近日，中国农业科学院北京畜牧兽医研究所家畜营养与调控科技创新团队研究揭示了革兰氏阴性菌致病成分精准攻击宿主线粒体，引发系统性氧化损伤与炎症的共性机制。相关研究成果发表在《氧化还原生物学（Redox Biology）》上。　　在现代家禽养殖中，鸡舍内高浓度粉尘颗粒物（PM）不仅是呼吸道刺激物，更是微生物气溶胶的载体。其中，革兰氏阴性菌释放的外膜蛋白（OMPs）和脂多糖（LPS）是两大关键毒力因子，但长期以来，它们如何协同破坏宿主细胞稳态、诱发氧化应激和炎症，缺乏统一的理论框架。　　本综述创新性地提出“线粒体-活性氧（ROS）轴”作为解释机制的核心模型。研究表明，OMPs可通过破坏宿主细胞铁稳态、靶向线粒体膜通透性，诱导线粒体功能障碍和细胞凋亡，而LPS则主要通过TLR4/MyD88和TRAF6-ECSIT 信号通路，触发线粒体产生大量ROS，进而激活NLRP3炎症小体，导致细胞焦亡和系统性炎症。二者虽起始路径不同，但最终汇聚于线粒体，引发ROS爆发，突破宿主的抗氧化防御系统。这一机制模型不仅为解释养殖环境中多种病原成分共同作用的病理过程提供了整合视角，也为开发针对性干预措施—如通过营养调控增强宿主抗氧化能力、改善饲养环境减少病原菌暴露—奠定了理论基础。代丽

1、近三个月平台确诊疾病发生比例说明：根据平台数据统计，传染性支气管炎、滑液囊支原体、大肠杆菌病、禽流感H9、鸡毒支原体属于长期占据排行榜前几名的疾病，其发病比例占到所有疾病的64%左右。这5种疾病的常在性和病原的易变异、易感染的特点导致其在鸡群中多发混感，是行业重点关注、重点防控的疾病，需要饲养管理和疾病防控手段同时采取措施才能有效防控的疾病。2、本月三类疾病发生比例说明：本月三类疾病的发生比例变化比较明显，其中免疫控制性疾病的发生比例由41.1%上升至49%，垂直传播性疾病的发生比例由29%下降至22.4%，环境条件性疾病的发生比例没有明显的变化。进入冬季，外界气温较低，病毒以及细菌的存活能力提升，导致免疫控制性疾病的发生比例明显升高。3、本月确诊禽病发生比例说明：（1）本月确诊疾病发生比例较高的疾病依次为传染性支气管炎、禽流感H 9、滑液囊支原体、大肠杆菌病、鸭疫里默氏杆菌杆菌、鸡毒支原体，占确诊疾病的总体比例在72.8%。支原体、传染性支气管炎、大肠杆菌病的发生比例相对较高。（2）三类疾病防控重点：垂直传播性疾病重点为支原体病；免疫控制性疾病的防控重点为传染性支气管炎；环境条件性疾病防控的重点是大肠杆菌病。二、2026年1月份禽病防控重点1、当前流行疾病的防控①传染性支气管炎疾病依然是疾病发生比例的榜首。因其病原易变异，同一基因型下不同血清的保护效果并不理想，并且能够快速的通过呼吸道传播，传播能力强，必须要经过免疫和环境控制综合防控手段才能有效防控。首先要做好免疫，科学的设计好免疫程序，选择两种毒株交叉保护谱比较广的疫苗进行免疫，使用麻株和流行毒株免疫提升保护谱，强毒株的疫苗不建议早期免疫；其次传支的免疫越早越好，1日龄的占位免疫尤为重要；在饲养管理方面尤其要注意早期鸡舍的温度的适宜均匀稳定，避免鸡群受到冷应激，降低鸡群感染传支的机率。②支原体病是常在的疾病。由于支原体感染之后在体内长期存在，并且在鸡群体质差，应激较大时重复发病，给鸡群造成生产性能方面的影响。支原体的防控需要从饲养、免疫和药物同时入手才能有效控制。首先选择垂传疾病控制好的种鸡厂家选择雏鸡，避免引种带入的病原；其次要提升饲养管理水平，避免各种应激的叠加；第三在易感地区或者场区建议使用活+死的免疫方式，降低鸡群的感染机率以及对环境的污染，逐步的净化场区内的支原体病原；第四，程序性的监测病原及时的进行投药控制，在鸡群的易感日龄、应激叠加的阶段进行支原体的敏感性药物进行治疗。③大肠杆菌病属于环境条件性疾病。首先要明确是原发性的还是继发性的疾病。原发性的大肠杆菌要环境控制方面入手，从鸡舍的空气质量、饲料、饮水方面控制微生物含量。针对继发性的大肠杆菌病需要找到病因，只有消除原发病因，才能有效控制大肠杆菌的发生。在治疗时选择敏感药物，科学使用才能有效的降低疾病的损失。④传染性鼻炎属于免疫控制类疾病，但单独的依靠免疫不能达到100%的防控效果。传染性鼻炎的控制首先需要进行程序性的疫苗免疫，提升鸡群体液抗体的水平，免疫地区流行株或者自家株疫苗的效果最佳；其次在换季以及冷应激易发的时间段提升管理水平，避免鸡群发生冷应激，同时可以进行鼻炎水苗的注射，提升抗体水平，保证鸡群对鼻炎细菌的抵抗力。2、2月份预计流行疾病防控（1）进入冬春季，外界气温差别变大，鸡群发生冷应激的机率增加，流行疾病中的传支、支原体、大肠杆菌病等在一定时间内仍会维持在较高的发病比例。（2）进入换季的阶段，低温多风天气较多，病毒性疾病的流行更加便利，要重视生物安全的防控，对5种传播途径的切断方法及时的进行调整，保证无疾病传入。（3）关注冬季鸡群体质的保持，确保免疫控制性疾病的抗体水平，及时的进行补免，确保鸡群健康。（4）关注新毒株的禽流感疫苗的使用，及时的进行免疫，同时尽快完成2次免疫，提升特异性抗体的水平。（5）冬春季禽流感疾病高发，欧州、美洲、亚洲邻国禽流感发病严重，严格控制野鸟，避免其对禽流感疾病的传播。三、重大禽病疫病信息禽流感发病情况国际：据OIE的最新报告，2025年第50周至2026年第1周全球共计报告1495例新发的家禽、野禽和哺乳动物高致病性禽流感，为H5和H7亚型。国内：

近日，四川省畜牧科学研究院（以下简称“省畜科院”）家禽育种团队成功研发并获得国家发明专利授权的“一种鸡原始生殖细胞转染方法”，不仅攻克了鸡基因编辑的技术瓶颈，更以此为基石，构建了一套完整的地方鸡种质资源“活体+离体”双保险保存与高效利用技术体系。这一系列突破性成果标志着四川省在畜禽种业关键核心技术的自主创新上迈出坚实一步，为守护本土农业“芯片”、振兴民族种业提供了强有力的科技支撑。一、核心突破省畜科院团队自主研发的鸡原始生殖细胞（Primordial Germ Cells, PGCs）高效转染与编辑技术，实现了对PGCs的高效、精准基因编辑，为定向改良鸡的生产性状、抗病性能等开辟了新路径。更具革命性的是，团队利用该基因编辑技术，成功创制出不育系宿主纯合子群体。该群体其自身生殖系统被静默，但可作为代孕母鸡。当其他优良鸡种（供体）的PGCs移植到这些宿主体内后，宿主机体能支持外源PGCs发育成熟，并产下继承供体鸡100%遗传信息的后代，实现特定鸡种的精准复刻。这项技术犹如为珍稀鸡种购买了终身生物保险，即便原种群因故消失，也能取出其保存的PGCs，借助不育系宿主实现种群再生。二、体系构建四川省拥有藏鸡、旧院黑鸡、金阳丝毛鸡、米易鸡等15个国家级畜禽遗传资源，这些品种具有独特的风味、优异的适应性和重要的文化价值。然而，传统活体保种方式面临着种群规模有限、近交退化、疫病风险及意外事件导致资源永久丢失等诸多挑战。针对这一产业痛点，省畜科院团队将基因编辑技术与种质资源保护深度融合，系统构建了三大技术支柱。一是PGCs分离与培养复苏技术。成功优化了从特定日龄鸡胚血管中分离PGCs的技术流程，攻克了细胞体外长期培养与高效复苏的难题，实现了PGCs在液氮中长期稳定保存。二是地方鸡种PGC基因库建设。目前团队已成功分离并长期保存了包括米易鸡在内的5个四川特色地方鸡种的PGCs，初步建成离体保存库。三是“活体+离体”保种体系。将上述离体保存的PGC基因库与创制的不育系宿主群体相结合，形成“活体保种（维持现有种群）+离体保种（PGCs冷冻保存）+生物复刻（利用宿主再生）”三位一体的保种新范式。三、应用前景一是推动精准育种。此次建立的基因编辑体系能够深入挖掘地方鸡种携带的独特优势基因，并有望将优势基因精准导入高产商业鸡种，培育出兼具高产与优质特色的新品种，提升育种效率与精准性，为种业自主创新提供关键技术支撑。二是保障生物安全。该技术突破实现对PGCs的高效离体培养与长期冷冻保存，为地方鸡品种建立“基因身份证”和“生命种子库”。离体保存的PGCs成为确保品种遗传资源不灭绝的生物备份，是应对生物安全风险、保障国家战略性生物资源安全的坚实防线。三是促进产业开发。一方面可为开发风味纯正的特色高端禽肉、蛋产品提供稳定种源，助力“川味”食材品牌化，提升全产业链价值。另一方面可根据市场需求，利用保存的PGCs精准复刻，实现特定风味鸡种的规模化、标准化生产，加速科技成果转化。四是完善保护体系。此次工作推动保种从传统的“被动保种”向“主动保种、智能用种”转变，为构建现代化、智能化的遗传资源保护体系提供有效助力。该保种体系将加快推进覆盖更广、信息更全的四川省家禽遗传资源活体与细胞生物样本库建设，并整合基因编辑、细胞工程、信息管理等技术，推动形成资源鉴定、高效保存、创新利用的完整技术链条。

1 亚硝酸盐中毒1.1 诊断要点鹅对青绿饲料采食量较大，而鹅常食用的菠菜、油菜、白菜、马铃薯茎叶、萝卜茎叶、胡萝卜茎叶和野草、牧草等这些青绿饲料、饲草富含硝酸盐，特别是施用过尿素、硝酸铵、硫酸铵等化肥的菜叶类蔬菜硝酸盐含量更高，硝酸盐虽然不具有毒性，但在一定的适宜条件下，尤其在潮湿闷热的环境很容易因保存不当腐败发酵，极易使其中的硝酸盐变成亚硝酸盐，鹅群食用这些后很容易出现亚硝酸盐中毒；此外，饮用被亚硝酸盐污染的水同样可导致鹅亚硝酸盐中毒。该病一年四季均可发生，但以夏、秋季青绿饲料旺盛期和秋季蔬菜收割期居多。鹅亚硝酸盐中毒发病较快，主要症状为步态不稳、精神不安、跛行、跑动，一般会因窒息而死。病程稍长时，病鹅存在食欲减退、经常口渴、呼吸困难、流出淡黄色涎水、排出淡绿色粪便、黏膜发绀等症状，同时多数病鹅存在腿肌无力、双翅下垂、体温下降、麻痹痉挛症状，最终会因衰竭死亡。亚硝酸盐中毒的诊断，需要调查鹅群是否食用堆放变质的青绿饲料、饲草，然后结合流涎、呼吸困难等具体临床症状作出初步诊断，确诊可对饲料、胃内容物开展亚硝酸盐毒物检验，常用的方法有两种，一是联苯胺冰醋酸法:取胃肠内容物或残余饲料的液汁1滴，滴在滤纸上，加l0%联苯胺溶液1～2滴，再加10%的乙酸1～2滴，滤纸变为棕色，则为亚硝酸盐阳性反应，反之则为阴性反应；二是高锰酸钾法:将胃肠内容物或残余饲料的液汁1滴于玻璃试管中，加10%高锰酸钾溶液1～2滴，搅匀后再加入10%硫酸溶液1～2滴，充分摇动，如有亚硝酸盐，则高锰酸钾变为无色，否则不褪色。1.2 防治方法1.2.1 预防为有效防治鹅群亚硝酸盐中毒，养鹅户在鹅的饲养过程中应使用新鲜的青绿饲料及菜类，而且菜类不宜长时间堆放，存放时要注意通风，经常翻动，不得饲喂发霉、变质、腐败和长时间堆放的青绿饲料。饲喂时要控制适宜的喂量。同时要根据所处的地区水质情况，每年定时检测饮水中亚硝酸盐含量，一旦发现含量过高，需净水处理后再给鹅饮用。1.2.2 治疗中毒性疾病的治疗除常规治疗（即下泻、催吐、洗胃等排出毒物的措施）及对症治疗外，最主要的是根据准确的诊断结果，正确用药、及时抢救是治疗的根本，采用特效解毒药物可迅速取得明显的治疗效果。亚硝酸盐中毒的特效解毒药为美蓝或甲苯胺蓝。亚硝酸盐中毒多在饱食后10～15 min后发病，因此又称为“饱潲病”，如果确诊为亚硝酸盐中毒，可保定病鹅后注射美蓝或甲苯胺蓝溶液。美蓝：病鹅腹腔注射0.4 mg/(kg体重)，同时口服适量维生素C和葡萄糖，每日2次，连续使用5 d；或者1%美蓝，1 m L/(kg体重)加入10%的葡萄糖注射液中缓慢静脉注射，并观察病鹅中毒症状，待呼吸困难症状缓解，间隔3～5 h再重复注射1次美蓝溶液0.5～0.8 m L/(kg体重)，再辅以对症治疗，几日之内即可痊愈。甲苯胺蓝：3～5 mg/(kg体重)，加入10%的葡萄糖注射液中配成3%～5%的溶液静脉注射、肌肉注射或腹腔注射。在没有条件购买美蓝或者甲苯胺蓝的农村，可以因陋就简，选用普通钢笔用蓝墨水加于干净的玻璃葡萄糖瓶内，加盖橡皮塞并在塞之上插入2～3只兽用注射针头，然后直立放于普通铝锅内，锅内加水至葡萄糖瓶颈部，加锅盖大火煮沸15 min，小火继续煮沸10 min，晾凉后以0.2 m L/(kg体重)用量加入10%葡萄糖内缓慢静脉注射，同样可以得到与美蓝相同的治疗效果。2 水中毒2.1 诊断要点在养鹅实践中，水中毒在各种年龄的鹅都有发生，但以雏鹅最为多见而且损失严重。雏鹅常常因为饮水不足造成机体不同程度的脱水，一旦遇水而暴饮，使体内水分突然增加，导致组织细胞内大量积水（水肿）从而出现水中毒。水中毒一般会导致雏鹅出现运动失调、四肢无力、精神萎靡，严重时雏鹅会因水中毒昏迷致死。失水后的雏鹅一般会在暴饮0.5 h后出现水中毒症状，如口流粘液、步态踉跄、张口扬头频频回顾食道膨大部、保持犬坐姿势、排出水样粪便，可根据这些症状进行诊断。2.2 防治方法预防雏鹅水中毒，就要防止雏鹅脱水，导致雏鹅脱水原因很多，主要包括：育雏舍温度低，雏鹅怕冷扎堆取暖，饮水量减少；饮水器少，或分布不均，或饮水位置放置不合理，导致雏鹅饮水不足；从外地引入雏鹅，长途运输途中未能及时补给水分，加上到达场地后受惊，不熟悉饮水器位置等，导致雏鹅体内严重缺水。因此，根据脱水原因及时调整措施：要控制好育雏舍温度，提供舒适环境，一旦发现雏鹅扎堆，轻轻驱散，使雏鹅有更多机会接触饮水器；饮水器要摆放均匀、数量充足，位置要固定；长途运输雏鹅时，运前让其饮足水，或喂湿饲料。若运输时间较长，可在途中选择一个避风的合适地点补给饮水，水中添加5%葡萄糖（或白糖水）和0.1%维生素C。一旦雏鹅发生脱水，不要马上给过多饮水，应分多次有节制少量给水，然后再让其自由饮水，防止其突然暴饮而造成水中毒。可在饮水中加入口服补液盐，口服补液盐配方是：葡萄糖20 g、氯化钠3.5 g、氯化钾1.5 g、碳酸氢钠2.5 g，将上述药品溶解在1000 m L凉开水中，装在清洁的容器里，然后倒入饮水器中，让雏鹅自由饮用，每次少给，要勤给。若发生水中毒，要马上停止饮淡水，然后降低舍内的温度，加强通风，把雏鹅移到阴凉地方并把雏鹅散开，在饮水中添加电解多维227 g+150L水+0.1%维生素C及少量的食盐，让雏鹅饮用，或供给0.85%盐水、糖盐水。3 食盐中毒3.1 诊断要点食盐是畜禽饲料中所必需的一种物质，适量摄入食盐对促进机体消化、提高食欲、维持酸碱平衡、控制体液渗透压方面发挥着重要作用。但在鹅饲养中，若饲喂食盐不合理或者用量过多，导致鹅摄入的食盐超过机体所承受的量，很容易出现食盐中毒，需要引起大家重视。一般情况下，鹅日粮需要添加0.25%～0.5%食盐，如果给鹅群提供含盐量过高的日粮（超出0.5%），就会发生食盐中毒；拌料不均匀、使用含盐量过高的鱼粉、口服补液盐超剂量使用同样能引发这种中毒病。食盐中毒的主要症状包括口渴、食欲减退、过量饮水、生长发育放缓，中毒较为严重时存在极度口渴、食欲废绝、精神沉郁、口鼻粘液大量流出、排水样粪便、呼吸困难等症状，最终病鹅会因衰减而死。在对食盐中毒的诊断中，需结合鹅群症状并关注饲养过程中是否存在限制饮水、过量使用食盐等行为，同时对饲料配方进行分析，必要时需开展剖检诊断。3.2 防治方法在生产中调配饲料时，需严格控制饲料中食盐用量，其含量不得超过0.5%，一般以0.3%为宜；同时，保证试食盐和饲料混合均匀。如需在饲料中加入鱼粉，需先检测鱼粉的食盐含量，然后再调整食盐添加量，避免使用劣质掺盐鱼粉。市售的鹅混合料如已添加食盐，不必另行加食盐。自配的鹅饲料，如用咸鱼粉或含盐量高的副食品，也不必加盐。如发现鹅群出现食盐中毒症状，应及时停用原含盐饲料，供给新鲜饮水，喂给5%葡萄糖水，连饮3～4 d。对中毒症状较为严重的病鹅，养殖人员需采用间断方式给水并严格控制饮水量，按照每小时10～20 m L控制，避免加剧中毒症状，同时在饮水中可加入醋酸钾（0.5%）、葡萄糖（3%）、维生素C，连续使用4 d。对重症病鹅，用10%葡萄糖水腹腔注射，成年鹅20～30 m L/羽；喂给或灌服冲稀的淀粉或牛奶、豆浆、鸡蛋；每千克体重皮下注射氯化钾溶液4 m L。4 小结综上所述，为尽可能降低鹅群中毒病带来的威胁，必须明确各类病毒病的发病原因及具体症状，进而开展针对性防治，治疗越早，效果越好，而且科学饲喂是预防中毒病非常关键的一环。

