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科学解释为什么免疫新城疫活疫苗后原有的呼吸道症状会减轻
有很多用户反馈：肉鸡在21日龄免疫新威灵（新城疫活疫苗VG/GA株）之后，原有的呼吸道症状会减轻甚至消失，而且在之后的十几天的时间内，鸡群更不容易生病。对于这种现象的一种解释是：原本的呼吸道症状和新城疫有关，这次免疫起到了紧急接种的作用。但实际上对鸡呼吸道进行病原学检测的结果显示：大多数时候并未检出新城疫病毒，而是检出了传染性支气管炎病病毒，低致病性禽流感病毒，支原体，或者一些细菌。那么为什么免疫了新城疫活疫苗后，鸡的呼吸道症状会减轻呢？以下一项研究似乎可以从一定程度上解释这种现象。本研究所采用动物为商品肉鸡，分别在1日龄免疫了新城疫活疫苗LaSota株或VG/GA株，在免疫后1天，3天和7天，分别检测脾脏和盲肠扁桃体中编码几种非特异性免疫相关蛋白的基因的复制量。这几种蛋白的名称和功能简介如下：Mx1：与GTP结合，并在其结合的状态下与病毒核酸相互作用，从而抑制病毒的复制和传播；IRF7：促进IFN（干扰素）的产生，促进炎性反应；ChIFN-α：鸡α干扰素，诱导抗病毒蛋白的表达，抑制病毒复制，调节免疫应答，诱导免疫细胞到感染部位，增强抗病毒防御机制；MDA5：识别病毒的RNA，诱导Ⅰ型干扰素（IFN）的产生；暴露出病毒CARD结构，进一步触发抗病毒免疫反应；PKR：能够被双链RNA激活，抑制病毒蛋白质合成，并通过调控自噬和激活NF-κB发挥抗病毒作用。以下是试验结果，数字单位为非免疫对照鸡只编码相应蛋白的基因复制量的倍数，带有*的，表示与非免疫对照鸡只对比差异显著。可以看出，在免疫新城疫活疫苗之后，编码几种非特异性免疫相关蛋白的基因的复制量大多呈现出不同程度的增加。对比LaSota组和VG/GA组：在脾脏多数基因的表达量类似，LaSota组中编码Mx1的基因复制量更高。但是在盲肠扁桃体，VG/GA组几乎全部编码5种蛋白的基因的复制量都显著高于LaSota组，而且在免疫后7天仍然保持在较高的水平。编码这几种蛋白的基因复制量增加即意味着这些蛋白的生产量也会同步增长，这几种蛋白的抗病原微生物作用是非特异性的，他们也会对传支病毒、禽流感病毒、支原体和细菌起到杀灭和抑制作用。从试验结果来看，VG/GA株的表现比LaSota株更好，在现场使用中，由于VG/GA株对呼吸道的刺激远比LaSota株弱，对于已经表现出轻微呼吸道症状的鸡群，免疫VG/GA株也要安全得多。向下滑动查看参考文献Hassanin O, Abdallah F, Ali HA, AlGabr N, Mohamed MHA. Different kinetics of chicken interferon-alpha signalling transduction responses following immunization of broiler chickens with different Newcastle disease virus vaccines and infection with virulent genotype VIId strain. Avian Pathol. 2021 Feb;50(1)
2025-12-10 15:29:27
四川大学王红宁/唐艺芝课题组揭示弯曲菌外膜囊泡作为新型载体介导耐药基因转移
弯曲杆菌是全球范围内重要的食源性病原菌，其日益严峻的耐药性问题对畜牧养殖业和公共卫生安全构成了严重威胁。传统观点认为，弯曲杆菌主要通过自然转化、接合转移和转导这三种经典的水平基因转移方式获取耐药基因。然而，越来越多的研究发现，仅凭这三种机制难以完全解释弯曲杆菌中ARGs跨门传播的现象。因此，本研究聚焦于一个关键科学问题：弯曲杆菌是否依赖其他载体或新型HGT机制来实现耐药基因的传播？外膜囊泡（Outer Membrane Vesicles, OMVs）是革兰氏阴性菌在生长过程中分泌的纳米级双层膜结构，其内部常携带宿主来源的DNA、LPS、蛋白质等多种生物活性成分，具备介导遗传物质传递的潜力。基于OMVs在其他细菌中已证实的“基因递送载体”功能，本研究旨在探讨OMVs是否也参与弯曲杆菌中ARGs的传播。近日，四川大学生命科学学院动物疫病防控与绿色发展四川省重点实验室唐艺芝副教授团队在JEV杂志上发表题为“Identification of Outer Membrane Vesicles as a New Vehicle Mediating Antibiotic Resistance Gene Transfer in Campylobacter”的论文。该研究通过OMVs纯化与鉴定、基因组测序、组学分析等系统性方法，首次证实弯曲杆菌的OMVs能够携带并传递ARGs，揭示了OMVs作为ARGs新型传播载体的重要作用，拓展了对细菌耐药性传播机制的认识。