的八个问题关注点关键技术点位置和布局养猪场选址的首要原则是远离其他养猪场、屠宰场、居民区和交通线路。小母猪引进安全生猪生产者应减少或停止小母猪引进。否则,必须通过空气过滤运输并在严格监控下引入ASFV阴性后备母猪。设置围栏养猪场周围的围栏可以作为物理屏障,防止外人进入养猪场区域,并使动物远离猪。常规消毒有效的消毒需要正确的消毒剂、消毒方法、工作浓度和持续时间、合适的消毒剂操作温度、精心设计的消毒前清洁和严格的消毒后监测。车货烘干中心ASFV 对高温敏感,因此,封闭的车辆干燥室和 60°C(>20 分钟)的良好消毒对于确保 ASFV 完全灭活非常有用。员工入口走廊和隔离室需要建造设计良好的员工入口和隔离室,分为脏区、过渡区和洁净区三个部分,以降低员工携带 ASFV 的风险。病猪和死猪的处理禁止在养猪场内及周边进行尸体解剖,按照高危病原安全采样、运输和检测的规定,尽快在猪场外的指定设施采集疑似猪的样本进行检测。饲料安全停止泔水喂养,开发新的饲料生产技术,灭活饲料原料或全价饲料中可能存在的ASFV,确保猪血清蛋白粉的安全。4. 养猪场重新繁殖自2018年8月首次爆发ASF以来,我国生猪存栏量持续减少,导致生猪存栏量大幅减少。农民们一直试图重新养猪场,但大多数早期的尝试都失败了。根据MARA发布的全国400个定点县监测数据,2019年11月,全国生猪存栏总量首次回升,环比增长2.0%。更令人鼓舞的是,2019年10月种猪存栏数首次实现环比增长0.6%,之后连续5个月环比增长。2020年2月,种猪存栏数较2019年9月增长10.0%,至2021年6月末,种猪存栏数分别达到4564万头和4.39亿头,最终接近正常水平年,这表明中国的养猪场重新繁殖是成功的。与中小型养猪场相比,大型养猪企业凭借资金和技术优势,实现了更好的生产恢复。例如,中国最大的养猪企业之一的黑龙江大北农农牧食品有限公司(中国黑龙江)的母猪数量从非洲猪瘟爆发前的5.7万头增加到9.5万头。目前,增长了67%。该文章的共同作者之一参与了2019年6月以来13个养猪场的重新繁殖,这些重新繁殖场的母猪数量从3000头到5000头不等。到2021年5月,13个猪场全部恢复正常生产,实现100% 的重新填充成功率。养猪场重新繁殖包括六个步骤,如图图 4 关键技术点总结在 表 5. 中国养猪场繁殖的途径和实施可为世界其他国家提供借鉴。图 4 养猪场重新繁殖的流程图。首先,应进行再种群风险评估。然后,建立或改造相关设施,提高生物安全管理水平。之后,对农场进行彻底清洁和消毒,并在小母猪引入前通过实验室消毒测试和/或前哨动物评估来评估消毒效果和农场安全性。最后,进行正常生产并定期监测 ASFV 感染。表 5 猪场复养六步关键技术要点重新填充步骤关键技术点重新繁殖风险评估之前分析农场ASFV爆发的原因并考虑清楚是否可以补救,调查农场周围的ASF流行情况(ASFV再次入侵在选址有缺陷的农场往往难以避免)。提高生物安全管理水平需要建设或建设相关设施(员工入口走廊、隔离室、围栏、车辆及物料烘干中心、后备母猪培育单元(GDU)、物料中转站、车辆清洗消毒中心、淘汰猪中转间、饲料中转塔)装修; 需要设立专门的生物安全岗位,需要明确工作职责,需要招聘新员工,需要定期进行严格的培训。农场消毒水消毒可选用含氯消毒剂或有机酸,下水道消毒可选用氢氧化钠,环境消毒可选用过硫酸钾;猪舍的消毒可结合常规消毒剂、热水、火焰燃烧、空置烘干、甲醛熏蒸。对于车辆消毒,可以使用清洁剂和消毒剂并结合高温干燥。消毒效果及农场安全评价收集环境和谷仓棉签,送至实验室进行 ASFV 检测,以评估消毒结果。只有在消毒后测试和/或前哨动物评估显示该场所含有残留病原体的可能性较低时,才应重新放养健康动物。后备母猪介绍后备母猪来自 ASFV 抗原和抗体双阴性种猪场。使用封闭式空调车辆或装有空气过滤系统的车辆,以确保运输安全。后备母猪应在 GDU 中隔离并观察至少 30 天。在此期间收集和测试口腔液和血液样本,ASFV 阴性结果将允许小母猪被释放到农场。正常生产和 ASFV 监测收集所有入境人员和车辆的拭子样本用于实验室 ASFV 检测。定期采集病猪的血液和口腔液样本,以及猪舍通风风扇叶片的拭子样本进行检测。一旦检测到阳性结果,就要启动相应的预警措施和纠错程序。5 结论ASFV 在全球已有 100 多年的历史。可以预见,在未来很长一段时间内,它将继续威胁世界各国的养猪业及相关产业。尽管非洲猪瘟防控措施还很有限,但从非洲猪瘟防控成功和失败的尝试中积累的经验可以为从业者提供指导。ASF LAV和载体疫苗、抗ASFV药物和抗ASFV猪的突破和进展,伴随着中国猪群的复苏,将为从业者传递正能量和信心。如果科学认识ASFV传播的三个关键要素,确保猪场的生物安全,分步实施再繁殖,ASFV防控工作必将取得成功。来源:非瘟复养实战
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    2022

  • 圆环病毒的代表性疾病主要有哪几种?该如何预防?