肉鸡鸭疫杆菌病（RA），是由鸡源鸭疫里默氏杆菌引起的细菌性疾病。该病原感染鸭子又称为鸭传染性浆膜炎、新鸭病、鸭败血症、鸭疫综合症、鸭疫巴氏杆菌病等。迄今为止，已经报告了25种血清型的鸭疫里默氏杆菌。该病是一种既能在鸭、鹅等水禽，又能在鸡和野鸟中传播的高发传染性疾病。目前这个病在山东、辽宁等白羽肉鸡养殖密集地区出现了鸡源鸭疫里默氏杆菌病，表现为瘫痪、三炎症状，并伴有死亡率升高，给众多白羽肉鸡养殖企业带来了重大损失。鸡源鸭疫杆菌是一种革兰氏阴性菌，原本主要感染水禽，尤其是鸭和鹅，引起严重的经济损失。如今该菌的宿主范围不断扩大。此病不仅在鸭群中广泛流行，也在肉鸡养殖场中被检出，并且这方面的研究与报道逐渐增多，显示出RA对鸡养殖业的潜在威胁。那么在已发病鸡场，目前使用比较有效的治疗方案/处方有那些呢？说到处方，就必须筛选出目标药物，也就是“看那些药物用于治疗鸡源鸭疫杆菌”是最有效的。从最有效的药物筛选来看，氟苯尼考、强力霉素、复方磺胺药、强效退烧药，是目前食品动物养殖允许使用，且又是鸡源鸭疫杆菌最有效的药物。那么，在此基础上进行组方和配比，就可以组成高水溶氟苯尼考10g配比强力霉素16g，复方磺胺间甲氧嘧啶钠20g，这些组成高敏抗菌方向的对因治疗药。由于该病感染发病后，来得急和给组织脏器造成的损害大，所以还要再结合强心、活血化瘀和解热镇痛、提升免疫力的药物辅助。那么这样以来，根据上述对因治疗药物的药性和药理作用，可以在上述处方基础上，再配比氟尼辛葡甲胺/安乃近、聚肌胞、樟脑磺酸钠等药物辅助“对症治疗”。最后，在上述方剂中多种药物从不同治疗方向上的综合作用、全面治疗作用下，每天晚上再给予保肝、通肾、护肾和调节机体内环境失衡的微量离子“调节”下，就会使急性发作的鸭疫杆菌爆发势头得到压制。如果此时在饲料营养进行必要的补充，那么患病鸡子的生理生化反应也会加强。这种整体治疗的处方思维，对鸡源鸭疫杆菌病就能起到很好的治疗效果。

安乃近又称诺静、罗瓦尔精、氨基比林、氨基比林甲胺甲烷、安痛定、诺瓦经等，分子式为CHN₃NaO₄S，分子量为333.34，是一种吡唑酮类解热镇痛药，一个比较老的解热镇痛药。安乃近在国内上市后，作为一个解热镇痛消炎药，一度与阿司匹林、对乙酰氨基酚齐名，能使发热患者的体温恢复正常，但对正常人体温无影响，能抑制炎症的同时减轻疼痛，且较其他解热镇痛药吸收快、起效快、解热镇痛作用强、价钱便宜，曾被广泛用于退热。安乃近退烧的主要机制是: 服用后，安乃近会给机体发出信号，使身体出汗，汗液在皮肤表面蒸发时会带走多余的热量，然后动物体温就能下降。安乃近还可以减轻导致疼痛的相关物质，比如说减少前列腺素的合成，从而减轻动物的疼痛反应，改善禽群精神状态，利于采食量恢复。安乃近口服吸收完全，于2h内血药浓度达峰值，半衰期约1-4h，一般经过5-6个半衰期药物代谢完全，也就是说24小时后就完全代谢了。安乃近在退热和镇痛方面比卡巴匹林钙要强不少，尤其在退烧这个功能上要比卡巴匹林钙强几倍，但是抗炎作用不如卡巴匹林钙安乃近可与多种抗生素、维生素及中药制剂协同使用，提升整体疗效。安乃近 + 青霉素类抗生素安乃近 + 氟苯尼考+多西环素安乃近+恩诺沙星/环丙沙星/左氧氟沙星安乃近 + 新霉素/安普霉素/丁胺卡那安乃近+头孢类药安乃近 + 磺胺类药/磺胺增效剂安乃近+硫酸黏菌素安乃近+泰乐菌素/泰万菌素/替米考星安乃近+泰妙菌素安乃近+中药抗病毒制剂安乃近内服对胃肠道有一定刺激作用，影响适口性。一般连续使用不超过3天，高热缓解后及时调整方案。

一、禽流感概述禽流感（Avian influenza, A）是一种病毒性疾病，主要影响野生水禽和家禽，也可在全球的商品禽鸟中暴发。禽流感病毒分为低致病性和高致病性两类，后者能引起严重的临床症状并导致禽鸟大量死亡。禽流感病毒能在野生水禽的排泄物中长时间存在，但通常不会引起明显的临床症状。二、禽流感防控策略（1）疫苗免疫：使用针对禽流感的疫苗进行免疫接种，提高家禽特异性抵抗力。（2）优质的饲养管理：确保家禽的营养充足，提高非特异性抵抗力；避免过度拥挤，保持良好的饲养环境；定期对饲养设施进行清洁和消毒。（3）生物安全措施：饲喂：使用新鲜的全价饲料，避免野生鸟类接触。料塔：定期清洁料塔，防止霉菌等微生物生长。饮水：确保饮用水具有最低的微生物指标，定期清洁和消毒饮水系统。运输：运输车驾驶室保持清洁并定期消毒，装载部分清洁、消毒和干燥;司机进入养殖场前采取手部卫生和更换衣物等措施;司机不应进入圈舍，装卸设备使用后应清洁和消毒。访客：登记所有进入养殖场的人;访客需进行手消毒、淋浴并更换养殖场专用衣物和靴子;进入养殖场前需经过消毒盆。圈舍：在每个空舍期正确进行清洁和消毒，正确使用消毒剂。（4）监测和报告：定期检测抗体水平，及时进行动物免疫;加强对禽类疫情的监测，及时报告禽流感疫情;疑似禽流感感染病例需通过实验室检测确诊。（5）个人防护措施：接触禽类后，用肥皂和流动水彻底洗手;在禽类密集场所工作或接触禽类时，戴口罩、手套等防护用品。（）宣传和培训：对家禽饲养管理者、运输交易者和屠宰加工者等进行禽流感防控知识的宣传和培训。通过实施上述防控策略，可以有效防止禽流感的传播，保障家禽养殖业的健康发展和人类健康安全。

鸭沙门氏菌病又称鸭副伤寒，是由鼠伤寒等几种沙门氏菌感染所引起的急性传染病的总称。主要危害1月龄内的雏鸭，雏鸭常易发生败血症而出现大批死亡，而青年鸭和成年鸭感染后多呈慢性型或隐性经过，成为带菌者。发病鸭以腹泻、瘦弱、肝脏肿大呈古铜色、表面有灰白色或淡黄色坏死灶为特征性病理变化。这一类细菌常引起人的食物中毒，影响食品安全。一、危害1.造成雏鸭大批死亡，影响经济效益；2.卵内或孵化器内感染者多在1周内死亡，影响雏鸭质量；3.卵黄吸收不良，造成瘦弱、残次鸭增多，生长发育不良；4.降低雏鸭抵抗力，其他病毒性、细菌性疾病易感性增强，出现混合感染；5.种鸭感染后很容易发生垂直传播，造成种蛋质量、孵化率等严重下降。二、临床症状和剖检变化1.典型临诊症状最急性感染的雏鸭，常呈急性败血型症状，无肉眼可见的临诊症状而突然死亡；病程稍长的病鸭可见精神萎靡，食欲基本废绝，颤抖，气喘，眼睑水肿，眼和鼻中流出清水样分泌物，病鸭衰弱，步态不稳；倒地做划船动作，死亡前后呈角弓反张。病鸭排白色水样粪便，污染泄殖腔周围羽毛。个别病鸭出现关节肿胀。2.病理剖检变化肉眼可见肝脏明显肿大，色暗红与黄白相间，并散在有灰白色坏死点或出血点，感染严重的可见肝周炎、青铜肝。肠道黏膜出血、坏死，盲肠膨大、内有干酪样栓子；肺脏淤血、出血；肾脏有出血斑；心包炎和心肌炎，心包内有少量积液；脾脏肿大，有针头大的坏死点。气囊浑浊。三、预防措施1.加强鸭群的饲养管理和养殖场地以及养殖环境的干净卫生工作，严格消毒（建议使用惠洁1:1000倍稀释喷雾消毒或使用惠氯威1:400倍稀释喷雾消毒）。2.产蛋箱和地面上的粪便及污物要及时清除，防止污染饲料、饮水和养殖环境。3.雏鸭和成年鸭必须要分开饲养，不同家禽品类禁止在同一场地混养，避免间接或直接接触传播。4.加强种鸭养殖环境、种蛋、孵化器具和孵化场的清洁和消毒工作，如种蛋孵化前必须进行严格消毒，孵化器每次用过后必须彻底消毒等。5.清除鸭群中的带菌者对预防本病是很重要的，目前难度较大。6.雏鸭选择对沙门氏菌作用明显的药物做开口药使用，保障雏鸭健康；惠中兽药经典开口用药方案：惠呼平（恩诺沙星溶液；250ml兑水200千克，连用4天）+加芪素（五加芪粉；100克兑水500千克，连用7天）。7.灭活疫苗注射免疫时建议配合惠诺威（硫酸头孢喹肟注射液；100ml可供1000千克体重使用）同步注射给药使用，控制沙门氏菌的感染所造成的危害。四、控制措施发病鸭群可用广谱抗菌药物如普得康（100克兑水200千克，连用4天）；新肥素（100克兑水300千克，连用4天）；杆特（100克兑水150千克，连用4天）；惠中痢康（100克兑水150千克，连用4天）等进行治疗。备注：由于沙门氏菌耐药菌株的普遍存在，最好根据药物敏感试验结果确定用药或联合配伍用药，能够取得较好疗效。

