确定母鸡的卵泡募集是否在功能上与排卵有关，将为研究周期性募集的确切时间以及随后介导募集的最早细胞事件提供信息。本研究的目的是确定缺乏排卵是否会导致循环募集失败。研究了3组Hy-Line W-36母鸡：在该序列内无排卵、首次排卵或晚排卵。

通过视频记录和泄殖腔触诊记录产卵和排卵的时间和发生情况。为了确定是否存在新募集的卵泡，在光周期的最后一小时收集卵巢，将重量在 280 至 900 毫克之间、含有黄色蛋黄且直径为 9至 12 毫米的卵泡视为新募集的卵泡。为了比较新募集卵泡中卵黄摄取量，在收集卵巢前 6 小时给母鸡喂食苏丹 IV 染料。从新募集卵泡的横截面定量染色卵黄的百分比。为了确认卵泡的活力，通过流式细胞术评估颗粒细胞（GC）的有丝分裂活性。初步结果表明，在11 个未排卵卵巢中有 10 个、10 个首次排卵卵巢中有 7 个、10 个晚期排卵卵巢中有 9 个存在新募集的卵泡，重量分别无显著差异（分别为 543 ± 62 毫克、456 ± 71 毫克、620 ± 75 毫克）。在未排卵、首次排卵和晚期排卵的卵巢中，最新募集的卵泡之间的卵黄掺入量没有显著差异，分别为 19.0 ± 2.0%、18.0 ± 3.7% 和 19.8 ± 3.2%。

最后，在募集的卵泡中，处于有丝分裂 S/G2-M 期的颗粒细胞百分比（未排卵卵巢中为 19.0 ± 5.0%，首次排卵卵巢中为 22.0 ± 4.2%，晚期排卵卵巢中为 15.67 ± 1.0%）没有显著差异，这证实了所有募集卵泡的活力。我们得出结论，周期性募集的发生独立于排卵，并提出周期性募集的顺序和时间在卵泡发育的早期阶段就已预先确定。

总的来说，本文所讨论的数据提供了证据，表明排卵过程和卵泡募集进入排卵前等级的过程并非紧密相连，卵泡募集的顺序和时间可能在卵泡发育的更早阶段就已确定。这个阶段可能早在直径 1 毫米的阶段，正如佩里及其合著者（1983年）所提出的那样，在那里必然有一个初始的募集步骤，使预募集卵泡能够排列成等级。预募集卵泡排列成等级被认为决定了给定预募集卵泡内的颗粒细胞层响应 FSH 和 VIP 产生 cAMP 的能力，这样随着卵泡增大，颗粒细胞层的反应性也会增加（Kim 和 Johnson，2016，2018a，b；Ghanem 和 Johnson，2019）。反过来，颗粒细胞层对 FSH 和 VIP 无反应的能力被认为是由 MAPK 信号通过直接干扰 cAMP 的产生（Woods 等人，2007）和/或通过诱导β-ARRESTIN 募集到它们各自的 G 蛋白偶联受体 FSHR 和 VPAC1/2，导致它们脱敏来调节的（Kim 和 Johnson，2018a，b）。我们提出，随着生长缓慢的卵泡体积增大，颗粒细胞层对 G 蛋白偶联受体（GPCR）配体FSH 和/或 VIP 的反应性逐渐增强，因此它们被依次募集进入排卵前的等级。MAPK 信号被认为通过直接干扰 cAMP 的产生或通过 G 蛋白受体激酶（GRK）将β-ARRESTIN募集到 GPCR 并导致其脱敏，从而阻止 GPCR 的反应性/激活。未来关于卵泡募集进入排卵前等级的研究应侧重于确定负责在颗粒细胞层内逐渐启动 G 蛋白偶联受体信号传导的因素（卵泡内和/或卵泡外）。最后，鉴于有明确证据表明直径约 1 至 8 毫米的生长缓慢的卵泡已经按照明确的大小等级排列，我们建议使用更准确的术语“预募集卵泡”来替代之前的术语“前等级卵泡”。