    猪圆环病毒病是以免疫抑制为特征的病毒性传染病,临床表现较为复杂。圆环病毒对免疫器官有严重的侵害性,可导致机体免疫系统的高度抑制。可以肯定的是,圆环病毒属于病毒性传染病,造成的危害主要为引起免疫抑制,诱发或继发其他病原感染,常见的姊妹病有副猪病,应对措施需要对症治疗,没有任何一种药物能直接杀死圆环病毒,针对猪的症状采取适当药物治疗。猪圆环病毒病是以免疫抑制为特征的病毒性传染病,临床表现较为复杂。圆环病毒对免疫器官有严重的侵害性,可导致机体免疫系统的高度抑制。通俗的讲,圆环病毒可以使疫苗免疫失效,机体免疫力减弱或消失。圆环病毒的代表性疾病主要有如下几种。一、 PIDS(猪免疫缺陷综合症)1.猪机体抵抗力降低,更易继发感染其他病原,这也是圆环病毒与猪的许多疾病混合感染有关的原因。2.减弱疫苗或低致病性微生物可引起发病。3.接种疫苗后不产生免疫应答。4.重复发病,对治疗无应答性。二、PMWS(猪多系统衰竭综合症)最常见的是猪只渐进性消瘦或生长迟缓,这也是诊断PMWS所必需的临床依据,其他症状有厌食、精神沉郁、行动迟缓、皮肤苍白、被毛蓬乱、呼吸困难、咳嗽等。发病率一般很低而病死率都很高。四季均可发生,主要危害断奶后2~3周的仔猪。实行早期断奶的猪场,仔猪也有该病的发生。病毒可随粪便和鼻腔分泌物排出体外,经消化道传播或者经胎盘垂直传染仔猪,发病率和死亡率不定;呈地方性流行时,发病率和死亡率均较低,但急性爆发时,发病率可达50%,病死率高达20~30%。如果该病与猪细小病毒或猪繁殖与呼吸综合征病毒、链球菌、多杀性巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌等混合感染时,仔猪的死亡率会更高。三、PRDC(猪呼吸道疾病综合症)指育肥猪的顽固性肺炎,难以根治,极易反复,最后因肺衰竭或继发其他感染而死。一般情况下是以圆环病毒为主,肺炎支原体、猪流感、繁殖与呼吸综合症、巴氏杆菌、副猪嗜血杆菌、胸膜肺炎放线杆菌等继发感染的呼吸道严重疾病。死亡率可达20%以上。四、PDNS (猪皮炎和肾病综合症)多发生于12-14周龄。病猪表现为厌食、呆滞、苍白、发热、结膜炎,呼吸困难、腹泻,消瘦。皮肤上出现圆形或不规则坏死灶。主要危害生长育肥猪,死亡率15%~20%。耐过猪发育不良,生产缓慢,成年猪一般为隐性感染,不表现任何症状和病变,但生长速度明显下降。五、PDS(猪腹泻综合症)饲养的育肥猪在很多情况下出现久治不愈的不明原因腹泻。其临床表现为腹泻与正常排便交替出现,用药效果不明显,反复迁延。病因则是圆环病毒损害肠道组织,肠道组织功能衰竭,肠壁萎缩,引起的慢性肠炎,这种肠炎治疗非常困难。六、PCNS(猪中枢神经系统疾病)1.仔猪先天性震颤  多见于出生后一周以内的小猪,仔猪出生后震颤不止,常因为吃不到奶而饿死,如果加强护理并保证仔猪能吃到初乳、不冷、不饿,一般过几周后能存活。2.育肥猪不明原因瘫痪  育肥猪突然后腿不灵活及瘫痪等。七、繁殖障碍感染母猪表现为流产、死产、木乃伊胎增多、断奶前死亡率上升等。
    04-14