一、不同规模养殖场的成本差异分析蛋鸡养殖行业中，不同规模养殖场因运营模式、管理体系及资源配置存在差异，其成本构成呈现显著分化特征。深入剖析不同规模养殖场的成本差异，对于精准把握行业运行态势、评估养殖效益及制定科学应对策略具有重要现实意义。（一）小规模家庭养殖场（5000 - 20000 羽）：轻资产运营的成本构成小规模家庭养殖场以家庭劳动力为核心生产要素，该模式下，人工成本多由家庭内部劳动力消化，未单独核算；且养殖设施相对简易，固定资产折旧成本通常未纳入核算范畴。其成本核心构成包括鸡苗采购费、饲料费、疫苗与保健费及水电费等直接经营性支出。2025年蛋鸡养殖市场波动剧烈，受供需关系等多重因素影响，上半年60日龄青年鸡单价攀升至16.5元/只，为养殖户带来了显著的前期资金投入压力。饲料成本在小规模养殖场总成本中占比超60%，是成本管控的核心环节。玉米、豆粕等核心饲料原料价格波动直接传导至饲料成本，例如，受气候条件、国际市场行情等因素影响，玉米价格上涨时，饲料终端价格同步攀升，进一步压缩养殖利润空间。（二）中等规模养殖场（2 万 - 30 万羽）：人工成本纳入考核体系中等规模养殖场因养殖规模扩大，家庭劳动力已无法满足运营需求，需雇佣专职饲养人员，人工成本占总成本比例约8%-10%，成为重要成本构成项。同时，养殖规模扩大导致管理复杂度提升，需配置基础管理团队（含场长、技术员等），以保障养殖流程规范化、高效化运行。除鸡苗、饲料、疫苗与保健、水电费等与小规模养殖场共通的成本项外，中等规模养殖场的设备维护费用随设备使用频率及老化程度同步增加。鸡舍、喂料设备、通风设备等养殖设施的折旧成本开始纳入核算范畴，这要求养殖场在设备采购阶段，需综合评估设备性价比、使用寿命及维护成本，实现固定投入与产出效率的动态平衡。（三）大规模养殖场（30 万羽以上）：全链条管理的成本复杂化大规模养殖场需实施全链条精细化管理，管理成本显著攀升，除场长外，还需配置兽医、财务、仓储、设备维护、环控、安保等专业团队，管理费用占总成本比例达15%-20%。固定资产投入方面，规模化养殖需配备自动化喂料系统、智能化环境控制系统等先进设备，设备折旧成本较高；同时，受环保政策趋严影响，大规模养殖场需投入大额资金建设及运营粪污处理设施，以满足环保排放要求，环保设施投入成为重要成本项。不过，大规模养殖场具备规模经济优势：通过集中采购饲料，可依托批量采购优势获取议价权，降低饲料采购成本；部分大型养殖场通过品牌化运营，提升鸡蛋产品附加值，以差异化定价策略提升销售单价，部分抵消成本压力。二、小规模家庭养殖场成本核算与亏损测算小规模家庭养殖场在蛋鸡养殖行业中占据一定市场份额，其独特的运营模式决定了成本结构与盈利逻辑的特殊性。2025年蛋鸡行业陷入低迷期，此类养殖场的成本核算与亏损状况成为行业关注焦点。深入分析其各养殖阶段的成本构成与收益水平，对于精准研判小规模养殖的困境与挑战具有重要参考价值。（一）育成期成本：青年鸡与生长期投入育成期是蛋鸡养殖的关键阶段，该阶段成本投入对后续产蛋期效益具有基础性影响。2024年冬季至2025年上半年，受市场供需关系、鸡苗供应量等多重因素叠加影响，60日龄青年鸡单价攀升至16.5元/只，较往年同期显著偏高，导致养殖户初期资金投入压力加大。在育成期总成本中，60日龄青年鸡成本占比达40%，是育成期成本管控的核心环节。60日龄至150日龄为蛋鸡生长期，以海兰褐品种为例，单只鸡在饲料、疫苗、保健及水电费等方面的投入约22元。该阶段饲料成本为核心支出项，随鸡只日龄增长，采食量逐步提升，日均成本同步上升：60-90日龄为蛋鸡快速生长期，营养需求旺盛，饲料消耗量及品质要求较高；90-150日龄蛋鸡生殖系统开始发育，需均衡营养供应，进一步推高饲料成本。同时，鸡群成活率是影响单羽成本分摊的关键因素，若该阶段因疾病等问题导致成活率下降，存活鸡只的单位成本将显著增加。因此，养殖户需强化饲养管理，落实疾病预防措施，提升鸡群成活率，以降低单羽成本。（二）产蛋期成本与收入对比蛋鸡进入150-500日产蛋期后，成本与收入的匹配关系直接决定养殖盈亏状态。成本端，以平均90%产蛋率核算，饲料成本为核心支出项：已知饲料单价1.3元/斤，料蛋比2.1，即每生产1斤鸡蛋需消耗2.1斤饲料，对应饲料成本2.73元（1.3×2.1）。此外，疫苗、保健、水电费及其他日常运营费用虽单项占比不高，但累计后仍需重点关注，叠加后单斤鸡蛋综合成本超3.2元。收入端，2025年2月起蛋价持续低迷，市场均价仅2.8元/斤，显著低于成本线，形成明显价格倒挂。测算显示，养殖户每销售1斤鸡蛋亏损超0.4元，价格与成本的大幅背离导致小规模家庭养殖场在产蛋期陷入严重亏损状态。（三）阶段性亏损测算（以河南、陕西褐壳鸡为例）以河南、陕西地区褐壳鸡养殖为例，2-11月期间，在未核算人工、折旧等成本的前提下，通过对育成期与产蛋期成本及收入的精准核算，单只鸡累计亏损达36.76元，直观反映出小规模家庭养殖场在当前市场环境下的经营困境。从实际经营维度看，人工与折旧成本客观存在。小规模家庭养殖场虽以家庭劳动力为主，但家庭劳动力存在机会成本，若按市场劳动力价格折算，叠加养殖设备折旧成本，单只鸡亏损将进一步扩大10-15元，即单只鸡亏损区间为46.76-51.76元。这充分暴露了小规模养殖场抗市场风险能力较弱的短板，在市场行情下行周期，易陷入深度亏损，甚至面临生存危机。三、2025 年蛋鸡行业三大核心困境2025年蛋鸡行业深陷多重困境，成本高企、收入下滑与产能过剩形成叠加效应，给全行业从业者带来严峻挑战。深入剖析上述困境的形成机制与影响路径，对于探寻行业破局之道具有重要意义。（一）成本之困：饲料与鸡苗的双重挤压饲料成本在蛋鸡养殖总成本中占比60%-70%，处于绝对主导地位。2025年，饲料价格全年多数时段维持在3.17-3.27元/公斤的高位区间；8月受玉米价格大幅上涨驱动，饲料价格进一步攀升至3.34元/公斤。玉米作为核心饲料原料，其价格受国际国内多重因素影响：国际层面，美国、巴西等主产国产量波动、贸易政策调整等因素直接冲击国际玉米价格，进而传导至国内市场；国内层面，种植面积变化、库存水平及养殖业整体需求等因素主导玉米价格走势。豆粕作为另一关键饲料原料，其价格受大豆进口量、国内压榨产能及养殖需求等因素综合影响，波动频繁。饲料价格的持续高位运行，持续侵蚀养殖利润，成为制约行业盈利的核心瓶颈。2025年上半年，商品代鸡苗价格持续上行，4月底单价攀升至4.21元/羽，同比涨幅12.27%。鸡苗价格上涨主要源于供应端约束：一方面，海兰、罗曼等进口品种鸡苗供应紧张，优质鸡苗供需失衡；另一方面，国内祖代及父母代蛋种鸡存栏结构调整，短期内难以释放充足鸡苗供应。尽管下半年鸡苗价格随行业亏损加剧有所回落，但年初高成本投入已使养殖企业面临沉重的开局压力，鸡苗采购环节的大额资金占用，进一步加重了后续养殖的成本负担。（二）收入之难：蛋价与淘汰鸡价双双走弱2025年鸡蛋价格全年呈震荡下行态势，市场行情持续低迷。年中鸡蛋价格跌至5.06元/公斤的年内低位，主产区鸡蛋均价长期维持在2.8元/斤左右，已跌破多数养殖场成本线。从供需关系看，蛋价下跌核心驱动因素为供应过剩：2025年全国在产蛋鸡存栏量持续高位运行，鸡蛋市场供应充足；而需求端增长相对平缓，消费市场对鸡蛋的需求较为刚性，缺乏增量动力，叠加节假日消费拉动效应减弱，鸡蛋市场供大于求格局持续强化，蛋价承压下行。淘汰鸡价格同步走弱，受蛋价低迷及屠宰企业压价等多重因素影响，10月底淘汰鸡价格探至8.45元/公斤的年内低点，较2024年同期下跌15%。蛋价低迷期，养殖户为压缩成本普遍选择淘汰老鸡，但大规模淘汰鸡集中出栏导致市场供应激增；与此同时，屠宰企业依托市场供大于求格局实施压价收购，进一步压缩养殖户淘汰鸡销售收益，导致养殖户收入来源进一步萎缩。（三）产能之症：存栏高企与扩张叠加2025年全国在产蛋鸡存栏量持续高位运行，9月存栏量突破12.7亿羽，创年内峰值，全年平均存栏量约12.2亿羽，同比增长1.3%。高存栏量导致鸡蛋市场供应过剩，消化周期延长。为应对行情低迷，养殖端普遍采取推迟淘汰、实施强制换羽等措施，蛋鸡平均淘汰日龄延长至520天以上。上述举措虽短期可减少淘汰鸡出栏量、降低成本支出，但从长期来看，进一步延缓了产能去化进程，加剧了市场供需失衡。规模化扩张的持续推进进一步加剧了产能过剩矛盾。2025年全国计划投建蛋鸡项目98个，新增产能约2亿羽，其中百万羽级别项目占比达67%。规模化养殖的发展虽有助于提升行业生产效率与标准化水平，但在市场行情低迷期，大规模产能扩张导致鸡蛋供应进一步增加，市场竞争加剧。行业集中度提升过程中，小规模养殖户市场竞争力进一步弱化，市场供需结构更趋复杂，产能去化周期显著延长，行业陷入深度调整。四、区域差异与破局策略（一）不同区域成本与蛋价对比蛋鸡养殖行业的成本与蛋价存在显著区域差异，该差异受饲料原料供应、人工成本、运输成本及市场供需等多重因素影响，直接决定区域养殖户的盈亏状态。以莱芜区为例，2024年当地存栏10万只以上规模场蛋鸡养殖成本（含折旧）控制在6.4元/公斤，这得益于当地稳定的饲料原料供应渠道及相对较低的人工成本：当地饲料原料多采购自周边地区，运输成本较低，且规模场依托集中采购优势获取饲料价格折扣；人工成本方面，莱芜区劳动力市场价格平稳，有效控制了人工支出。2024年当地鸡蛋平均价格9.06元/公斤，测算显示，单只母鸡年养殖盈利约30元，养殖效益良好。反观2025年河南、陕西等主产区的小规模养殖场，养殖成本攀升至6.8元/公斤以上。河南、陕西虽为农业大省，饲料原料资源丰富，但受市场波动及采购渠道限制，小规模养殖场难以依托规模优势对冲饲料价格上涨压力，饲料成本居高不下；同时，部分地区劳动力市场需求变化导致人工费用上升，进一步推高养殖成本。蛋价方面，上述地区2025年鸡蛋均价长期维持在2.8元/斤左右，显著低于莱芜区2024年水平，导致养殖户陷入持续亏损。区域间盈亏平衡点差异显著，饲料原料价格、人工成本、运输成本及市场供需关系等因素共同决定各区域的盈亏平衡线。饲料原料主产区周边的养殖场，因原料采购成本较低，盈亏平衡点相对偏低；而交通不便、原料依赖外部输入的地区，运输成本推高总成本，导致盈亏平衡点上升。养殖户需结合区域实际情况，精准测算盈亏平衡点，为养殖规模调整及销售策略制定提供数据支撑。（二）养殖端应对策略面对蛋鸡行业的深度调整，养殖端需实施科学有效的应对策略，以降低亏损、保障生存，为行业复苏奠定基础。精准实施淘鸡计划：小规模养殖场鸡蛋销售单价需达3.3元/斤以上方可实现盈利。因此，科学淘汰老鸡是控制成本、提升效益的关键举措。建议养殖户密切跟踪蛋鸡产蛋率变化，对500日龄以上且产蛋率显著下滑的蛋鸡及时淘汰，避免因过度惜售导致饲料成本持续投入而收益不足，进一步加剧亏损。及时淘汰老鸡可减少饲料消耗，释放养殖空间，为后续批次蛋鸡养殖创造条件。强化全流程成本管控：成本管控是养殖端应对行业低迷的核心举措。饲料配方方面，需根据蛋鸡生长阶段及营养需求精准配比，避免营养过剩或不足，提升饲料利用率，降低单位饲料成本；成活率提升方面，需将死淘率控制在5%以内，通过优化养殖环境、强化饲养管理、落实疫病防控措施，减少非生产性成本损失；料蛋比优化方面，需将料蛋比控制在2.0及以下，通过饲料配方优化、养殖管理强化等手段，降低单位鸡蛋饲料消耗量，压缩单位产出成本。优先落实疾病防控：冬季为蛋鸡呼吸道疾病高发期，疾病防控直接影响蛋鸡健康状态、产蛋率及养殖效益。养殖户需强化鸡舍通风管理，保持空气流通，降低氨气等有害气体浓度；精准控制鸡舍温湿度，避免温湿度剧烈波动，为蛋鸡营造适宜生长环境；定期开展疫苗接种与疫病监测，建立疾病预警机制，及时处置疾病隐患，保障蛋鸡群健康，维持90%以上产蛋率，最大化养殖效益。五、行业转机与未来展望（一）短期积极信号随着行业调整推进，蛋鸡市场逐步显现积极信号，为行业短期复苏提供支撑。冬季低温环境延长鸡蛋保鲜期，降低储存损耗，保障市场供应稳定性；春节备货周期临近，食品加工企业批量采购鸡蛋用于节日食品生产，家庭消费者增加鸡蛋储备，市场需求集中释放，驱动蛋价回升。受此影响，主产区蛋价已回升至3元/斤以上，短期呈现反弹态势。产能端同样出现积极变化：11月后备蛋鸡存栏较上月减少1900万只，新增产能增速放缓，将逐步缓解市场供应压力；待淘老鸡存栏不足1亿只，仍存在较大淘汰空间，产能去化进程有望加速，进一步改善市场供需关系。值得关注的是，自8月起鸡苗订购量大幅下滑，当前2026年1月鸡苗订单已无新增，受鸡苗生长周期影响，这将直接导致2026年6月前新增产蛋鸡供应量减少，为后续市场供需平衡改善创造有利条件。（二）长期发展建议小规模养殖场需以精细化管理提升核心竞争力，实现可持续发展。饲养管理方面，需根据蛋鸡生长阶段精准调整饲料配方，保障营养均衡，提升饲料转化率，降低饲料成本；环境控制方面，需科学调节鸡舍温湿度、通风条件，营造适宜生长环境，减少疾病发生，提升蛋鸡成活率与产蛋率；规模管控方面，需结合自身资金、技术及管理能力，合理确定养殖规模，避免盲目扩张导致成本高企与风险加剧，实现资源优化配置。大规模养殖场需依托规模优势，推进品牌化、标准化发展。品牌建设方面，需建立全链条质量控制体系，保障鸡蛋品质安全稳定；强化品牌宣传推广，提升品牌知名度与美誉度，依托品牌效应提升产品附加值，增强市场竞争力。标准化建设方面，需在鸡苗采购、饲料供应、养殖管理、鸡蛋销售全产业链环节建立统一标准规范，提升生产效率与产品质量稳定性；引入先进信息技术，实现养殖过程智能化管理，进一步降本增效。行业层面需理性看待产能扩张，推动市场调节与政策引导协同发力，实现可持续发展。市场调节需充分发挥基础性作用，通过价格信号引导低效产能退出；政策引导方面，政府可出台产业扶持政策，鼓励高效、环保养殖模式发展，限制落后产能扩张，推动行业转型升级。通过市场调节与政策引导有机结合，加速低效产能出清，促进市场供需再平衡，推动蛋鸡行业进入健康发展轨道。2025年蛋鸡行业的深度调整，既是对养殖端成本管控与风险应对能力的考验，也是推动产业升级的重要契机。养殖端唯有聚焦效率提升、落实止损优化措施，方能在周期波动中筑牢生存根基，静待行业复苏。

肉鸡（蛋鸡）养殖过程中经常出现呼吸道疾病，轻则影响采食，降低生产性能，增加料肉比；重则造成疫病爆发大量死淘，特别是秋冬春季更为严重，给养殖场造成不少损失。​　　可您的鸡群为什么抗病能力差?　　对于环境应激如此敏感，在养殖过程中为什么呼吸道疾病多发?　　大家可能没有深入去了解过这些问题，此文章会为大家分析解答这些问题，让大家了解一些呼吸道发病的根源，以便于在今后的养殖工作中做到科学管理预防，降低养殖风险的目的。　　二、免疫系统缺陷　　鸡没有淋巴结，只有原始的淋巴组织。淋巴组织是重要的免疫器官，能够有效抵御疾病，而淋巴结则是抵抗力的关键结点，并且能过滤有害病原，并且能参与免疫反应。禽类当中只有水禽有淋巴结，而鸡缺少了一道抗病屏障，这也就是为什么鸡的抗病能力比鸭鹅弱的重要原因。　　三、种源净化差垂直传播问题　　1.目前国外原种和曾祖代种鸡群部分是实现了支原体的净化的，但国内饲养环境较差感染是很严峻的，种鸡饲养杂乱无法实现父母代种鸡支原体的净化。　　2.支原体性质决定，野毒感染鸡群是难以清除的，必然存在垂直传播性，只是高低而已。