    2022

  • 兽药知识 | 中兽药补中益气散的兽医临床5种用法

    在临床上补中益气散有五种使用方法,临床效果显著,对兽医工作者来说属于简单易行的治疗方法,供大家参考灵活应用。断奶保育猪这个时期不能单独用一种或者两种药物,需要组方,而补中益气散在其中起到一个关键性的作用,因为这个时期需要预防的问题比较多,预防断奶应激引起的腹泻,增强仔猪在断奶时的抵抗力,预防咳喘、球虫性腹泻等,可以有效的预防断奶仔猪的腹泻和应激性的反应。增加断奶仔猪的成活率。补中益气散在这里是预防过料腹泻和增强猪体抵抗力。繁殖母猪上在繁殖母猪上,特别是配种到30天的妊娠初期,用补中益气散1kg拌料500斤投喂,早期保胎防滑胎效果好,据市场反馈,1000头繁殖母猪,用上述方法的妊娠前期流产率在1%以下;在妊娠中期(31天-妊娠85天),补中益气散1kg拌料1000斤,长期投喂,可以减少由于繁殖母猪应激或者别的原因引起的流产,这个比例也是在1%以下,特别是85天左右的时候由于有些母猪蓝耳抗体的不稳定后,会引起这个时期的流产,所以投喂后,就不会引起这个症状发生了;在妊娠后期(86-114天),补中益气散1kg拌料500斤投喂,可以增加仔猪的出生重,避免1kg以下的弱胎。 预防母猪由于产力不足引起的难产,产程保持在4个小时左右,催乳效果明显,投喂补中益气散的母猪,产后根本就不会引起奶水少的问题,也不用添加别的增加奶水的药物,产后泌乳期1kg补中益气散拌料500斤投喂,其目的是使奶水充足,增加仔猪的抵抗力,预防繁殖母猪阴虚,使断奶后7天内正常发情配种,如果上述方案坚持使用的话,可以延长繁殖母猪的利用胎次。猪水样性腹泻临床上猪水样腹泻有几种可能:传染性胃肠炎,流行性腹泻,猪冬痢,但是不管那种原因引起的水样腹泻,补中益气散都是疗效确切的。临床上我们用补中益气散1kg+常福康500克拌料500斤投喂3-5天,上述病因引起的症状就会完全消失。临床上效果非常显著。对上述两种药物单独投喂做了临床上尝试性治疗发现单独投喂补中益气散后水样腹泻症状在4天左右消失,单独投喂四黄止痢的时候症状需要6-7天消失,如果两种药物同时添加,最快3天水样腹泻症状消失。其原因可能是,水样腹泻的前期以腥臭味比较浓的黄绿色水样便和黑色水样便为主,这个时期按照中兽医诊断为热痢,后期变成无味的水样腹泻,中兽医认为为寒痢,而补中益气散治疗寒痢效果很好,久泻寒症;而常福康治疗热痢的水样腹泻效果好。所以两者结合,补齐不足,发挥其各自优点,治疗临床上不管是寒痢还是热痢的水样腹泻,效果都是非常明显的。牛水样腹泻牛的水样腹泻临床上多见为牛弯曲杆菌引起的牛冬痢,一般体温没有变化,喷射状腹泻,黑色,黄绿色,特别是在冬季,养殖户早上会发现牛粪全部喷在墙上冻住;第二种常见的是温和些牛病毒性腹泻-牛副黏膜病,临床只会出现剧烈的水样带黏液和血液的粪便。这两种临床常见的症状,用补中益气散:1000斤牛口服500克,牛犊200斤口服300克,如果发现及时,一次投喂药物即可症状消失。其药理根据中兽医的理论是牛的这种水样腹泻属于寒痢的范畴,而此药专门是治疗寒痢的。热病用寒药,寒症用热药的中兽医用药原则,在兽医临床上诊断上显得尤为重要。牛血便牛血便主要分为两种,一种是黑色的,这种血便一般都是前端消化道引起的,牛的肠胃很容易就会引起血便;第二种是新鲜的血便,这种牛犊和育肥肉牛多见,跟吃的太多,直肠粘膜毛细血管出血有直接的关系,根据中兽医的原理,脾不统血,会引起血便,所以用补中益气散:1000斤牛600克口服,200斤牛犊口服300克,牛犊用药相对比大牛要多一些,温水送服,临床上一般一次量就可以让症状消失,而且不反复。建议发烧的时候先不要灌服,其它情况都可以灌服。
    04-14

    2022

  • 疾病防治 | 猪肺线虫病的病原学与综合防治措施

    摘要:猪肉作为汉族人生活中常见的肉类产品,随着人们生活水平的不断提高,其市场需求量逐渐增加。生猪养殖是乌兰察布市畜牧养殖产业的重要构成部分,加强疫病防控管理工作,保障猪肉产品品质安全,对提高养殖经济效益具有重要意义。猪肺线虫病作为生猪散养中常见的一种疾病,会对生猪呼吸系统造成严重危害,影响到生猪正常发育,对于该病的治疗需要对其病原学有详细了解,并掌握其临床症状表现,把握诊断要点,提高治疗用药的针对性,同时还要在日常喂养管理中,做好相应的疾病预防工作,降低发病率,保证养殖效益。关键词:生猪养殖;猪肺线虫病;病原学;防治猪肺线虫病又叫做猪后圆线虫病或寄生性支气管肺炎,它的主要致病原是后圆线虫,发病过程是后圆线虫寄生到生猪的支气管和细支管中而引发的呼吸道类疾病,该病的中间宿主以蚯蚓为主,是生猪疫病中发病率较高的一种病害,尤其是在仔猪群中,使生猪出现呼吸急促、咳嗽、贫血等症状,会严重影响到生猪机体发育,甚至于引起生猪死亡。在对该疾病的治疗和预防工作开展中,需要准确把握其病原学特征,选择合适的药物进行治疗,并在日常喂养管理过程中做好各项预防工作。1 乌兰察布市生猪养殖情况乌兰察布市位于内蒙古自治区中部地区,地理位置上处于我国正北方,地域总面积有54,500km2,东西长458km,南北宽442km,下辖1区、1市、4旗、5县。乌兰察布市是重要的农业生产基地,2018年入选中国特色农产品优势区名单,2020年乌兰察布市地区生产总值完成826.9亿元,第一产业增加值完成138.2亿元,同比增长0.6%。乌兰察布市地貌类型复杂多样,主要以高原、丘陵、山地、盆地、平原等地形为主,气候属于中温带半干旱大陆性季风气候,四季特征鲜明,雨热同季,南北气候差异较大,年均气温在1~6℃之间,年均降雨量在150~450mm之间,年平均太阳总辐射量为5,500~6,200MJ/m2,年平均日照时数为2,775~3,080h。2020年,乌兰察布市生猪养殖产业稳步发展,其中存栏母猪数量达到6.5万头,年出栏生猪100万头。在生猪养殖的疫病管理工作开展方面,乌兰察布市出台了多项扶持政策,不断健全疫病防控服务体系,进一步完善畜产品安全检疫工作,严格落实检疫监管、消毒灭源、应急储备等各项措施。2 猪肺线虫病的病原学概述2.1病原学该病的主要致病原是后圆线虫,后圆线虫有三种类型:长刺后圆线虫、复阴后圆线虫、萨氏后圆线虫。长刺后圆线虫是危害最严重的一种,该寄生虫虫体呈丝状(故又称肺丝虫),整体颜色为乳灰白色,雄虫和雌虫在体形上有一定差异,雄虫长度在12~26mm之间,雌虫长度在20~50mm之间。该圆线虫在发育为成虫后会寄生在生猪肺脏隔叶的支气管中,并且还会在该部位产卵繁殖,之后再经过器官分泌物传染到口腔部位,再在食物吞咽下进入到消化道,最后随着粪便排泄物排出体外。长刺圆线虫可以在土壤中发育生长,条件适宜时会孵化出幼虫,其它虫卵会被土壤中的蚯蚓食入体内,进入蚯蚓体内的幼虫会进行2次蜕皮,在经过一段时间后会发育成具有感染性的幼虫,一旦进入到生猪体内,感染性幼虫就会在生猪的消化道内逸出,并进入到盲肠和结肠肠壁中,侵入肠系膜淋巴结,在该部位会发育3~5d的时间,经过2次蜕皮后又会顺着淋巴管在血液循环作用下到达肺脏部位,进入肺脏后会对肺泡壁和毛细血管进行破坏,也会进入到支气管内腔,经过3~5周时间的发育会成长为成熟的雌虫和雄虫。生猪在感染此病后,圆线虫会在生猪体内存活一定时间,短则3~5个月,长则1年之久,而其病原在干粪中可存活7~9个月,环境湿润的话可达1年半之久。2.2发病特点猪肺线虫病是一种世界性通病,在各个国家都有发生,它的最主要传染源是已染病猪或含有虫卵的排泄物,主要的传染途径是以蚯蚓为中间宿主,生猪养殖区域有蚯蚓存在的都有可能引起该病发生。从发病群体来看,该病集中发生在2~9月龄的仔猪群体中,而且致死率也比较高,最高可达30%,随着仔猪不断生长发育,其自身体质逐渐增强,身体免疫力也会有所提升,发病率会有所下降。3 临床症状表现生猪感染肺丝虫病后,最明显的症状表现就是其进食量大大减少,生长发育不良,体型消瘦,并且皮毛干燥无光泽,伴有阵发性咳嗽现象,特别是在温度波动较大时,咳嗽症状会加剧,部分病猪的鼻孔内也会有脓性黏稠分泌物流出。如果病情较为严重的话,还会出现呼吸困难现象,呼吸也会以腹式呼吸为主,通过对胸部进行触诊可发现生猪有明显的疼痛感。除此之外,部分病猪还会出现呕吐、腹泻、四肢浮肿现象,整体精神状态萎靡不振。4 病情诊断对于猪肺线虫病的检查诊断,目前还是以实验室诊断为主,兽医人员可以采集染病猪的粪便、呕吐物等作为检查样品,以饱和硫酸镁溶液进行相关物质分离检测,采用漂浮法来完成样品检测过程。在实验室检验中,技术人员可以在显微设备中对样品进行观察,如果样本外膜结构是粗糙的椭圆形卵,并且表面凹凸不平,长度为40~50μm,宽度为32~45μm,则就可以确诊为感染了肺线虫病。此外,通过病理剖检,可以发现染病猪的肺隔叶后缘出现灰白色隆起现象,切开后在支气管中发现有大量的丝状虫体,也可确诊为感染了肺线虫病。5 猪肺丝虫病的综合防治措施5.1治疗根据生猪染病情况,可以施加合理的药物,确保病情得到及时控制。首先,皮下或肌内注射5%盐酸左旋咪唑注射液;其次,皮下注射伊维菌素,注射量为0.3mg/kg·bw,连续注射2d左右,1次/d即可见效。除此之外,在药物治疗前,需要兽医人员对生猪进行健胃、养胃,可以在喂养饲料中添加适量的健胃药物,这样可以确保治疗效果良好。5.2预防措施1)加强喂养环境管理生猪喂养环境的优劣在很大程度上影响着猪肺线虫病的发病几率,本地区生猪养殖区域的土壤多为腐殖质土层,土层适宜蚯蚓生长,蚯蚓数量较多,对于养殖人员来说,要在日常管理工作开展中,及时清理和打扫猪舍内粪便、污水、剩食等垃圾,避免长时间堆积滋生大量病菌,同时还要保持良好的通风条件,提高饮水水源质量,还要定期对猪舍环境进行消毒,消毒也要全面,包括对猪舍内地面、墙面、喂具、粪便等,切断病菌传染途径,为生猪健康生长提供安全舒适的环境。除此之外,将猪场建在高燥干爽处,猪舍、运动场应铺水泥地面;墙边、墙角疏松泥土要砸紧夯实,防止蚯蚓进入,减少放养形式,在日常管理中一旦发现生猪异常,就要进一步检查,确诊感染疾病后要第一时间进行隔离,并消除土壤中的蚯蚓,对于染病致死的生猪,也要以焚烧或深埋方式处理,避免病原的传播。2)做好驱虫工作猪肺线虫病的主要致病原为圆线虫,该虫生长过程中的中间宿主是蚯蚓,在夏季环境温度、湿度合适条件下,该虫比较活跃,发病率也会由此提高,此时需要养殖管理人员及时进行驱虫,并对周围蚯蚓进行消灭。在该病害的流行区域,定期驱虫,根据生猪体重服用30~40mg/kg·bw的阿苯达唑药物,对于发病率较高的仔猪来说,要在其出生后的2~3月进行第一次驱虫,之后每间隔2个月进行1次驱虫,保证仔猪健康发育。3)对粪便进行无害化处理结合该病的实际防治经验可知,染病猪的粪便排泄物也是重要的传染源,粪便中含有较多圆线虫虫卵和幼虫,如果不及时彻底处理,则会进一步加大传染风险。因此,在该疾病的流行区域,需要定期对生猪粪便进行彻底清理,实行无害化处理,尤其是服用过驱虫药物生猪所排出的粪便,要将粪便集中运输至专门地点,以高温堆积发酵的形式进行无害化处理,杀死粪便中存在的圆线虫虫卵和幼虫,从而消灭该病的传染源,降低该病的发生几率,为生猪生长全过程提供安全保障,提高其养殖经济效益。6 结语畜牧养殖产业的规模化、产业化发展,客观上要求牲畜疫病防控工作要切实落实到位。生猪养殖作为新时期农民增收的有效手段之一,加强对猪肺线虫病的防控,综合采取多项有力措施,提高药物治疗的针对性,可以大大降低该病发生几率,从而保证生猪健康生长,提高养殖经济效益,增加农民收入。参考文献:略作者:张锦美/内蒙古乌兰察布市动物疫病预防控制中心来源:《中国动物保健》2022年3月刊
    04-14