在农村地区，散养鸡养殖是一项较为普遍的家庭副业，不仅为农户提供了额外的经济收入，也丰富了农村居民的饮食结构。然而，散养鸡养殖环境相对开放、管理方式较为粗放等特点，其面临着诸多疾病威胁，一旦发生疫情，不仅会导致鸡只死亡、产量下降，给农户带来直接的经济损失，还可能影响农村地区的食品安全和公共卫生。基层兽医服务作为保障农村养殖业健康发展的关键力量，其服务模式直接关系到散养鸡疾病防控的效果，不同的服务模式在技术支持、防疫措施落实、疫情监测与应对等方面存在差异，进而对农村散养鸡疾病防控管理产生不同程度的影响。因此，深入研究基层兽医服务模式对农村散养鸡疾病防控管理的影响，对于优化基层兽医服务、提高散养鸡疾病防控水平、促进农村养鸡业可持续发展具有重要的现实意义。一  农村散养鸡疾病防控问题分析多数农户对散养鸡疾病防控的重视程度不够，认为散养鸡数量少，死几只对家庭经济影响不大，往往在鸡发病死亡后才开始关注，且优先选择自行买药治疗，最后才考虑防疫。大部分散养户缺乏基本的防疫知识，不了解不同疫苗的作用和适用日龄，认为打一次针就能保证鸡终生不生病；对病死鸡的处理方式不当，随意丢弃或宰杀食用，容易造成疫病传播。由于散养鸡日龄不同，相邻农户鸡的日龄也不一致，加上鸡只白天自由活动，难以集中进行防疫，防疫措施难以有效实施。农户对养殖环境的消毒意识淡薄，养殖器具、鸡笼、鸡舍等很少进行消毒，管理方式随意，一旦鸡发病，存在人药兽药乱用的情况。二  基层兽医服务模式分析1  传统政府主导的基层兽医服务模式在传统模式下，基层兽医服务主要由政府设立的乡镇兽医站承担，兽医站的职责包括动物疫病的预防、诊断、治疗，动物检疫，以及对养殖户的技术指导等。人员构成多为政府编制的兽医人员，其经费主要来源于财政拨款，这种模式在过去很长一段时间内，为农村养殖业的发展提供了基础的兽医服务保障，在动物疫病防控、疫情监测等方面发挥了重要作用。然而，随着农村养殖业的发展和变化，这种模式逐渐暴露出一些问题，如兽医站人员编制有限，面对众多的养殖户和大量的散养鸡，服务难以全面覆盖；部分兽医人员知识更新不及时，难以应对新型疾病和复杂的疫情；财政投入相对不足，导致设备设施陈旧，影响诊断和治疗的准确性和效率。2  兽医社会化服务模式兽医社会化服务是近年来兴起的一种新型服务模式，它将原本由政府承担的部分兽医服务职能通过购买服务等方式，转由社会化的专业机构或组织来实施，这些机构和组织包括专业的兽医服务公司、养殖服务合作社等，其人员构成除了执业兽医师外，还有经过培训的专业防疫人员，服务内容涵盖动物疫病的预防、诊断、治疗、疫苗配送与接种，以及养殖技术咨询和培训等。这种模式的优势在于引入了市场机制，提高了服务的效率和质量，专业机构拥有更先进的技术和设备，能够为养殖户提供更精准的诊断和治疗方案；通过开展多元化的服务，满足了养殖户不同层次的需求。同时，也减轻了政府的财政负担和工作压力，但在推广过程中，也面临一些挑战，如部分养殖户对社会化服务的认知和接受程度较低，服务费用相对较高，一些偏远地区服务难以覆盖等。3  其他创新服务模式一些地区还探索了“互联网+兽医服务”模式，通过建立线上服务平台，养殖户可以随时与兽医专家进行沟通交流，获取疾病诊断、治疗建议和养殖技术指导等服务。还有“龙头企业+养殖户+兽医服务”模式，龙头企业凭借自身的技术和资源优势，为养殖户提供统一的兽医服务，包括疫苗供应、疫病防控方案制定等，促进了养殖的标准化和规模化，提高了疾病防控的整体水平。三  基层兽医服务模式对农村散养鸡疾病防控管理的影响1  技术支持与培训传统政府主导模式下，兽医站会定期组织一些技术培训活动，但由于培训资源有限、针对性不强等，养殖户对防疫知识和技术的掌握程度有限，而兽医社会化服务模式下，专业机构会根据养殖户的实际需求，开展更加个性化、专业化的培训，如针对散养鸡常见疾病的诊断和治疗、疫苗的正确使用方法、养殖环境的消毒技术等进行详细讲解和现场示范。2  防疫措施落实在传统模式中，由于服务覆盖范围有限和防疫工作难度大，一些防疫措施如定期免疫接种、养殖环境消毒等难以全面落实到位，而兽医社会化服务模式通过组建专业的防疫队伍，采用市场化的运作方式，能够更加高效地推进防疫工作。专业防疫人员会按照科学的免疫程序，上门为养殖户的散养鸡进行疫苗接种，并监督指导养殖户做好养殖环境的消毒工作，如“龙头企业+养殖户+兽医服务”模式下，龙头企业会对养殖户提出统一的防疫要求，并协助落实各项防疫措施，提高了防疫工作的标准化和规范化程度。3  疫情监测与预警传统政府主导模式主要依靠兽医站工作人员进行疫情监测，信息收集渠道相对单一，反馈速度较慢，难以及时发现和预警疫情。而兽医社会化服务模式下，专业机构通过建立完善的疫情监测网络，利用先进的检测技术和设备，能够更及时、准确地发现疫情线索。同时，借助信息化手段，实现疫情信息的快速上报和共享，为疫情防控争取宝贵时间，如“互联网+兽医服务”模式通过大数据分析，可以对疫情的发生趋势进行预测，提前发出预警信号，指导养殖户做好防范措施。四  优化基层兽医服务模式的建议1 加强基层兽医队伍建设提高基层兽医人员的待遇，包括提高工资水平、完善福利保障体系等，吸引更多专业人才加入基层兽医队伍；定期组织基层兽医人员参加业务培训，邀请专家进行授课，学习最新的兽医知识、诊断技术和疾病防控方法，不断更新知识结构，提高业务能力；建立健全基层兽医人员考核评价机制，对工作表现优秀的人员给予奖励，对不称职的人员进行调整，激励基层兽医人员积极工作，提高服务质量。2 加大对基层兽医服务的投入政府应加大财政投入，改善基层兽医站的设备设施条件，配备先进的诊断设备、疫苗冷藏设备等，提高兽医服务的硬件水平；设立专项基金，用于支持基层兽医服务模式的创新和推广，鼓励社会资本参与基层兽医服务，拓宽资金来源渠道。3 完善法律法规和监管体系完善基层兽医服务和动物防疫相关的法律法规，明确兽医服务机构和人员的职责、权利和义务，规范服务行为；加强对基层兽医服务的监管，建立严格的市场准入和退出机制，对不符合要求的服务机构和人员进行清理整顿，保障养殖户的合法权益。4 提高养殖户参与度和意识通过开展宣传教育活动，如举办养殖技术讲座、发放宣传资料、组织实地参观等方式，提高养殖户对基层兽医服务和疾病防控的认识，增强其防疫意识和主动参与的积极性；建立养殖户与基层兽医服务机构的沟通交流机制，及时了解养殖户的需求和意见，不断改进服务质量。五  结  论基层兽医服务模式对农村散养鸡疾病防控管理有着至关重要的影响，当前农村散养鸡疾病防控存在诸多问题，而不同的基层兽医服务模式在技术支持、防疫措施落实、疫情监测与预警等方面表现出不同的效果。传统政府主导模式存在一定的局限性，而兽医社会化服务模式等创新模式在提升散养鸡疾病防控水平方面具有明显优势，通过加强基层兽医队伍建设、加大投入、完善法律法规和监管体系以及提高养殖户参与度和意识等措施，优化基层兽医服务模式，能够有效提高农村散养鸡疾病防控管理水平，保障农村养鸡业的健康发展，增加养殖户的经济收入，促进农村经济的繁荣。未来，还需要进一步探索和完善基层兽医服务模式，以适应农村养殖业不断发展变化的需求。原创声明本文版权属于中国禽业导刊，原文刊登于《中国禽业导刊》2025年第11期，如需转载，请注明来源。作者：雷洵一作者单位：甘肃省天水市清水县白沙镇农业农村综合服务中心编辑：李婷婷