    2022

  • 【肾世图卷】异种肾移植的一大突破性进展——首例临床级猪肾异种移植

    全世界约有近1000万人需要肾脏替代疗法(KRT),4实际数字可能远远大于这个数字,因为许多国家没有国家终末期肾病(ESKD)登记处 ? 全世界约有近1000万人需要肾脏替代疗法(KRT),4实际数字可能远远大于这个数字,因为许多国家没有国家终末期肾病(ESKD)登记处对这些患者进行肾脏替代治疗的最佳方法是肾移植。移植不仅延长了生命,且提高了生活质量移植早在公元前2000-3000年的印度神话就有记载,具有象头的Ganesha神就是由Lord Shiva进行头颈部移植手术的结果 1954年在同卵双胞胎之间进行了第一例成功的肾移植。随着有效的免疫抑制剂的出现,医生能够打破免疫屏障,甚至在完全不相关的供体和受体之间进行移植也已成为可能 尽管移植医学已经有了很大的进展,然而根据USRDS数据,仍有40%的移植候补患者在等待肾脏时死亡???? 如果可以使用异种肾肾脏,就可以提供大量肾源 近期UAB发表了一篇关于基因工程猪肾脏早期异种移植的病例报告,是异种移植领域发展的一大步01异种移植史 非人类灵长类(NHP)    ✔1963年,Reemtsma等学者将黑猩猩肾脏移植给ESKD患者,但大多数患者在8周内出现排斥或感染,100%死亡    ✔ 随后使用猴子和狒狒的肾脏也不太成功 非灵长类    ✔ 猪肾脏是比系统发育相似的NHP更可行的器官来源,包括大小/重量,在19世纪80年代开始尝试    ✔ 然而当野猪的心脏或肾脏被移植到人类或NHP中时,会在几分钟内发生超急性排斥反应(HAR),并在24小时内破坏移植物。这是由于抗体介导的排斥引起的补体激活。人类天然具有与猪血管内皮结合的预先形成的抗猪抗体,导致血栓形成、间质出血和水肿 图示野生型猪肾移植至狒狒,在移植和再灌注后立即(A)和10分钟后(B)发生超急性排斥时的宏观外观。(C)野生型猪心脏移植物超急性排斥反应的组织病理学。狒狒体内形成的抗猪抗体与猪肾血管内皮上表达的抗原结合,补体介导导致血管内血栓形成和间质出血因此基因工程在异种移植中就显得尤为重要02猪基因工程 19世纪90年代,多个研究小组独立提出了对供体猪肾脏进行基因改造 最初的尝试是引入人补体调节蛋白以防止受体补体激活。这种尝试将移植物的存活时间延长了几个月 在猪体内识别出人类排异的主要抗原(如α1,3 半乳糖或GAL)是异种移植的转折点随着CRISPR技术的出现,敲除GAL抗原成为可能,可以克服超急性排斥反应和延长肾脏异种移植物的寿命表示用于异种移植的猪基因工程的进化技术应用时间表 在世界范围内,目前至少可以编辑猪体内40种不同的基因,其中一些猪可以编辑其中的六种表示目前可用于猪异种移植研究的部分转基因 03首例临床级猪肾异种移植图示异种肾移植时间表和事件摘要 ① 移植前阶段受体    ✔ 一名57岁的白人男性(血型AB),脑死亡继发于钝性头部外伤    ✔ 在异种移植之前进行了双侧原生肾切除术,以便解释血清肌酐和其他肾功能参数供体    ✔ 选定的10-GE猪(编辑十个基因)????13个月大、350磅、雄性猪        ▪ 插入        ① 两个人类补体抑制基因        ② 两个人类抗凝基因        ③ 两个免疫调节基因        ▪ 删除        ① 两个猪碳水化合物抗原        ② 两个生长激素受体基因        ▪ 不表达红细胞抗原,是任何血型的通用供体     ✔ 肾功能正常(BUN 19,肌酐1.3,在供肾前60天内评估)    ✔ 猪内源性逆转录病毒C和其他病毒呈阴性    ✔ 猪肾活组织检查:显示正常的肾脏组织学,类似于正常的人类肾脏组织学???? 预期交叉配型:通过使用阳性和阴性对照的新型交叉匹配技术???? ② 移植阶段 为了模拟“现实世界”的条件,在异种移植前使用甲基强的松龙和抗胸腺细胞球蛋白进行免疫抑制诱导 左右肾异种移植   ✔ 右侧和左侧异种移植物的热缺血时间分别为28和29分钟;右侧和左侧异种移植物的冷缺血时间分别为4小时和5小时37 分钟    ✔ 肾脏被移植到双侧髂窝,腹膜后位置    ✔ 右输尿管与死者膀胱吻合,左输尿管穿过皮肤作为末端尿路造口术异种移植灌注评估    ✔ 异种移植物由四位不同的肾移植外科医生独立评估,双肾迅速再灌注,颜色和充盈良好 图示猪肾异种移植在人类脑死亡者中的再灌注。(A) 右肾的再灌注 (i) 血管吻合完成后,移除血管夹前,(ii) 移除血管夹后右肾,(iii) 移除夹子后5-10秒的右肾,(iv) 移除夹子后1分钟的右肾。(B) 左肾的再灌注    ✔ 右肾在再灌注后23分钟内产生尿液。左肾的尿量则产生缓慢和稀少植入后异种移植肾活检    ✔ 左猪异种移植物在植入后进行活检,显示轻度至中度急性肾小管损伤,肾小球正常。没有内皮损伤、纤维蛋白血栓或IgG、IgM 或C4d染色的证据,即无排斥证据     ✔ 由于肾实质易碎,右侧猪异种移植物的植入后活检未进行③ 移植后阶段 诱导和维持免疫抑制    ✔ 研究人员尽最大努力遵循肾移植的常规人类方案。诱导免疫抑制包括每日甲基强的松龙逐渐减量,抗胸腺细胞球蛋白总量为6mg/kg,利妥昔单抗剂量为1800 mg    ✔ 维持性免疫抑制包括霉酚酸酯(1000 mg,每天两次)、他克莫司(1mg,每天两次)和泼尼松表为免疫抑制方案总结 异种移植肾功能评估    ✔ 分别监测每个异种移植物的尿液输出    ✔ 右肾在最初的24小时内产生700ml的尿液????,但左侧异种移植物的尿液产生量仍然很少 图示右肾再灌注后的尿量。黑色箭头指向右肾。(i)和(ii)展示输尿管吻合术前的尿量。右输尿管被握在外科医生手中,旁边是收集杯。(i)和(ii)杯子中的尿量增加。(iii)右肾在与脑死亡者膀胱吻合后的尿量    ✔ 尽管至少有一个异种移植物正在产生尿液,但血清肌酐并没有显示出任何下降,肾脏也不能在产生的尿液中排出肌酐????。研究人员无法解释这背后的原因  连续异种移植肾活检    ✔ 术后第1天的组织学发现提示血栓性微血管病,但没有其他排斥证据    ✔ 术后第3天示进行性肾小管损伤伴广泛的急性肾小管坏死,但未观察到包括系膜溶解在内的TMA的其他特征    ✔  C4d以及IgM、IgG、IgA、C1q和C3均为阴性    ✔ 研究终止时的楔形活检显示没有皮质坏死或间质出血的证据 图示猪肾异种移植物的系列组织学检查。C4d全程阴性。(A和B)冷缺血引起的轻度至中度急性肾小管损伤。毛细血管、系膜和足细胞正常。(C和D)肾小球内见多个纤维蛋白血栓(蓝色圆圈)。肾小球毛细血管弥漫性充血,内皮细胞肿胀,外周毛细血管腔几乎完全消失。存在与血栓性微血管病(TMA)一致的纤维蛋白血栓和碎裂的红细胞。进行性肾小管损伤伴有广泛的急性肾小管坏死(ATN)。(E和F)肾小球充血和急性肾小管坏死。内皮细胞保持节段性肿胀,管腔部分闭塞和纤维蛋白血栓罕见,肾小球损伤得到改善。(G和H)急性肾小管损伤持续存在。肾小球伴有节段性内皮肿胀。无纤维蛋白血栓 猪衍生物是否可以在人血中检测到    ✔ 实验病例血样的每日分析对猪内源性逆转录病毒和嵌合体均呈阴性???? 由于出现脑死亡的生理学变化,第3天进行手术探查后两小时,死者因严重的凝血功能障碍出现失血过多。因此,该研究在再灌注77小时32 分钟后终止 图示该病例的实验总结与所有研究一样,即使是这项看似具有里程碑意义的研究也有其不足之处    ✔ 脑死亡接受者的移植环境恶劣。虽然确实为评估肾功能提供了合适的模型,但不利于移植物的存活    ✔ 右肾排尿良好,而左肾则不然。其原因尚不完全清楚。可能与热缺血时间相关    ✔ 尿液产生后,肌酐没有从尿液中排出,血液肌酐值也未下降。同样其原因尚不清楚    ✔ UAB的异种移植实验在三天后结束,然而移植后排斥反应会在数天甚至数月发生。因此,此UAB模型可能不适合观察后期的排斥反应。换句话说,虽然没有发生超急性排斥,但很可能在后期出现排斥  该病例对于回答有关异种移植的安全性和可行性的某些基本问题,且结果在某种程度上令人满意该病例将有助于突破该领域的一些障碍,为未来的研究铺平道路相信随着新型基因工程猪的出现,临床猪器官和细胞移植在几年前是不可思议的,而在明天可能成为常规Ref1 Am J Transplant. 2022 Jan 20. doi: 10.1111/ajt.16932 Xenotransplantation. 2016 Mar;23(2):83-1053 J Pathol. 2016 Jan;238(2):288-994 http://www.nephjc.com/news/xenotransplantby 肾世风云 · 钟钟
    04-14