大家好，今天给大家分享一篇来自中国农业大学动物医学院，农业部动物流行病学重点实验室发表在VIRUSES 的一篇名为“Host Combats IBDV Infection at Both Protein and RNA Levels”的文章。1摘要传染性法氏囊病（IBD）是由传染性法氏囊病病毒（IBDV）引起的一种急性、高度传染性且具有免疫抑制作用的禽类疾病。近年来，随着传染性法氏囊病病毒变异株和重组株的出现，该病毒仍对全球家禽业构成威胁，宿主与传染性法氏囊病病毒之间的 “战斗” 似乎从未停止。因此，迫切需要制定更全面、有效的策略来防控这种疾病。深入了解病毒与宿主相互作用的机制，将有助于新型疫苗的研发。目前，在宿主对传染性法氏囊病病毒感染的应答机制研究方面已取得诸多进展。若将宿主与传染性法氏囊病病毒在蛋白质水平的对抗视为 “正面战场”，那么两者在RNA水平的较量可看作 “隐蔽战场”，宿主正是在这两条战线上共同抵御传染性法氏囊病病毒的感染。鉴于此，本综述聚焦当前对宿主在蛋白质和RNA水平上应对传染性法氏囊病病毒感染应答机制的认知。1前言传染性法氏囊病（IBD），也称为甘博罗病，是一种由传染性法氏囊病病毒（IBDV）引起的急性、高度接触性和免疫抑制性禽类疾病。它最早于1960年代在美国特拉华州甘博罗被描述。此后，IBDV广泛分布于世界各地。IBDV感染鸡，特别是在法氏囊发育最后阶段的3-6周龄雏鸡；它能直接攻击并破坏法氏囊，这是鸡B淋巴细胞发育和成熟的中枢免疫器官。此外，IBDV感染不仅在法氏囊，而且在脾脏和外周血中诱导B淋巴细胞凋亡，导致存活鸡的免疫抑制，随后对其他病原体感染的易感性增加和疫苗接种失败。影响IBDV诱导死亡率的因素很复杂，涉及不同的毒株、病毒的毒力水平、感染剂量、鸡的日龄和品种以及被动免疫水平。感染变异型IBDV（viBDV）和超强毒型IBDV（vvIBDV）的鸡死亡率可能高达30-100%，给全球家禽业造成巨大的经济损失。尽管使用活减毒疫苗或灭活疫苗对鸡进行接种在某些地区对控制IBD有效，但由于田间出现viBDV 毒株和新的重组毒株，IBD的爆发仍然频繁发生。最近一项研究比较了2020-2021年期间从IBD爆发中恢复的鸡中属于不同基因型的三个选定分离株的致病性，结果显示，典型的vvIBDV分离株BD-25 (A3B2)，即毒性最强的毒株，引起了疾病；其发病率为100%，死亡率为90%，而片段重配vvIBDV分离株BD-28 (A3B3) 的发病率为50%，死亡率为30%。然而，两种vvIBDV毒株在法氏囊中的大体和组织病理学病变相似，表明两种vvIBDV分离株引起的发病率和死亡率差异可能是由于其遗传组成所致。与早期研究相似，经典强毒分离株BD-26 (A1aB1) 没有引起任何临床疾病。这些结果也表明，三种基因型的IBDV在孟加拉国的鸡群中共同传播。此外，据报道，最近在北美和亚洲流行的大多数 IBDV 毒株是IBDV的变异株，主要导致亚临床感染，由于严重的免疫抑制造成巨大的经济损失。重要的是，在中国至少11个省份，从接种过vvIBDV疫苗的鸡中分离到了新型变异IBDV毒株，表明变异IBDV毒株可以突破抗 vvIBDV疫苗诱导的免疫保护。此外，活减毒疫苗可能诱导鸡的免疫抑制。因此，完全理解IBDV-宿主相互作用的机制将对开发新型疫苗有很大帮助。病毒在宿主细胞内复制并协调病毒成分的组装以产生子代病毒，这会影响宿主细胞的合成、代谢和其他正常生理功能，最终导致宿主患病。为了对抗病原体，宿主逐渐进化形成一套完整而复杂的抗病毒免疫反应。天然免疫是宿主防御入侵微生物的第一道防线。宿主对入侵病原体的识别是引发天然免疫反应的初始且最关键的步骤；它依赖于病原体相关分子模式（PAMPs）与宿主模式识别受体（PRRs）的结合，例如Toll样受体（TLRs）、核苷酸结合寡聚化结构域（NOD）样受体（NLRs）、RIG-I 样受体（RLRs）等，并启动免疫信号传导以诱导宿主针对病原体感染的反应。随后，适应性免疫反应被引发，以促进病原体的清除和免疫记忆的产生。同时，病原体也发展了多种机制来逃逸宿主的免疫反应。因此，病毒与宿主之间的战争总是持续不断。对于家禽业而言，使用疫苗的预防策略在大多数情况下可以预防和控制流行地区鸡群的IBD爆发。然而，由于新出现的IBDV变异株的不断进化，以及缺乏疫苗开发指导，很难开发出高效力的疫苗来预防和控制IBD。因此，对新型高效的抗IBDV感染疫苗存在巨大需求。研究直接或间接干扰病毒复制的细胞因子和/或通路将为开发成功控制IBD的新方法提供有价值的线索。本综述重点关注目前对宿主在蛋白质和RNA水平上对IBDV感染反应的理解。2宿主对IBDV感染的天然免疫反应宿主的天然免疫构成了抵御病原体感染的第一道防线。PRRs在几乎所有的系统细胞中表达，通过识别PAMPs在启动天然免疫反应中起关键作用，这导致I 型和III型干扰素（IFNs）以及其他促炎介质（例如细胞因子、趋化因子和抗菌肽）的产生。越来越多的证据表明IBDV感染在鸡中引发炎症反应，并且发现IBDV 感染后1天，鸡法氏囊中CD4+细胞、CD8+细胞和巨噬细胞的数量急剧增加，促炎细胞因子IL-1β、IL-6 和CXCLi2 的表达也增加；然而，在IBD 感染的鸡法氏囊中，抗炎细胞因子TGF-β4的表达下降。类似地，在IBDV感染的鸡脾脏中，促炎细胞因子和趋化因子的mRNA表达增加。这些发现最近得到了在感染 vvIBDV的原代法氏囊细胞和DT40细胞中鸡巨噬细胞迁移抑制因子（chMIF）表达上调的支持。此外，chMIF 可以促进鸡原代培养巨噬细胞中促炎细胞因子的转录并诱导外周血单个核细胞的迁移，揭示了vvIBDV 介导的促炎反应启动机制。最近一项比较感染低剂量IBDV的不同近交系白来航鸡转录谱的研究表明，不同的白来航品系在感染后表现出不同的疾病结局，IBD的严重程度与法氏囊中趋化因子和细胞因子介导的显著增强的炎症、Rho GTPases对细胞骨架的调节、烟碱型乙酰胆碱受体信号传导和Wnt信号传导相关。研究发现，在IBDV感染的DF-1 细胞中，IL-1β、IFN-β、caspase-1和NLRP3的转录水平增加，并且敲低NLRP3 增强了病毒载量，表明IBDV感染在DF-1细胞中激活了NLRP3炎症小体。然而，这项研究缺乏关于ASC、caspase 1或 11、IL-1、IL-18 以及蛋白水平的切割 gasdermin的必要数据，这些对于确定炎症小体的形成和随后的细胞焦亡的诱导至关重要。目前，仍然需要可靠的实验证据来确认IBDV诱导的炎症小体形成以及细胞焦亡。原则上，鸡的天然免疫作为宿主防御IBDV感染的第一道防线，包括炎症反应，在正常范围内促进吞噬作用和IBDV的清除。然而，如果vvIBDV感染诱导完全失控的急性过度炎症反应，过度的炎症可能导致“细胞因子风暴”，引起败血症甚至死亡等严重后果，并且受损的法氏囊在存活个体中很难恢复。毫无疑问，IBDV感染鸡的炎症反应与疾病的严重程度以及法氏囊损伤密切相关。IFNs是宿主反应中最重要的抗IBDV因子。由 I 型IFNs诱导的干扰素刺激基因（ISGs）可以在不同阶段影响病毒生命周期，例如细胞进入、复制、转录、组装和释放。由于RIG-I 在鸡中遗传性缺失，IBDV基因组dsRNA主要通过 MDA5和TLR3识别。在感染DT40细胞来源的vvIBDV的鸡中，法氏囊中TLR1、TLR2、TLR4、TLR3 和 TLR5 的表达增加。类似的结果表明，在感染IBDV田间毒株NN040124的鸡PBMCs、DF-1细胞以及法氏囊组织中，chTLR3 的mRNA 水平增加，但其下游效应分子IFN-β在感染早期阶段下降；这表明IBDV进化出多种策略来抑制I型IFNs的产生以在宿主体内存活。与IBDV感染的HD11细胞相反，法氏囊中TLR3和TLR7（识别单链病毒 RNA）的mRNA表达均下降。不同研究之间TLR表达的差异可能是由于IBDV的不同毒株所致，因为发现TLR3的表达在经典IBDV感染后上调，但在变异型IBDV感染后下调，表明IBDV感染细胞中TLRs的不同表达可能与不同病毒毒株引起的疾病严重程度有关。防御素是天然免疫中重要的抗菌小肽，对病原体（细菌、真菌、原生动物和有包膜病毒）具有直接的抗菌作用，它们也在免疫调节中发挥作用。研究发现，用IBDV VP2 基因连同鸡β-防御素-1（AvBD1）基因免疫的鸡比单独用IBDV VP2 基因免疫的鸡具有更高的抗体水平，表明AvBD1对促进DNA疫苗的功效具有佐剂效应。据报道，鸡肠道抗菌肽（CIAMP）可以增加用IBDV疫苗免疫的鸡的抗体滴度，表明CIAMP可以调节对IBDV感染的体液免疫反应。似乎鸡的不同遗传背景导致对IBDV感染的天然免疫反应存在一些差异，并且不同毒株的IBDV启动了不同程度的天然免疫。这可能给我们一个机会来考虑开发抗IBDV种鸡育种选择策略的可能性。我们对鸡遗传背景对抵抗IBDV感染的天然免疫影响的了解越多，我们就能制定出更有效的控制IBDV感染的策略。3宿主对IBDV感染的适应性免疫反应3.1 鸡对IBDV感染的体液免疫反应宿主的适应性免疫负责在病原体感染后期，当天然免疫在疾病早期未能完全清除病原体后，对病原体进行特异性识别和清除。体液免疫反应主要由B淋巴细胞执行。不幸的是，鸡法氏囊中的未成熟B细胞是IBDV感染的靶细胞，IBDV诱导的B淋巴细胞凋亡直接导致法氏囊中B细胞的严重耗竭，导致鸡免疫系统的破坏。与先前的研究一致，最近的一项出版物显示，IBDV毒株LJ-5，一种新的超强毒型IBDV（vvIBDV）分离株，降低了法氏囊指数、B淋巴细胞活力以及法氏囊中的免疫球蛋白（Ig）水平，包括IgM和IgA，以及血清中的 IgY 。使用单细胞RNA测序（scRNA-seq）和流式细胞术，发现IBDV感染的鸡法氏囊中 B细胞群与对照组相比急剧减少，同样，IBDV感染减少了法氏囊中IgM⁺ 和IgY⁺ B细胞的数量。此外，发现IgY⁺和IgA⁺ B细胞比IgM⁺ B细胞更丰富，并且负责IgA转换的BLMP1和IRF4在IBDV感染的鸡中高表达；这表明IBDV感染促进了法氏囊中IgA的分泌，并且IgY⁺和IgA⁺细胞可能负责产生抗IBDV的抗体。尽管由于IBDV感染导致鸡法氏囊中未成熟B细胞耗竭，成熟的特异性B细胞在接触 IBDV后会扩增，并在从IBD急性期恢复的鸡中引发强烈的体液免疫反应。在最近的一项研究中，基于大体和组织病理学检查以及病毒载量，比较评估了马来西亚变异型IBDV和vvIBDV在无特定病原体（SPF）鸡中的致病性，发现即使两种 IBDV毒株在病毒载量、毒力和持久性方面存在差异，两种毒株都能在IBDV感染后7天引发显著的抗体反应；这表明体液免疫反应可能在控制IBDV感染中起关键作用。3.2 鸡对IBDV感染的细胞介导免疫反应细胞介导的免疫反应主要由T淋巴细胞执行。IBDV感染的鸡法氏囊中T淋巴细胞数量增加以及相关细胞因子和趋化因子的产生表明，IBDV感染可引发细胞介导的免疫反应。据报道，感染vvIBDV后，鸡法氏囊中Th1细胞因子（IFN-γ、IL-2 和 IL-12P40）的表达增加，但在感染IBDV Ts 株（一种细胞适应病毒）的鸡中，Th2细胞因子（IL-4、IL-5、IL-13 和 IL-10）的表达远高于Th1细胞因子；这表明细胞适应株IBDV主要诱导体液免疫反应。有趣的是，发现在使用胸腺切除术（Tx）和环孢素A（CsA）治疗的鸡中，法氏囊中的IBDV抗原载量显著高于T细胞完整的鸡；这表明功能性T细胞在控制病毒复制中起重要作用；然而，与T细胞完整的鸡相比，Tx-CsA鸡的凋亡减少，表明IBDV感染诱导的法氏囊细胞破坏可能由细胞毒性T淋巴细胞（CTL）介导。同时，与T细胞完整的鸡相比，Tx-CsA鸡中重新形成的法氏囊滤泡数量增加，表明功能性T细胞的存在延迟了从IBDV诱导的法氏囊滤泡耗竭中的恢复。此外，鸡感染IBDV增加了法氏囊和脾脏中CD8+ T细胞的数量，并且法氏囊和脾脏中Fas和Fas配体（FasL）、穿孔素（PFN）和颗粒酶-A（Gzm-A）的表达显著上调；这表明CTL可能通过Fas-FasL 和穿孔素-颗粒酶途径参与从靶器官法氏囊和外周组织中清除IBDV。到目前为止，T细胞响应IBDV感染的确切机制仍不清楚。确定IBDV是否携带用于T细胞激活的主要保护性表位非常重要。激活的T 淋巴细胞将识别由IBDV 感染细胞的禽 MHC-I（在禽类中称为B）呈递的表位，以诱导细胞死亡，随后从被破坏的细胞中释放IBDV抗原，使得游离的病毒抗原可以与特异性抗体结合形成抗原-抗体复合物。随后，它们通过Fc受体介导的调理作用或直接的巨胞饮作用被巨噬细胞吞噬。因此，T细胞介导的免疫对于免疫系统从受感染宿主清除IBDV至关重要。4全宿主在蛋白质水平上对IBDV感染的反应更好地理解病毒感染的分子机制将非常有助于开发新型疫苗或抗病毒药物，并且应鼓励进一步研究宿主-病原体相互作用以阐明宿主对病毒感染反应的分子机制。最近，关于病毒与宿主在分子水平上广泛而复杂相互作用的报告促使研究人员研究病毒-宿主相互作用网络并提出了“病毒-宿主相互作用组学”。靶向细胞因子进行抗病毒治疗将是一种可以克服病毒突变和耐药性的新方法。近年来，IBDV-宿主相互作用取得了显著进展，这促进了寻找可以抑制IBDV复制的细胞靶点这为开发新型疫苗或抗病毒药物提供了理论基础。控制病毒基因组的扩增是宿主抑制IBDV复制的有效策略。翻译真核起始因子4AII（eIF4AII），一种参与大多数细胞mRNA翻译起始的宿主细胞因子，在IBDV感染的DF-1细胞中与VP1相互作用以抑制病毒RNA聚合酶活性，导致 IBDV复制减少（图 1），表明宿主因子eIF4AII在dsRNA病毒复制中的抑制作用。此外，如图1所示，另一个细胞因子，核因子45（NF45），它参与RNA输出并介导mRNA稳定性和翻译，据报道在IBDV感染的DF-1细胞中与VP1、VP2和VP3特异性共定位，与病毒复制复合物相互作用并抑制IBDV复制。亲环蛋白A（CyPA），一种普遍表达的具有肽基-脯氨酰顺反异构酶（PPIase）活性的蛋白质，在蛋白质修饰、折叠、运输和转录调节中起重要作用。CyPA也通过各种机制参与病毒感染。据报道，在IBDV感染的细胞中，CyPA与VP4相互作用以抑制IBDV复制（图 1），表明CyPA影响VP4的酶活性和/或激活针对IBDV感染的先天免疫反应；然而，仍需要进一步的证据来确定其作用。类似地，在最近的一项研究中，使用RNA-seq研究参与IBDV感染的宿主因子；发现TRIM25与VP3相互作用并介导其泛素化和随后的降解，从而限制IBDV复制（图 1）。这些发现表明TRIM25是一种限制病毒复制的宿主因子。图 1. 细胞蛋白在宿主对IBDV感染反应中作用的示意图。IBDV感染触发宿主抗病毒反应，细胞蛋白参与此反应，通过直接与病毒蛋白或基因组相互作用抑制病毒复制。eIF4AII：翻译真核起始因子4AII；NF45：核因子45；TRIM25：三联基序25；CyPA：亲环蛋白A；HSP90AA1：热休克蛋白90 AA1；SQSTM1：sequestosome-1；AKT：蛋白激酶B；mTOR：雷帕霉素的哺乳动物靶标；RdRp：RNA依赖性RNA聚合酶蛋白；dsRNA：双链RNA。自噬是真核生物中维持生理稳定性的高度保守的细胞质途径，它通过将不需要的自身物质降解为氨基酸以供再利用来隔离和清除它们。越来越多的研究确立了自噬在宿主抵抗病原体感染反应中的抗病毒作用。据报道，IBDV VP2与热休克蛋白90（HSP90AA1）的相互作用在感染早期通过HSP90AA1-AKT-mTOR通路诱导自噬，并且激活的自噬抑制病毒复制（图 1），表明自噬参与宿主防御IBDV感染。最近，发现自噬货物受体p62与IBDV VP2相互作用，这增强了自噬的诱导并促进了VP2的自噬降解（图 1），表明p62介导的VP2自噬降解可能在通过MHC呈递VP2肽以启动适应性免疫反应中发挥作用。值得注意的是，降解外来物质（如病原体）的自噬通常称为异源自噬。在最近的一项研究中，发现自噬货物受体SQSTM1通过氨基酸位点 R139和K141直接结合IBDV dsRNA，并介导病毒RNA的自噬降解，从而抑制IBDV复制（图 1）。这些发现表明，宿主对病毒基因组的选择性自噬（异源自噬）在控制IBDV感染中起关键作用。5宿主在RNA水平上对IBDV感染的反应普遍认为非编码RNA（ncRNAs）是一类不编码蛋白质的RNA，据报道，75% 的人类基因组被转录成RNA，而只有3%被转录成蛋白质编码的mRNA。因此，体内丰富的ncRNAs在各种生物过程中起关键作用，包括癌症和其他类型的疾病。根据它们的长度、结构和位置，ncRNAs被分为几类，主要包括微小RNA（miRNAs）、长链非编码RNA（lncRNAs）和环状RNA（circRNAs），但仍有许多ncRNAs需要进一步表征。有许多证据表明ncRNAs参与宿主对病毒感染的反应，特别是基于那些关于miRNAs的研究结果。在宿主对IBDV感染的反应中，细胞蛋白和ncRNAs都参与抗防御过程。如果宿主与IBDV在蛋白质水平上的相互作用被想象为入侵者（病原体）和防御者（宿主细胞）之间战斗的前线，那么它们在RNA水平上的战斗可以看作是隐藏的前线。以下是一些表明IBDV-宿主在RNA水平上相互作用的例子。5.1 miRNAs在宿主对IBDV感染反应中的抗病毒作用miRNA，长度约为22个核苷酸（nt），是研究最广泛的ncRNA，可调节靶 mRNA的表达。在IBDV刺激的鸡树突状细胞（DCs）中，检测到991个保守的 miRNA 。其中，有18个miRNA的表达发生显著改变，包括1个表达下调的和 7个表达上调的。使用KEGG通路和BIOCARTA数据库对预测靶标进行分析，发现MAPK信号、P38 信号以及转录因子CREB及其细胞外信号参与宿主对IBDV 感染的反应。在最近的一项研究中，发现总共在vvIBDV感染的法氏囊组织和模拟感染对照中鉴定出1710个miRNA，其中有42 个miRNA表达上调，35个 miRNA 表达下调。miR-1684b-3p、gga-miR-1788-3p 和gga-miR-3530-5p 在IBDV感染后表达水平变化尤其显著，它们的潜在靶基因包括THBS1、STAT1、STAT3和MYD88。这些预测结果表明这些gga-miRs可能在凋亡、炎症和IFN反应中发挥作用，但需要进一步的证据来确定这些miRNA在宿主对IBDV感染反应中的确切作用。一系列证据表明gga-miRNAs对IBDV感染发挥抗病毒作用，例如 gga-miR-454、gga-miR-130b、gga-miR-155、gga-miR-21和gga-miR-27b。据报道，在IBDV感染的DF-1细胞中，有296 个miRNA 差异表达。MiR-130b，一种在IBDV感染细胞中上调的miRNA，被发现通过直接靶向IBDV A节段和细胞SOCS5来抑制IBDV复制。SOCS5属于SOCS（细胞因子信号传导抑制因子）家族并通过N末端的一个区域直接结合JAK激酶结构域，抑制JAK1和JAK2的自磷酸化，从而负调控JAK-STAT信号传导。Gga-miR-130b导致SOCS5表达下降，随后增强STAT1、3 和 6 的mRNA 表达以及STAT1的磷酸化，随后激活I型IFN信号通路，该通路在宿主抗病毒反应中起主要作用（图 2）。除IBDV外，miR-130b也作为抗其他病毒的抗病毒因子，表明miR-130b作为治疗病毒性疾病的新型治疗靶点的潜力。类似地，据报道，gga-miR-454在IBDV感染的DF-1细胞中显著降低，并且miR-454的过表达极大地增强了IFN-β的表达，以及IRF3和p65的表达，从而抑制IBDV复制。有趣的是，在这项研究中，发现miR-454通过靶向SOCS6（JAK-STAT 通路的负调控因子），通过增强I型IFN反应来抑制IBDV复制。除了靶向细胞SOCS6，miR-454 还可以直接靶向IBDV B节段以抑制病毒基因组的转录（图 2）。此外，发现gga-miR-454在vvIBDV 基因组中的结合位点含有突变，而在大多数经典和低毒力IBDV毒株中相对保守。这一意外发现表明vvIBDV毒株可能进化，其基因组结合位点发生突变，以逃避宿主的免疫反应而生存；这也表明miR-454在宿主防御IBDV感染中的关键作用。然而IBDV诱导的gga-miR-454 表达抑制的潜在机制仍不清楚。Gga-miR-155是宿主对病原体感染反应中研究最广泛的miRNA之一，在宿主防御中发挥抗病毒作用。据报道，gga-miR-155可以通过靶向SOCS1和TANK（两者都是先天免疫反应中的负调控因子）来增强I型IFN信号传导，从而抑制 IBDV复制（图 2）；这表明miR-155是宿主免疫反应抵抗IBDV感染的重要抗病毒因子。我们实验室最近发表的一篇论文揭示了IBDV诱导的gga-miR-155表达上调的分子机制。研究发现，在IBDV感染时，DF-1细胞中GATA结合蛋白（GATA）3 的表达显著增加；这归因于细胞MDA5对病毒dsRNA的识别，随后启动TBK1-IRF7信号通路，从而促进GATA3表达（图 2）。磷酸化的GATA3易位到细胞核，在那里它直接结合gga-miR-155启动子，在IBDV感染或聚（I:C）处理的DF-1细胞中调节gga-miR-155的表达。GATA3属于GATA结合蛋白家族，通过直接启动或限制靶基因的转录在生理和病理过程中起关键作用；特别是，GATA3作为驱动Th2细胞分化的关键转录因子。此外，我们的数据显示，GATA3 通过促进gga-miR-155的表达来抑制IBDV复制，通过增强I型IFN表达来抑制 IBDV复制（图 2）。这些发现表明转录因子GATA3通过促进gga-miR-155表达在宿主抗病毒反应中起关键作用，这破译了在病原体感染的宿主细胞中特定 miRNA的表达是如何被调节的；而且，它们显著地进一步加深了我们对宿主在 RNA水平上抵抗IBDV感染反应机制的理解。研究发现，gga-miR-21 在IBDV感染的鸡细胞中增加，并且gga-miR-21通过直接靶向VP1 mRNA的 22nt 区域以阻断其翻译来抑制IBDV复制（图 2）。此外，VP1的这个22nt序列在IBDV毒株中是保守的，表明这个短序列对于IBDV复制中VP1的RNA依赖性RNA聚合酶功能很重要，这可能被用作新型抗病毒药物开发的潜在靶点。与上述miRNA类似，IBDV感染通过去甲基化 pre-miR-27b启动子区域增加了DF-1细胞中gga-miR-27b的表达，并且miR-27b可以通过靶向SOCS3和6（图 2），即JAK-STAT信号传导的负调控因子，上调IFN-β、IRF3 和NF-κB的表达来抑制IBDV复制。除了鸡之外，miR-27b 也在哺乳动物宿主抵抗病毒感染的免疫反应中起关键作用。例如，最近发现，miR-27b的抗病毒作用可以通过直接靶向猪SOCS6来抑制传染性胃肠炎病毒（TGEV）复制，而TGEV感染通过激活ER应激下调miR-27b 表达，从而剪接编码一种有效转录因子Xbp1的mRNA，该因子可以抑制miR-27b启动子的激活；这表明TGEV进化出一种策略来避免miR-27b的抗病毒作用。值得注意的是，miR-27b还可以抑制猪流行性腹泻病毒（PEDV）和猪轮状病毒（PoRV）的复制 。因此，miR-27b可能在宿主抵抗病毒感染的反应中充当广谱抗病毒因子。图 2. 非编码RNA在宿主对IBDV感染反应中作用的示意图。IBDV感染影响宿主细胞中非编码RNA的表达。非编码RNA通过直接靶向病毒基因组或参与免疫信号通路的宿主基因来抑制IBDV复制。Seg A：IBDV基因组A节段；Seg B：IBDV 基因组B节段；SOCS1：细胞因子信号传导抑制因子1；SOCS3：细胞因子信号传导抑制因子3；SOCS5：细胞因子信号传导抑制因子5；SOCS6：细胞因子信号传导抑制因子6；TANK：TRAF家族成员相关NF-κB激活剂；IRF7：干扰素调节因子7；IRF8：干扰素调节因子8；GATA3：Gata 结合蛋白3；MDA5：黑色素瘤分化相关基因5；TBK1：TANK 结合激酶1；IFN：干扰素。5.2 lncRNAs在宿主对IBDV感染反应中的抗病毒作用lncRNAs，长度>200 nt，分散在整个基因组中，通常以低水平和组织特异性方式表达，在许多细胞过程中发挥重要作用，如表观遗传控制、转录调控、翻译、RNA代谢、自噬、凋亡和胚胎发育。lncRNAs的亚细胞定位对其功能至关重要。在细胞质中，lncRNAs可以通过隔离miRNAs 来调节其活性和水平。与大多数 mRNA在物种间保持序列保守不同，lncRNAs通常保守性差，这使得评估 lncRNAs的功能更具挑战性。在许多疾病中，特别是在不同类型的癌症中，lncRNA表达水平的广泛失调凸显了理解lncRNAs功能和机制的必要性。最近，一系列证据表明lncRNAs在病毒感染中发挥作用]。在IBDV感染的鸡DCs中，总共检测到3900个lncRNAs；其中，25个被鉴定为上调，79个被下调，然后鉴定了222个共表达的lncRNAs/靶基因。使用信息学分析工具，发现那些差异表达的基因可能参与细胞对饥饿的反应、结合的负调控和凋亡过程的抑制。在同一项研究中，发现一些lncRNAs，如MYOZ1、TMEM130和UBE2QL1，在 IBDV感染组中显著增加，表明lncRNAs在宿主抵抗IBDV感染的反应中起重要作用。类似地，据报道，lncRNAs参与vvIBDV感染，并且在感染vvIBDV的鸡法氏囊中，172个lncRNAs上调，100个下调。后续实验表明，lncRNAs LOC107053928、LOC107054815、LOC107053352 和 LOC107053557 调节免疫调节相关基因，包括STAT1、STAT3、STAT4、TRIM25 和IFIH1，表明这些 lncRNAs可能在抗病毒反应中发挥重要作用。最近，发现在IBDV感染的DF-1细胞中，13个lncRNAs上调，35 个lncRNAs下调，并且loc107051710和IRF8 的基因对关系最密切。IRF8，一种主要在髓系细胞（包括巨噬细胞、单核细胞和树突状细胞）中表达的转录因子，是这些细胞发育和功能所必需的，特别是IRF8，它通过激活响应IFNγ/ PAMP信号的效应靶标，在巨噬细胞的抗菌防御中起关键作用。敲低loc107051710通过降低 IRF8（图 2）、I 型 IFNs（IFN-α 和 IFN-β）、STATs（STAT1 和 STAT2）和 ISGs（OAS、Mx1 和 PKR）的mRNA表达，显著增加了IBDV复制，表明loc107051710在宿主对病毒感染的反应中发挥抗病毒作用。到目前为止，只有少数研究，如上述所述，报道了lncRNAs在IBDV感染中的作用，并且获得的结果大多仅基于生物信息学分析。因此，需要更多的努力来阐明lncRNA-病毒相互作用的确切机制。5.3 circRNAs在宿主对IBDV感染反应中的抗病毒作用CircRNAs，一种由线性前体mRNA通过非经典剪接形成的具有共价闭合环的ncRNA，在真核生物中含量丰富且进化上保守。circRNAs的生物学功能，包括调节基因表达和翻译，以及通过与RNA结合蛋白（RBP）相互作用充当诱饵、转运蛋白或支架，已被很好地综述。重要的是，发现circRNAs也可以作为miRNA海绵，通过与各种miRNA结合来抑制其活性。一系列证据表明circRNAs在各种人类疾病中发挥作用，并且大多数与肿瘤进展或抑制相关。近年来，越来越多的研究报道circRNAs也参与病毒-宿主相互作用。在IBDV感染领域，只有一份报告显示了circRNAs的差异表达谱，表明 63个circRNAs上调，80个下调。使用生物信息学构建circRNA-miRNA-mRNA网络，发现circRNAs novel_circ_000574 和 novel_circ_001469在感染vvIBDV的鸡法氏囊中显著增加，并且它们可能通过分别结合miR-1587-x和miR-4507-y来靶向参与免疫相关基因的基因，包括STAT1和IRF7；这表明circRNAs在宿主对IBDV感染的反应中发挥作用。需要更多的努力来研究circRNAs异常景观的潜在机制以及circRNAs如何在宿主对IBDV感染的反应中发挥生理或病理作用。总之，ncRNAs参与宿主对IBDV感染的反应，其中miRNAs在此过程中研究得最好。MiRNAs在宿主对IBDV感染的反应中发挥抗病毒作用，主要通过两种方式：第一种是直接靶向病毒基因组以抑制病毒复制（gga-miR-130b→A 节段，gga-miR-454→B节段，和gga-miR-21→VP1 mRNA），第二种是通过靶向宿主细胞中抗病毒免疫反应的负调控因子来抑制IBDV复制（gga-miR-130b→SOCS5，gga-miR-454→SOCS6，gga-miR-27b→SOCS3 和 6，gga-miR-155→SOCS1，和 TANK）。然而，除了gga-miR-155之外，IBDV诱导这些miRNA差异表达的确切机制仍不清楚，值得未来进一步研究。至于lncRNAs和circRNAs，大多数出版物仅关注生物信息学分析，关于circRNAs和 lncRNAs 在宿主对IBDV感染反应中抗病毒作用的分子机制的研究非常有限，需要进一步努力。由于ncRNAs 的高丰度和多功能性，进一步全面研究它们在宿主对病毒感染反应中的作用将有助于制定有效控制IBDV感染的新策略。6结论尽管用于预防和控制鸡病的疫苗接种计划已在全球实施，但IBD的零星爆发仍然发生，表明IBD仍未得到很好控制，并继续威胁家禽业。因此，迫切需要开发更有效、更安全的疫苗用于IBD的临床控制。完全理解宿主抵抗IBDV感染反应的分子机制将对开发抗病毒策略有很大帮助。值得注意的是，开发新的佐剂以提高疫苗的免疫原性是保护鸡免受IBDV感染的有效替代方案，因为 chIL-2和chIL-7细胞因子是有效的生物佐剂，可增强IBDV DNA疫苗的免疫原性。在IBDV-宿主相互作用中，一些细胞蛋白通过不同的机制发挥抗病毒作用；例如，eIF4AII、NF45、CyPA 和TRIM25通过与病毒蛋白或复制复合物相互作用来抑制IBDV复制，而HSP90AA1、p62 和 SQSTM1通过与病毒蛋白或基因组相互作用来启动宿主自噬，随后诱导它们的自噬降解，从而抑制IBDV复制。研究 IBDV 感染过程中的宿主限制因子及其分子机制在未来将是不可或缺的，并受到高度鼓励。宿主非编码RNA在宿主防御IBDV感染和/或直接或间接调节IBDV感染中发挥重要作用，这可能为在RNA水平开发抗病毒疗法提供有价值的参考。例如，miR-130b可能作为鸡呼吸道疾病的抗病毒药物，因为鼻内递送 miR-130b模拟物给仔猪表现出强烈的抗PRRSV活性。宿主-IBDV 在RNA水平上的相互作用仍有许多问题需要解决，因为对IBDV感染宿主细胞中非编码 RNA的研究相当有限。尽管已知circRNA-miRNA-mRNA网络已通过生物信息学证明，但通过实验室研究进一步澄清和确认该网络将有助于理解宿主对IBDV 感染反应的精确调控机制。它也将对制定控制IBDV感染的有效措施有很大帮助。

　相信大家对病入膏肓这个成语非常熟悉，但是您知道“膏肓”这个词具体指的是什么吗？病入膏肓这个词对家禽疾病而言有什么具体的意义或者指导价值吗？本文将中国古老的哲学智慧与现代兽医病理现象联系起来，重新审视家禽中的“病入膏肓”现象。　　一、病入膏肓”的典故溯源　　“病入膏肓”典出《左传·成公十年》。晋景公病重，梦见疾病化为二竖子（两个小孩），藏于“膏之下，肓之上”，认为此地“攻之不可，达之不及，药不至焉”，是不可救治的绝地。　　古代医学解释：　　1、膏：指心脏下方的脂肪；肓：指心脏与横膈膜之间的薄膜。　　2、“膏肓”被视为心尖脂肪与膈膜之间的一个生理空隙，是药力难以抵达、气血运行薄弱的区域。　　3、一旦病邪盘踞于此，便意味着疾病已深入集体最核心、最隐秘、最难以干预的所在，再厉害的医生也是回天乏术。　　一旦出现了病入膏肓的现象，代表了疾病侵害的不再仅仅是四肢百骸，而是而是生命中枢（心）所在的区域，疾病从“可治”发展到“不可治”，象征着过程的终局性和不可逆转性。　　二、现代医学对应：“包心包肝”与心包积液的病理现实　　在家禽养殖中，“包心包肝”是一个典型的病理描述，主要指心包腔和肝脏表面积聚大量渗出液或纤维素性渗出物，在心脏和肝脏表面形成白色的包膜，常见于大肠杆菌病、鸭疫里默式杆菌等严重细菌性感染。　　1、“包心”：即心包积液/心包炎　　病原体突破防御进入血液循环（败血症），随血流到达心脏，引起心包膜的严重炎症。此时血管通透性增加，导致大量炎性液体（心包积液）渗出，包裹心脏；严重时形成纤维素性渗出，在心脏表面形成白色包膜。　　2、“包肝”：即肝周炎　　病原体到达肝脏，引起肝包膜的炎症和渗出，形成肝周积液或纤维素性覆盖。　　3、病理意义：　　功能障碍：心包积液会压迫心脏，严重影响其舒张和泵血功能，导致体循环和肺循环的淤血，导致心力衰竭以及全身循环衰竭。　　全身性感染的标志：“包心包肝”并不是单独的症状，而是败血症、全身性炎症反应在核心脏器的集中体现，它意味着感染已失控，遍布全身。　　三、哲学与科学的交融：对心包积液的重新诠释　　将“病入膏肓”的哲学框架，套用在“心包积液”这一科学事实上，我们可以得出以下深刻理解：　　1、哲学上的“膏肓之地” ≈ 科学上的“免疫豁免与生命中枢”　　古代视角：“膏之下，肓之上”是药力达不到的生命核心区。　　现代视角：心包腔和腹腔本身是一个相对封闭的生理空间，正常情况下是无菌的，且有浆膜保护。一旦病原体突破屏障（如呼吸道屏障、肠道屏障）进入此核心区域，身体的免疫大军（药物、免疫细胞）虽能到达，但严重的炎性反应本身就会对核心脏器造成致命压迫和损伤。这正应了“攻之不可，达之不及”的困境——治疗本身可能加速死亡。　　2、哲学上的“不可逆” ≈ 科学上的“全身多器官功能衰竭的临界点”　　古代视角：病入膏肓，不可救治。　　现代视角：当出现典型的“包心包肝”时，家禽的病情往往已经历了从局部感染→菌血症→败血症→全身炎症反应综合征→多器官功能衰竭的完整过程。心包和肝脏的病变，是这个死亡链条上的终末环节。此时，不仅心脏和肝脏功能严重受损，肺、肾等器官也已牵连受累。此时进行任何的治疗已无法扭转整个系统的崩溃。　　四、 哲学警示“防微杜渐” ≈ 科学管理“生物安全与早期干预”　　古代智慧：良医治病，“不治已病治未病”。病入膏肓的教训在于，必须在疾病萌芽阶段就进行干预。　　现代实践：“包心包肝”的出现，根本原因在于整个养殖过程中的管理漏洞：通风不良、温湿度控制不佳，密度过大、水源污染、免疫抑制病的存在等。这些因素削弱了家禽的“正气”（免疫力），让病原体有机会“由表入里”，直捣黄龙。因此需要我们做好以下工作：　　1、筑牢“生物安全”的城墙：这是最便宜、最有效的手段，是疾病防控的第一道防线。严格的人员、车辆、物资消毒，杜绝外来病原入侵。　　2、做好“环境管理”的内功：良好的通风、温度、湿度、密度的控制，可以为肉鸭提供舒适的环境，极大降低鸭群的应激，提升自身免疫力。　　3、执行“精准防控”的策略：根据当地流行病学、季节变化和鸭群日龄，制定科学的免疫程序和预防性保健方案。根据鸭群变化情况进行精准用药，避免疾病发展到包心包肝的阶段。　　4、练就“明察秋毫”的慧眼：饲养员要需要每天多次巡栏，观察鸭群的精神状态、采食饮水、粪便颜色等最细微的变化。发现第一只表观异常的病鸭，立即处理，就是成功的一半。　　五、总结　　心包积液（“包心包肝”）这一家禽常见疾病，正是“病入膏肓”这一古老成语在现代集约化养殖中的生动科学映照。　　从科学角度看，它是全身性败血症的病理标志，是免疫系统崩溃、核心脏器受损的直接证据。　　从哲学角度看，它揭示了量变到质变的生命规律，警示我们任何疾病的发生都不是一天造成的，疾病发展是有过程的，不要忽略在养殖中发现的轻微异常。　　因此，对于养殖者而言，观察到家禽出现“包心包肝”，不应仅仅视为一个需要治疗的“病症”，更应将其解读为一个沉重的哲学警示：整个养殖系统的健康管理已经出现了严重问题，必须从根源上（生物安全、环境控制、精准防控等）进行管理，方能避免整个群体走向“膏肓”之路

摘要：为了解我国新出现的禽副黏病毒14型（APMV-14）的基因组特性，对2022年从我国家禽中新分离到的2株APMV-14毒株进行了基因组测序和序列分析。结果显示：两株毒株基因组长度均为15 444 nt，结构均为3'-N-P-M-F-HN-L-5'，3'前导序列和5'尾随序列长度分别为55和277 nt，各基因间隔序列长度不等（2~36 nt）；2株毒株F蛋白裂解位点均为99REGR↓L103，具有低致病性禽副黏病毒分子特征；2株毒株HN蛋白长度均为607 aa，明显长于2011年日本分离株APMV14/duck/Japan/11OG0352/2011（580 aa）。同源性分析显示，我国分离的2株不同宿主来源的APMV-14毒株基因组核苷酸同源性为99.5%，与APMV-14代表株11OG0352同源性最高（91.0%），与其余禽副黏病毒同源性仅为45.0%~52.3%；遗传进化分析显示，2株APMV-14毒株与日本APMV-14分离株（11OG0352）位于同一分支。综上所述，本研究中的2株来源于不同宿主（鸡和鸭）的APMV-14毒株基因组序列高度同源，说明APMV-14已具备水禽—陆禽的跨种传播能力。本研究为APMV-14生物学特性等相关研究奠定了基础。禽副黏病毒（Avian Paramyxovirus，APMV）在分类地位上属于副黏病毒科禽腮腺炎病毒亚科，主要包括3个病毒属，即正禽腮腺炎病毒属、副禽腮腺炎病毒属和偏禽腮腺炎病毒属。目前已鉴定的APMV至少包括21种血清型，分别为APMV-1~21。其中，APMV-1、APMV-9、APMV-12、APMV-13、APMV-16~19和APMV-21属于正禽腮腺炎病毒属，APMV-2、APMV-5~8、APMV-10、APMV-11、APMV-14、APMV-15和APMV-20属于偏禽腮腺炎病毒属，APMV-3和APMV-4属于副禽腮腺炎病毒属。APMV是一种有囊膜的单股负链RNA病毒，基因组长为1.3万~1.7万核苷酸（nucleotide，nt），可感染多种野鸟和家禽。APMV-1~9出现于20世纪80年代前，2005—2015年又在多种野鸟和企鹅中陆续分离到APMV-10~21，其中2011年在日本野鸭中首次分离到APMV-14，至2021年未见有关分离到APMV-14毒株的其他报道。目前，我国流行的APMV主要为APMV-1，即新城疫病毒。近年来，在我国家禽和野鸟中也分离到APMV-2、APMV-4和APMV-6等毒株。2022年，在我国福建省鸡群和江西省鸭群中各分离到1株APMV-14。为了解我国家禽中APMV-14分离株的基因组特性，本研究对2株APMV-14分离株进行了基因组测序和序列分析，以期为APMV-14生物学特性等相关研究奠定基础。材料与方法病毒chicken/Fujian/1013/2022（FJ1013）和duck/Jiangxi/1232/2022（JX1232），均在新城疫监测中被分离到，分别分离自福建省和江西省活禽市场采集的临床健康家禽口咽/泄殖腔拭子样品，由中国动物卫生与流行学中心禽病监测室保存。病毒繁殖将病毒液经尿囊腔接种9~11日龄SPF鸡胚（购自山东济南斯帕法斯家禽有限公司），0.2 mL/枚，每个样品接种5枚鸡胚；接种后37 ℃条件下孵育，18 h后每12 h照胚1次，记录鸡胚死亡情况；收集18 h后的死胚及96 h仍存活鸡胚，无菌收取鸡胚尿囊液，并测定病毒血凝（HA）效价。RNA提取和病毒基因组扩增利用High Pure Viral RNA Kit（Roche）提取病毒核酸，立即用于RT-PCR扩增或置-20 ℃保存备用。按照Primescript One Step RT-PCR Kit Ver.2（TaKaRa）说明书配置反应体系，分段扩增病毒基因组序列，基因组扩增引物见表1。利用SMARTer RACE 5'/3'试剂盒（Clontech）扩增病毒基因组5'和3'末端。RT-PCR产物送青岛睿博兴科生物科技有限公司测序。序列分析利用Lasergene软件拼接和编辑基因组序列，分析病毒基因组结构和基因组核苷酸序列同源性，利用MEGA软件分析F、HN蛋白关键氨基酸位点。遗传进化分析从GenBank中下载APMV-1~21代表株序列，利用MEGA软件进行遗传进化分析，采用邻位相连法（neighbor-joining）构建基因组遗传进化树，bootstrap设置为1 000次重复。结果APMV-14分离株信息2022年从我国福建省鸡群和江西省鸭群各分离到1株APMV-14，2株毒株均可在鸡胚中有效复制。病毒相关信息见表2。基因组序列分析2株毒株基因组长度均为15 444 nt，基因组结构均为3'-N-P-M-F-HN-L-5'，遵循“六碱基原则”；分离株3'前导序列和5'尾随序列长度均分别为55和277 nt，N、P、M、F和HN基因5'非转录区（untranslated region，UTR）均长于3'UTR，L基因3'UTR长于5'UTR，基因间隔区（intergenic sequence，IGS）长度为2~36 nt（表3）；各基因起始序列较保守，只有1个碱基差异，终止序列存在1~3 nt的差异（表4）。2株毒株F蛋白长度为541个氨基酸（amino acid，aa），与日本分离株11OG0352一致，F蛋白裂解位点为99REGR↓L103，具有低致病性禽副黏病毒的典型分子特征；F蛋白有5个潜在N-糖基化位点，分别位于73、180、433、457和483位；HN蛋白长度均为607 aa，长于日本分离株11OG0352（580 aa）；HN蛋白有7个潜在N-糖基化位点，分别位于119、148、278、346、377、390和584位。基因组核苷酸同源性分析从GenBank中下载APMV-1~21代表株各1株（表5），与我国分离的2株APMV-14进行基因组核苷酸序列同源性分析。结果（表6、图1）显示：我国分离的2株毒株高度同源（99.5%），与APMV-14代表株基因组同源性最高（91.0%），与其6个基因片段同源性为87.7%~92.0%；2株分离株与APMV-3同源性最低（45.0%），与其余APMV的核苷酸同源性为45.3%~52.3%。遗传进化分析病毒基因组遗传进化分析结果显示，我国分离的2株毒株与日本分离株（11OG0352）位于同一分支，均属于APMV-14型（图2）。讨论野鸟被认为是禽流感病毒、新城疫病毒等多种禽病病毒的贮存宿主。近年来，从野鸟中也分离到多种APMV，其中全球首株APMV-14毒株分离自日本野鸭粪便样本。从我国福建省和江西省分离的2株APMV-14毒株均来自家禽；但由于缺乏野鸟APMV-14监测数据，暂不清楚我国家禽中APMV-14的确切来源。目前，全球主要有8条候鸟迁徙路线，其中3条从我国经过，分别为东非—西亚迁徙线、中亚—印度迁徙线和东亚—澳大利亚迁徙线，每年从我国过境的候鸟种类和数量约占迁徙候鸟的20%~25%。福建省和江西省具有良好的生态环境和丰富的湿地资源，每年冬春季节都会吸引大量湿地水鸟前来越冬。湿地水鸟的大量迁徙可能会增加其与家禽接触的机会，进而导致APMV-14传播。因此，建议加强养殖场的生物安全管理，避免野鸟与家禽接触。APMV-14为单股负链RNA病毒，基因组由6个基因片段（N、P、M、F、HN、L）组成。本研究中的2株毒株基因组长度均为15 444 nt，与日本分离株11OG0352相同。虽然我国分离的2株毒株与日本APMV-14分离株（11OG0352）属于同一进化分支，但基因组核苷酸同源性仅为91.0%，且存在多处氨基酸差异。我国分离的2株毒株F蛋白裂解位点序列为REGR↓L，与日本分离株11OG0352存在1个氨基酸差异（REGK↓L）；HN蛋白长度为607 aa，明显长于日本分离株（580 aa）。研究显示，APMV-1 HN蛋白的长度与病毒毒力相关；而HN蛋白长度是否会影响病毒的生物学特性，还需进一步研究。2011年在日本野鸭粪便样本中首次分离到APMV-14后，10年内未见有分离到APMV-14毒株的其他报道。2022年，中国动物卫生与流行学中心禽病监测室分别于鸭和鸡的口咽/泄殖腔拭子样品中分离到2株APMV-14毒株。这2株毒株虽然宿主来源不同，但基因组核苷酸序列同源性高达99.5%，说明APMV-14已具备从水禽跨种传播至陆禽的能力。据推测，在分离到这2株毒株之前，我国野生水鸟和家禽中可能就已存在APMV-14流行。因此，今后还需要加强野鸟和家禽的APMV-14监测及其跨种传播机制研究。《我国新出现的禽副黏病毒14型基因组特性》详情请点击“阅读原文”。