    2022

  • 全球首次!机器人独立完成猪体内腹腔镜手术

    在没有人类指导的情况下,机器人成功对猪的软组织进行了腹腔镜手术,比人类医生更快准狠。综合新智元、量子位近日,美国约翰斯·霍普金斯大学的研究人员设计了一个智能组织自主机器人STAR。在没有人类指导的情况下,机器人成功对猪的软组织进行了腹腔镜手术,比人类医生更快准狠。近日,美国约翰斯·霍普金斯大学的研究人员设计了一个智能组织自主机器人STAR。在没有人类指导的情况下,机器人STAR成功对猪的软组织进行了腹腔镜手术,又称锁眼手术(keyhole surgery)。目前,该研究已在Science子刊发表。论文地址:https://www.science.org/doi/10.1126/scirobotics.abj2908这个机器人在猪的身上执行手术,意味着离人体实验就不远了。研究人员称,这是向人体试验迈出的重要一步。83%缝合,STAR全搞定其实,少数手术早已实现了自动化,然而这些机器人往往在执行硬组织相关的手术熟练有度,比如骨科手术。那如果让它们自主去执行软组织等手术,那就有可能拿捏不住了。即使对于人类医生来说,腹腔镜手术也是一个挑战,比如,在胃部不做大切口的情况下重新连接肠道。为此,约翰·霍普金斯大学的Justin Opferman和他的同事们设计的智能组织机器人在有限的人工干预下,切除一段肠子后将其成功连接。手术中,这个机器人给4头猪做了手术,总共缝了86针。其中,手术三分之二的时间,机器人会自动缝合,而其余的三分之一,在尝试缝合之前,机器人需要医生去引导到位。据介绍,83%的缝合任务,都是使用该工作流程自主完成,不过该系统也需要手动进行调整以纠正漏针的位置。结果显示,STAR机器人做的手术明显优于人类做的手术。其实,早在2016年,同一组科学家就给这个机器人写了个程序,让机器人给猪做手术。他们让机器人执行了将猪的肠子拉出体外,然后再缝合的操作。而这次,机器人通过一个小开口,成功在狭窄的腹部完成了任务。这次的手术更具挑战性,因为器官会随着动物的呼吸有节奏地动。Opferman 表示,「一旦你打开病人的身体,他体内所有的器官都会在动,所以你不太可能提前做好类似于往哪里下刀的计划。」「如果你要手术的对象是像肠子这样的软组织,你一碰它,它也会跟着跑。因此,需要实时更新机器人的计划,弄清楚它需要做什么,以及如何完成任务。」如果机器人能够擅长肠道吻合术,这将是一种需要高水平重复运动和精确度的手术。要知道,连接肠道的两端可说是胃肠手术中最具挑战性的步骤,需要外科医生以高精度和一致性进行缝合。即使是最轻微的手部颤抖或缝线错位,也可能导致泄漏,而这可能会给患者带来灾难性的并发症。论文最终结果显示,STAR在四只动物身上进行了同样的手术,整个手术时间大概在4小时,结果均显著好于人类。尤其在位置校正、缝合间距、缝合线咬合大小、完成时间、管腔通畅和泄漏压力等维度,均好于目前已开发的自主系统、专家手术等。在完成时间上可以看到,最短在1小时之内就已经完成。主要作者之一,约翰霍普金斯大学教授 Axel Krieger表示,STAR产生的结果明显优于人类,这意味着机器人可自主完成肠道两端的重新连接。这是手术中最复杂、最精细的任务之一。STAR机器人如何设计?STAR机器人系统的组成部分,包括医用机械臂、外科手术工具、双通道NIR和3D结构光内窥镜成像系统。其中,标准机械臂是由制造商Kuka所提供。研究人员表示,STAR其实是一种专门用于缝合软组织的视觉引导系统。团队为STAR配备了增强自主性和提高手术精度的新功能,包括专门的缝合工具和最先进的成像系统,以提供更准确的手术区域可视化。定制的软件在缝合的过程中控制机器人,使用机器人手臂上的3D摄像头拍摄图像,以此来感知机器人在体内的深度,并绘制病人腹部内部变化的情况。STAR增强自主控制策略的体系结构这套自主性流程能够让机器人启动/暂停/解除组织跟踪系统,检测组织的呼吸运动及其变形。通知医生重新规划步骤,控制摄像机运动,以均匀和非均匀间距进行不同模式的缝合规划,预先过滤降低噪声,预测工具与组织的距离,以及使机器人工具与组织的呼吸运动和远程运动中心(RCM)下的同步。这个机器人最大的特点,就是以最少的人工干预来规划、调整和执行软组织手术。为实现这一点,研究人员开发了基于结构光的3D内窥镜和基于机器学习的跟踪算法来指导STAR,用来规划缝合。目标跟踪算法使用了卷积神经网络CNN,基于U-Net架构,输入包括近红外摄像头标记的过去 2 秒内的位置历史以及从现在到2秒前的运动方向。整个网络涵盖4个卷积层、3个密集层和2个输出。卷积层和前三个密集层的激活函数是 Rectified Linear Unit (ReLU),最后一个密集层的激活函数是SoftMax。该网络在训练阶段预测运动曲线,准确度达93.56%。除此之外还有许多自主功能,包括启动/暂停/解除组织跟踪系,检测软组织的呼吸运动及其变形,控制摄像机运动,缝合规划、预测工具与软组织碰撞等。如果 STAR 检测到与当前手术计划相比组织位置的变化大于3mm,则通知操作员启动新的缝合计划和批准步骤。接着,操作员就只需看着机器人操作了。在这项缝合任务中,超过83%的工作流程都是机器人自主完成的。有时候仍需要操作员手动微调机器人,以便出现漏缝时纠正定位。(相机放置在距离目标组织 5 到 8 厘米处)以往的工作中,组织追踪仅考虑静止组织,没有考虑到呼吸运动,包括噪声预滤波和碰撞预防,也无法自主形成重新规划建议。操作员需要监测缝合过程的每个子步骤,因此只有57.8%的缝合工作是机器人自主完成的。未来5年,机器人上手其实,机器人辅助手术在世界各地已经非常常见。据估计,2017年机器人辅助手术的数量超过64.4万例,但它们都是辅助手术。正如刚刚提到,软组织手术对机器人来说尤其困难,因为它的不可预测性迫使机器人要快速适应以应对意外的障碍。约翰斯·霍普金斯大学的研究人员为STAR设计了一个新颖的控制系统,可像人类外科医生一样实时调整手术计划。STAR的特别之处在于,它是第一个以最少的人工干预来规划、调整和执行软组织手术计划的机器人系统。Opferman说,这项试验是人类实现完全自主手术的第一步,尽管距离实现这一终极目标可能还需要几十年的时间。随着研究成果的不断进展,研究小组将训练机器人慢慢地操作越来越多的手术部分,比如打开空腔,然后关闭,直到证明机器人自己能够独立完成整个操作过程。他说,「由机器人执行部分手术的人体试验可能在5年内开始。」参考资料:https://www.newscientist.com/article/2305980-robot-performs-keyhole-surgery-on-pigs-with-little-help-from-doctors/https://www.techradar.com/news/a-robot-just-performed-autonomous-surgery-on-a-pig-and-were-shookhttps://tech.huanqiu.com/article/46ZJ3sKOUOe
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  • 攻克世界难题!中国科学家减少克隆猪成本和时间,有利于将猪器官移植人体