在所有的品种中，白羽肉鸡的通风难度最大。一方面其体重每天都在快速增加，对应的最小通风总量也在增加。另一方面，肉鸡抵抗力较差，通风换气稍有不慎，很容易出现受凉或者热应激等重大风险。而在肉鸡不同的养殖模式中，又以地面垫料养殖难度最大，网架和笼养肉鸡次之。因此肉鸡养殖尤其是地面垫料的肉鸡养殖要求最高，难度也最大。1年四季中，又以冬春和秋冬季节交替时难度最大。1、关于冬季最小通风的几个参数：目前国内有两个参考的参数，0.6CFM(0.0168m³/公斤体重.分钟)和根据常数0.0155m³/公斤体重.分钟。这里需要考虑到中国养殖环境的污染情况，与国外相比差距还是比较大的。因此现场在使用通风参数时，需要考虑这一点。国外由于病毒环境污染较轻，其一般推荐大通风模式。其目的一方面是换气，更重要的是给鸡提供充足的氧气，来提高生产性能。而中国的问题比较特殊，如果采用大通风模式，很容易出现受凉的风险。在发病和提升生产性能两者取其轻的话，还是以减少流感传支等传染性发病为主。目前国内部分公司最小通风采取在推荐的参数基础上打50%-70%的折扣。2、冬春、秋冬季节通风的目标管理：首先考虑需氧量，然后再考虑相对湿度，最后考虑温度。(1)需氧量一般非常容易满足，有部分学者测算过，按照国外推荐的最小通风参数，如果仅仅是提供氧气的话，1/5的通风量就足够了。最小通风量其实更多的目的是为了带走鸡舍内的水分，即现场操作中，更重要是相对湿度指标。(2)相对湿度是肉鸡饲养管理中极其重要的一个指标，是观察最小通风是否合理的最重要的一个指标，尤其是对于地面肉鸡养殖模式。为什么相对湿度很重要?主要是相对湿度可以决定垫料的质量，影响氨气的量，相对湿度过低容易造成灰尘太多，而相对湿度过大，叠加温度偏高时，又容易造成热应激的问题。因此相对湿度在冬春、秋冬季节是极其重要的。一般要求控制在50-70%之间是比较合理的。对于在部分养殖公司存在人工加湿的做法，我们一般不建议这样做。人工加湿以后，一方面会掩盖真实的垫料质量，另一方面也会造成对通风指标失灵的问题。有的公司就存在这边大通风，结果造成垫料干燥，空气干燥灰尘增加。然后又采取人工加湿喷雾的做法，表面看相对湿度达标了，但其实掩盖了很多真实的问题。在冬春季节或者秋冬季节当发现鸡舍内相对湿度偏低时，正确的做法应该是适当降低最小通风量来提高相对湿度。这样做的好处，一方面可以节约能源。更重要的一个好处是减少受凉的风险。冬春、秋冬季节最大的问题在于外界温度变化快，而且幅度大。如果在此时采用大通风模式，在外界温度快速下降时，鸡群很容易出现受凉的问题。(3)温度的目标管理可以放到最后。30日龄以前允许鸡群实际温度可以超温(比如个别时段中午是实际温度可以超过目标温度5℃)，但不允许低于目标温度，要合理使用加热器进行升温。当鸡舍实际温度超过目标温度时，此时一般都是外界温度相对较高造成的。此时可以适当增加风机通风的时间，增加通风级别，但不能风机常转。可以一个时间周期最大转70%，停30%。同时最大风机个数要有所限定，防止多台风机进行激进降温。当出现超温时，如果前期相对湿度控制的比较合理的话，一般也不会有太大问题。养殖现场出现问题往往都是高温以后，短时间内进行剧烈的大通风降温，反而容易出现受凉感冒的现象。3、再谈通风控制与肉鸡“支气管堵塞”预防和控制的基本思路：由于我国养殖密度大，鸡场生物安全不甚合理，造成病毒性传染病感染发病严重。像禽流感H9、传支等疾病，对“受凉”等冷应激是非常重要的发病诱因。因此在通风过程中，如何避免这种情况，是肉鸡养殖非常重要的管理目的。其中春秋季节鸡舍环境最难控制，中午可能是温控通风模式，晚上就变成最小通风模式。肉鸡通风上的难点就在于这里，尤其在3-5月份时。随着鸡日龄越来越大，对温度的要求是越来越低的。但外界温度却是越来越高，导致通风上的平衡点最难把握。通风量过小，鸡群容易出现热应激的问题，氨气和湿度偏大。但通风量过大，则容易出现冷应激受凉的问题，再叠加病毒感染变得更危险。很多肉鸡场出现问题也往往在这个季节最多。通过我们多年来的观察体会，在这个季节28日龄以前的温控通风(当鸡舍实际温度超过目标温度以后)应保守一些，一旦发现鸡舍内相对湿度过低(比如小于40%以下)，就要考虑适当减缓增加甚至适当降低通风级别的做法。可以允许舍内温度有一定的波动区间，这个季节由于外界温度下降很快，短时间热应激的危害比夏天要小的多。另外短时间内激进的加大通风量降温，一方面容易导致鸡舍温湿度下降，造成鸡群体感温度短时间内大幅度降低。另一方面短时间内大量冷空气进入鸡舍，容易出现冷热空气混合不均匀，造成鸡群受凉的风险增加。总之，这个季节的通风还应该保持最小通风，换气为主，适当辅助进行温控通风。4、常见的肉鸡几种通风操作误区：①不要出现“一边加热、一边大通风”的低级错误。既浪费燃料，鸡群还容易受凉。关于春秋季节保守通风的做法：注意是指温控通风要保守，最小通风的参数可以根据鸡群情况来灵活调整。②关于保守通风的常见做法：有的鸡场管理人员喜欢采用上调通风控制系统(如AC2000)中目标温度(1-2℃)的做法来变相降低通风量。这种做法只适合于微调和临时应急，但不宜长期采用。目标温度的设定应尽量保持稳定。当通风量偏大时，调整的应该是风机参数而不是调目标温度。③建议10日龄以后尽量不要参考人工喷雾加湿的做法，一方面容易造成相对湿度参考指标失灵的问题，另一方面如果喷雾不当的话，也会带来冷应激的风险。④肉鸡的通风一方面确实需要标准化，但更重要的还要根据鸡群的实际情况、外界温湿度的情况等因素，要灵活的调整通风参数。驻场生产管理人员的作用就体现在这里，既不能生搬硬套，还要根据鸡群状态及时预判性的进行微调、预调。

禽流感病毒（AIV）因其传染性以及对家禽、鸟类和人类健康的破坏性影响而持续引发关注。禽流感病毒的基因组包含8个基因片段：血凝素（HA）、神经氨酸酶（NA）、基质蛋白（M）、核蛋白（NP）、非结构蛋白（NS）、酸性聚合酶（PA）、碱性聚合酶1（PB1）和碱性聚合酶2（PB2）。流感病毒根据其HA和NA蛋白的抗原性分为不同亚型。目前，在禽类中已鉴定出16种HA 亚型和9种NA亚型。高致病性禽流感病毒（HPAIV）是一种以鸟类为主要宿主的病毒，具有高发病率和死亡率，可导致家禽和人类死亡。此外，低致病性禽流感病毒（LPAIV）毒株感染后不会直接影响家禽和健康人类，但家禽感染后若未得到控制且持续存在，也会产生不良后果。更令人担忧的是，低致病性禽流感病毒可能会将内部基因水平转移给高致病性禽流感病毒，从而增强其毒力和致病性 。大规模疫苗接种是控制禽流感疫情和减轻禽流感病毒引起的严重症状的最有效方法之一。由于禽流感疫情的复杂性，中国严格执行扑杀和生物安全措施，同时将大规模家禽疫苗接种作为快速缓解严峻形势的合理替代策略。中国政府为家禽养殖户免费提供禽流感病毒疫苗。在中国实施的大规模疫苗接种策略取得了巨大进展。2006-2013年在中国北方散养家禽中广泛流行的 H5 分支7.2，自2014年使用相应疫苗后已基本消除，且未再被检测到。尽管大规模疫苗接种策略成效显著，但免疫逃逸仍时有发生，因此禽流感疫情尚未得到完全控制。科学家们担心，在免疫压力下，高抗体水平会加速病毒突变和多样化，从长远来看会导致疫情形势更加复杂。HA 蛋白在病毒结合宿主细胞表面受体方面起着关键作用，从而介导宿主细胞与病毒膜的融合。然而，抗HA 的抗体通过干扰病毒与受体的结合来阻断这一过程，进而阻断下游过程。NA 蛋白可防止流感病毒颗粒在细胞表面积累，并参与病毒释放，从而促进进一步感染。HA和NA蛋白均具有免疫原性，可在受感染动物中诱导体液免疫应答。这些蛋白在不同病毒之间差异最大，是抗原漂移（即氨基酸变化逐渐积累，最终降低抗体识别能力并导致免疫逃逸）的重要原因 。因此，研究工作集中在改进疫苗和开发新的疫苗平台，以实现对潜在大流行性禽流感病毒的有效保护。开发一种能完全预防禽流感病毒感染的高效疫苗是一项具有挑战性的任务。理想的禽流感疫苗应满足以下要求：生产成本低且可大规模应用、适用于多种禽类、能区分感染禽和免疫禽、与流行病毒株抗原性接近、单剂接种可提供持久保护、在母源抗体存在时能诱导保护性免疫应答。尽管已开发出多种形式的疫苗来预防流感病毒，包括传统疫苗和新型疫苗（图1），但目前没有一种疫苗能满足所有这些标准。下面是对传统和下一代平台的各类禽流感疫苗进行的评估。图 1. 传统流感疫苗与下一代流感疫苗的优缺点。流感病毒疫苗的研发基于完整病毒颗粒、表面蛋白、核蛋白、病毒基因组以及减毒病毒等策略。1. 灭活疫苗Science & Technology中国最广泛使用的AIV疫苗形式，采用鸡胚培养技术生产。为克服鸡胚传代导致的抗原变异，可采用MDCK或Vero细胞系培养病毒。β-丙内酯灭活能更好保持病毒抗原结构，相比甲醛灭活可诱导更强的CD8+ T细胞应答。中国已通过反向遗传学技术开发了系列H5亚型灭活疫苗种毒（表1），如针对2.3.4.4b分支的Re-14株等。注：HA 代表血凝素。缩写：GS—— 鹅；CK—— 鸡；DK—— 鸭；WS—— 大天鹅；GD—— 广东；SX—— 山西；AH—— 安徽；LN—— 辽宁；GZ—— 贵州；FJ—— 福建。2. 活疫苗Science & Technology包括减毒活疫苗和病毒载体疫苗。美国等国家使用冷适应减毒活疫苗，通过鼻腔接种诱导黏膜IgA和系统IgG应答。中国家禽业主要采用：禽痘病毒载体疫苗：可提供异源H7病毒交叉保护；新城疫病毒载体疫苗：已在中国使用40亿剂次；火鸡疱疹病毒载体：克服母源抗体干扰，提供持久免疫。3. 病毒样颗粒（VLP）疫苗Science & Technology病毒样颗粒（VLP）疫苗作为禽流感病毒疫苗开发的潜在候选者备受关注 。病毒样颗粒是自组装的非感染性颗粒，表明这些疫苗具有较高的安全性。这些颗粒可通过细菌、酵母、昆虫和动物细胞系等不同表达系统生产，由于其免疫原性特征，可用作疫苗开发中的颗粒载体或抗原。此外，它们具有与原始病原体相当的特征，例如相似的大小、重复的表面几何结构，以及刺激抗原呈递细胞（APCs）（特别是树突状细胞（DCs））以及诱导体液和细胞免疫应答的能力。因此，宿主的免疫系统可以以与完整的灭活病毒疫苗相同的方式识别病毒样颗粒疫苗，从而产生强烈的免疫应答。基于病毒样颗粒疫苗已广泛用于流感疫苗的开发，并在提供免疫保护方面取得了令人鼓舞的成果。研究表明，由三种流感病毒蛋白（包括 HA、NA 和基质蛋白 1（M1））组成的 H5N1、H3N2 和 H9N2 病毒样颗粒疫苗可在昆虫细胞中表达并组装成病毒样颗粒。Hu等人使用杆状病毒表达系统构建了一种二价 H5+H7 病毒样颗粒疫苗，该系统可表达HA、NA和M1蛋白。二价病毒样颗粒疫苗和商业灭活疫苗均诱导了有效的免疫应答，包括产生抑制血凝、中和病毒和靶向HA的抗体。与商业灭活疫苗相比，二价病毒样颗粒疫苗在减少鸡的病毒脱落和复制方面效果显著。此外，二价病毒样颗粒疫苗在减少H7N9 病毒感染引起的鸡肺部病变方面优于商业疫苗。4. 通用疫苗Science & Technology禽流感病毒的HA和NA蛋白突变率高，因此疫苗的种子病毒也需要相应改变以匹配流行的流感病毒。因此，开发一种能诱导长期免疫应答并提供针对多种不同病毒株保护的通用流感疫苗至关重要。通用疫苗的开发工作主要依赖于保守的保护性表位。有前景的通用疫苗候选者包括细胞外基质蛋白2（M2e）、HA茎部、HA的受体结合位点（RBS）以及M1和核蛋白（NP）中的一些细胞毒性 T淋巴细胞（CTL）表位。5. DNA疫苗Science & Technology典型的 DNA 疫苗是将编码抗原的基因插入非复制型真核表达质粒载体中，通过直接基因转移递送至宿主。然后，宿主细胞表达质粒编码的抗原蛋白，并通过主要组织相容性复合体（MHC）途径呈递给免疫细胞。DNA疫苗诱导的免疫应答是Th1型免疫应答，其中针对DNA疫苗的细胞介导的免疫比体液免疫更普遍 。先前的一项研究表明，DNA疫苗的作用机制模拟了病毒的细胞发病机制 。抗原蛋白在细胞内被蛋白酶体消化成更小的肽段。这些肽段随后由MHC I类分子呈递，以诱导抗原特异性CD8+T细胞应答。此外，这些肽段也由MHC II类分子呈递，以激活 CD4+T 辅助细胞，进而触发活化的B细胞产生抗原特异性抗体。早期研究表明，编码HA基因的DNA疫苗可根据HA特异性血清抗体水平的升高来保护家禽免受致命的同源攻击。要有效抵抗鸡中高致病性禽流感病毒的攻击，DNA疫苗的质粒DNA剂量约需200-400μg。这种高剂量免疫要求是此类疫苗在田间应用的主要障碍。另一方面，抗原在宿主中的有效表达是DNA疫苗的关键。基于宿主物种的密码子偏好性，可以调节抗原编码序列以提高表达效率。这种策略可通过提高抗原基因的表达来减少DNA疫苗的剂量。接种密码子优化的HA质粒的动物比接种野生型HA质粒的动物抗体滴度高4倍，从而在病毒攻击试验中具有更高的存活率。6. mRNA疫苗Science & Technology目前，mRNA疫苗可分为两大类：常规的非扩增mRNA分子和源自RNA病毒载体、具有自主复制活性的自扩增mRNA（saRNA）。非复制型mRNA疫苗可通过掺入各种修饰的核苷来生产。saRNA疫苗可以多种形式递送，包括病毒样RNA颗粒、质粒DNA和体外转录的RNA。7. DNA疫苗的递送策略Science & Technology近十年来，DNA疫苗的递送策略一直是研究的热点领域。有效的DNA疫苗需要能够进入宿主细胞并实现蛋白质表达，此外，这种疫苗还必须能够提醒免疫系统其存在并诱导免疫应答。有文献指出，接种裸DNA疫苗后，质粒DNA会迅速从注射部位迁移并降解，因此在小鼠中，8小时后仅能偶尔检测到质粒DNA。研究人员一致认为，将DNA直接递送至抗原呈递细胞提供了一种潜在的疫苗递送系统。然而，将质粒DNA疫苗有效递送至细胞核需要跨越多个障碍，包括通过内吞作用或胞饮作用穿过磷脂细胞膜、在内涵体和溶酶体中应对降解、在胞质核酸酶中存活、跨核膜转运，以及最终实现抗原蛋白表达。因此，DNA疫苗递送系统的关键点在于克服这些生物障碍，靶向免疫细胞，并将质粒安全递送至细胞的细胞核以进行蛋白质表达。已尝试多种策略来提高DNA疫苗的递送效率，包括聚合物、脂质体、活细菌等。此外，在新冠肺炎疫苗开发之后，脂质纳米颗粒（LNPs）的疫苗潜力在 DNA 疫苗递送方面受到关注。此外，基因枪作为一种机械递送装置，可将大分子导入靶细胞，也已用于DNA疫苗递送。7.1. 聚合物递送系统聚合物已广泛用作组织工程、基因治疗和DNA疫苗接种等应用中的递送系统。聚合物可将DNA材料包装成纳米颗粒和微米颗粒，以防止核酸酶的破坏，并允许可调节的降解和控制释放。此外，这种颗粒结构易于被免疫细胞捕获。如今，多种聚合物已被探索用于DNA疫苗开发（图2）。图 2. 基于聚合物的 DNA 疫苗递送设计。聚合物可由来源于生物体的单体单元或人工合成的单体单元制成，包括壳聚糖、聚乳酸 - 乙醇酸共聚物（PLGA）、聚乙烯亚胺（PEI）、多肽以及其他非离子嵌段共聚物。聚合物可通过络合或包封作用保护 DNA 免受降解，并将其递送至宿主细胞以诱导免疫应答。聚乳酸-乙醇酸共聚物（PLGA）已被用于包装和递送针对多种动物疾病的 DNA疫苗，如流感、口蹄疫病毒（FMDV）和寄生虫感染。将DNA疫苗包装到聚乳酸-乙醇酸共聚物中可增强全身性、抗原特异性抗体和T细胞增殖应答。此外，据报道，DNA包被的聚乳酸-乙醇酸共聚物微颗粒可增强DNA疫苗向抗原呈递细胞的递送。然而，尽管使用聚乳酸-乙醇酸共聚物递送DNA已被发现可诱导免疫应答，但仍存在一些问题，包括在包封过程中DNA降解以及由于微米尺寸导致的转基因表达较低。因此，研究人员开发了一种使用乙二醇壳聚糖外壳的改良聚乳酸-乙醇酸共聚物纳米颗粒，用于双活细胞追踪和DNA疫苗递送。这些颗粒可直接转染朗格汉斯细胞，增强基因转录和表达。因此，聚乳酸-乙醇酸共聚物纳米颗粒促进DNA迁移至淋巴结以及初始B细胞和T细胞的活化。聚乙烯亚胺（PEI）是另一种广泛用于DNA疫苗递送的聚合物。聚乙烯亚胺在DNA疫苗递送中的应用已得到充分研究，并有报道称可改善H1N1 DNA疫苗的体液应答。然而，DNA / 聚乙烯亚胺复合物存在毒性问题、在血清蛋白存在下聚集以及从循环中快速清除等问题，导致DNA递送效率有限。为克服这些问题，使用γ- 聚谷氨酸修饰DNA / 聚乙烯亚胺复合物，通过降低复合物的表面电荷，减少聚集并提高在生理环境中的稳定性。γ- 聚谷氨酸由某些杆菌菌株产生，据推测可通过与免疫细胞的受体相互作用充当佐剂。一些天然材料也被研究用于其他生物应用，包括基因递送，因为它们具有固有的生物相容性、无毒性、生物降解性、稳定性、生产成本低和免疫刺激等特性。例如，菊粉、透明质酸、藻酸盐以及壳聚糖在疫苗递送领域引起了关注。壳聚糖是来自甲壳的几丁质的部分脱乙酰化形式，已被充分研究用于DNA疫苗递送。壳聚糖必须在弱酸性环境（pH<5）中溶解；这种特性使其适合化学修饰，从而改变溶解度和电荷，使其适用于各种应用。此外，壳聚糖已被确定为一种无毒且生物相容性材料，因此其使用已获得美国食品药品监督管理局的批准。固定在壳聚糖包被的微球（20至50μm）中的质粒DNA可诱导黏膜和全身性免疫应答。

7.2. 脂质体递送系统20 世纪 60 年代，脂质体首次被发现并用于提供研究生物膜的模型。所有脂质体都有一个共同特征，即它们是头部带有阳离子基团的两亲分子。经过持续研究，脂质体的优点是负载能力高、生物降解性好、安全性更高，以及生产相对简单且成本低 。此外，脂质体可根据模块化原则进行设计，因此可修饰结构、连接体和亲脂区域以获得更高的递送效率。脂质体主要有四种类型，包括常规脂质体、聚乙二醇修饰的脂质体（PEG化）、配体靶向脂质体和抗体修饰的脂质体（图3）。图 3. 不同类型脂质体递送系统的示意图。（A）传统脂质体：脂质体由脂质 bilayer 组成，可由带正电、带负电或中性的脂质构成，其中包裹着水核。（B）聚乙二醇化脂质体：脂质体表面可通过添加聚乙二醇进行修饰，以实现空间稳定。（C）配体靶向脂质体：脂质体表面可通过添加配体进行修饰，以实现特异性靶向递送。（D）抗体修饰脂质体：抗体（单克隆抗体、纳米抗体、Fab 片段和单链抗体片段）可附着在脂质体表面。常规脂质体是第一代脂质体，由阳离子、阴离子或中性脂质组成的脂质双层构成。为增强脂质体稳定性并延长其在生物体内的循环时间，通过聚乙二醇修饰引入了空间稳定的脂质体。此外，配体靶向脂质体在将DNA疫苗定点递送至特定细胞类型（尤其是选择性表达或过表达特定表面配体的抗原呈递细胞）方面具有相当大的潜力。有多种类型的配体可用，包括肽、蛋白质和小分子。抗体，特别是单克隆抗体（mAb）、纳米抗体以及可固定在脂质体表面的抗体的抗原结合区，是用途更广的配体之一。脂质体形成球形囊泡，其结构由磷脂和胆固醇排列成脂质双层，允许与细胞膜融合。质粒DNA可隔离在脂质体双层上或包裹在脂质体囊泡内。脂质体作为DNA疫苗递送载体的应用引起了极大关注，因为它们能够产生尺寸可控的实体、允许载体定制，并能引发先天免疫受体的活化。脂质体能够产生亚微米级颗粒，有助于掺入大量DNA，从而防止DNA因阴离子竞争而置换。这一特性确保大量 DNA 被有效包裹在脂质双层中。在疫苗制剂中，脂质体能够调节组织中的局部分布、增强在注射部位的保留，并调节细胞运输。用脂质体制备的疫苗具有多种优势，包括促进抗体产生增强和细胞毒性T淋巴细胞（CTL）应答。然而，需要注意的是，脂质体引发的免疫应答的具体特征因脂质组成、颗粒大小、表面电荷和包裹抗原的位置等因素而异。7.3. 活细菌递送系统用于DNA疫苗递送系统的细菌是经过基因修饰的重组细菌，确保其大部分致病性成分已被删除，从而保证宿主的安全。作为DNA疫苗递送系统，细菌分为两大类：非致病性细菌和减毒的致病性细菌。已研究用于DNA递送的减毒细菌包括单核细胞增生李斯特菌、沙门氏菌属、志贺氏菌属和小肠结肠炎耶尔森氏菌。致病性细菌以黏膜作为其感染途径，因此适合黏膜给药。然而，主要缺点是可能引起感染。因此，非致病性细菌如乳酸菌可能更适合开发为DNA疫苗递送系统。乳酸菌是用于DNA疫苗递送工程改造的优良候选者。自古以来，它们就被用于食品发酵，并且通常被认为是安全的生物体。几种乳酸菌菌株被认为是益生菌，可通过抑制病原体在胃肠道中的定植来增强对病原体的免疫应答，并促进黏膜免疫系统 。图 4. 利用活菌将 DNA 疫苗递送到哺乳动物细胞中的拟议机制示意图。（A）侵入宿主后，细菌会被多种细胞识别，包括微皱褶细胞、上皮细胞或免疫细胞。（B）重组细菌被吞噬溶酶体复合体内化，随后发生裂解。在此过程中，DNA 疫苗从囊泡中释放出来并转运到细胞核中，从而使抗原基因得以转录。产生的抗原蛋白被呈递给免疫系统，引发细胞免疫和体液免疫应答。7.4. 树突状细胞靶向增强疫苗免疫效率B淋巴细胞和T淋巴细胞通过抗原呈递细胞的作用启动适应性免疫应答，抗原呈递细胞从内环境中捕获抗原并将其呈递给这些淋巴细胞。抗原呈递细胞是一组异质细胞，包括巨噬细胞、B细胞、髓系树突状细胞亚群和浆细胞样树突状细胞（pDCs）。鉴于抗原呈递细胞在触发免疫应答中的关键作用，已探索多种策略将抗原特异性靶向一种或多种抗原呈递细胞亚群。在这些不同细胞类型中，树突状细胞因其高效的抗原摄取、加工和随后向T细胞的呈递而被认为具有特别重要的意义。暴露于靶向材料会导致树突状细胞成熟并迁移至淋巴结，从而产生免疫应答。同时，树突状细胞靶向材料还可通过产生保护性细胞因子（如 IL-2、IL-4 和 IFN-Ⅰ）发挥作用，这些细胞因子影响适应性免疫应答的不同步骤和先天淋巴细胞的活化。因此，将抗原递送靶向树突状细胞是一种更直接、更省力的诱导有效免疫应答的策略，近年来引起了广泛关注。先天免疫系统的细胞表达模式识别受体（PRRs），由于其在适应性免疫发展之前出现，也称为病原体识别受体或祖先模式识别受体。模式识别受体主要分为两类。第一类是内吞模式识别受体，可特异性结合碳水化合物。这类受体包括甘露糖受体（MR）、葡聚糖受体和清道夫受体（SR）。第二类是信号模式识别受体，包括膜结合的Toll样受体（TLRs）和细胞质NOD样受体。树突状细胞表面已鉴定出多种模式识别受体，包括 DC-SIGN、甘露糖受体、Toll样受体、清道夫受体和 DEC-205。其中，C型凝集素形成一个多样化的凝集素家族，其特征是具有碳水化合物识别结构域。在树突状细胞中，关键的C型凝集素如 DC-SIGN、DC-SIGNR、DCAR、DCIR、Dectins和DLEC在细胞运输、免疫突触形成以及细胞和体液免疫应答启动等过程中起着至关重要的作用。Toll样受体是先天免疫受体，可通过配体的模式识别处理来检测多种分子，包括组织损伤信号、细菌、病毒、原生动物和线虫。已鉴定出 13 种已知的Toll样受体，它们可识别多种微生物抗原，但在对微生物模式的特异性方面有所不同。靶向这些受体正成为在树突状细胞靶向疫苗中递送抗原的有效方法。树突状细胞靶向策略正处于抗病毒病原体和癌症疫苗开发的研究阶段（图 5）。抗原被设计成附着于已鉴定的可与树突状细胞结合的分子。当这些携带抗原的分子被注射到体内并被树突状细胞摄取后，树突状细胞会激活免疫系统产生应答。图 5. DNA 疫苗的树突状细胞靶向递送策略介绍。步骤 1：DNA 疫苗由一个质粒组成，该质粒在哺乳动物启动子的作用下编码抗原基因。步骤 2：用表面修饰了树突状细胞（DC）靶向配体的包装材料对其进行包封。步骤 3：将 DNA 递送疫苗复合物靶向到树突状细胞后，编码的抗原在树突状细胞内表达，并通过主要组织相容性复合体（MHC）途径呈递处理后的抗原，以激活初始 T 细胞。步骤 4：树突状细胞通过 MHCⅡ 类途径触发 CD4⁺辅助性 T 细胞的激活，B 细胞通过识别分泌的抗原或被激活的 CD4⁺辅助性 T 细胞而被激活，从而产生不同类型的抗体。步骤 5：内源性表达的抗原通过 MHCⅠ 类分子呈递，主要激活 CD8⁺T 细胞免疫。释放的细胞因子（γ 干扰素 [IFN-γ] 或肿瘤坏死因子 -α[TNF-α]）可抑制病毒复制并增强 MHCⅡ 类分子的表达。同时，巨噬细胞也被激活，以支持细胞介导的免疫应答。8. 结论Science & Technology总之，大规模疫苗接种仍是控制家禽中禽流感病毒感染和传播的多管齐下策略的重要组成部分。禽流感病毒大流行的持续威胁凸显了开发新型疫苗的必要性，与现有禽流感病毒疫苗相比，新型疫苗应具有更简化、更易于制造的工艺，并能有效免疫保护以应对潜在的大流行毒株。尽管在开发和设计多种抗大流行威胁的禽流感病毒疫苗方面取得了最新进展，但开发理想的禽流感病毒疫苗仍有几个方面值得关注。高效佐剂的开发是禽流感病毒疫苗研究的一个重点领域。目前正在开发能更有效地刺激免疫系统同时将副作用降至最低的新型佐剂，这可能会提高疫苗的效力和安全性。此外，不应忽视改变免疫途径，因为已表明皮内注射在产生免疫应答方面更有效，且可能需要更小剂量的疫苗，从而可能提高疫苗的可获得性。总体而言，本综述中提出的多种策略有助于更好地理解当前的禽流感病毒疫苗。随着研究人员继续探索创新方法来开发更有效、更易获得的疫苗，疫苗开发的未来前景广阔。原文链接：https://mp.weixin.qq.com/s/suU97ueUNzqcCzOo4JwIVw