    中国农业大学、四川农业大学、中科院北京基因组所、东北农业大学等多家单位合作,历时数年,一举攻克世界难题,成功建立了猪胚胎多能干细胞系。‍来源:前瞻经济学人APP近日,中国农业大学、四川农业大学、中科院北京基因组所、东北农业大学等多家单位合作,历时数年,一举攻克世界难题,成功建立了猪胚胎多能干细胞系。 在生物医学领域,研究人员常利用小白鼠等模式动物进行科学研究,但其实,猪也是一种非常好的医学模式动物。猪和人的基因组有较高的相似性,猪的胚胎发育和人类更加相似,同时相较于小白鼠,猪的体型大,可用作动物器官移植。近年来,国内外已有较多相关医学报道,例如移植猪肾脏、用猪皮给烫伤的人植皮,用猪的角膜来恢复患者的视力。 此次多家单位联合开展科技攻关,首次成功建立了目前世界家畜干细胞传代次数最多(传代260次以上)、可进行多次基因编辑操作的猪胚胎干细胞系。实验证实,猪胚胎干细胞对基因编辑有很好的耐受性,可以耐受多次连续的基因编辑。干细胞的出现,可以缩短基因编辑技术来制备克隆猪的时间和成本。 科学家介绍:应用前景非常广阔,可以将稳定的猪干细胞系和准确的多基因编辑技术相结合,将对优良性状新猪种的培育、把猪作为人类器官移植供体的研究产生重大且深远的影响。 该研究论文题为"Generation and characterization of stable pig pregastrulation epiblast stem cell lines",已发表在《细胞研究》期刊上。 论文资料:https://www.nature.com/articles/s41422-021-00592-9 
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