研究团队通过透射电子显微镜观察，明确了弯曲杆菌形成和分泌OMVs的三个典型阶段：膜出泡、囊泡形成与释放。对分离纯化后的OMVs进行TEM和纳米颗粒追踪分析，结果显示其呈规则球形，粒径主要分布在50–200 nm之间，并具备典型的双层膜结构。进一步提取OMVs腔内DNA进行微量宏基因组测序，并与供体菌基因组进行共线性比较，发现OMVs中的DNA几乎均匀覆盖供体菌全基因组，无明显富集区域，提示OMVs在生物发生过程中可能以非选择性方式组装DNA。为验证OMVs的基因转移能力，研究将来自耐药弯曲杆菌的OMVs与敏感受体菌共孵育，通过抗性平板筛选、药敏实验、PCR及基因组测序等方法，确认受体菌获得了ARGs。实验还设置了多种对照，如采用DNase Ⅰ处理OMVs外部DNA、使用自然转化缺陷株YZ2024作为受体菌以及非接合性质粒pRY112等，以排除其他HGT机制的干扰。结合TEM观察到的OMVs与受体菌膜直接融合的现象，研究提出了“膜融合”的基因递送方式，系统阐明了OMVs作为弯曲杆菌中一种独立于传统自然转化、接合和转导的新型ARGs传播途径。实验过程中发现，部分筛选到的转化菌MIC低于筛选平板所用抗生素浓度，猜测这一“即时保护”现象提示OMVs除可递送DNA外，还可携带膜蛋白或代谢相关组分，从而在没有完成稳定遗传整合之前，先以生理层面的方式提高受体菌存活几率。为验证这一假设，我们提取了抗生素抗性菌株和敏感菌株的OMVs，与敏感菌共孵育后测MIC变化，结果显示敏感菌与抗生素抗性源OMVs共孵育后氟苯尼考 MIC 升高2 倍，环丙沙星MIC值增加 2-4 倍。这些发现表明OMVs 通过为敏感菌株提供保护作用，可暂时增强其抗生素耐受性。综上所述，该研究首次系统证实弯曲杆菌来源的OMVs可介导质粒和染色体编码的ARGs的转移，该机制独立于已知的自然转化、接合和转导途径，代表了一种新的HGT方式。此外，源自耐药菌的OMVs还能为敏感菌提供短期保护，增强菌群整体适应抗生素胁迫的能力。四川大学唐艺芝副教授为该论文的通讯作者，四川大学赵蒙宇为该论文的第一作者。研究团队长期致力于从事动物疫病防控，动物源细菌耐药性及致病性方面的研究。在ARGs溯源、传播路径及交叉耐药机制方面积累了丰富经验，并期待进一步推动相关成果的转化应用，为动物疫病防控提供理论支持与技术支撑。参考文献：Identification of Outer Membrane Vesicles as a New Vehicle Mediating Antibiotic Resistance Gene Transfer in Campylobacter. J Extracell Vesicles. 2025 Nov;14(11):e70195. doi: 10.1002/jev2.70195. PMID: 41216876; PMCID: PMC12603785.
2025-12-10 15:16:21
兰州兽医研究所揭示小RNA病毒3D聚合酶靶向JAK-STAT信号通路拮抗宿主先天免疫的分子机制
近日，中国农业科学院兰州兽医研究所口蹄疫与新发病流行病学创新团队在《mBio》发表题为“Picornavirus 3D polymerase inhibits antiviral innate immunity by blocking the activation of JAK-STAT signaling pathway”的研究论文，该研究阐明了小RNA病毒3D聚合酶抗病毒反应的调控机制，揭示了小RNA病毒的共性免疫逃逸策略，为开发新的抗病毒策略提供了思路。3D聚合酶是RNA依赖性RNA聚合酶（RdRp），是小RNA病毒复制的核心，高度保守。该研究发现，3D蛋白的N端结构域（aa1-152）与JAK1的FERM结构域之间的相互作用是抑制JAK-STAT信号传导的关键结构域。 3D蛋白招募E3泛素连接酶RNF125，诱导JAK1在K205和K249位点发生K48连接的多泛素化，最终导致JAK1通过蛋白酶体途径降解。该研究表明，小RNA病毒3D蛋白可以同时作为RdRp聚合酶和先天免疫拮抗剂促进病毒复制，拓展了对小RNA病毒发病机制的理解，为开发针对小RNA病毒的抗病毒策略开辟了新途径。该研究得到国家自然科学基金、广东省“十四五”农业科技创新十大重点项目、甘肃省联合基金、甘肃省自然科学基金、国家生猪技术创新中心项目、兰州市青年科技创新项目、中国农业科学院兰州兽医研究所基本科研业务费等项目的资助。郑海学研究员、朱紫祥研究员、杨帆研究员为通讯作者，李康丽博士为第一作者。文章链接：https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC12506094/
2025-12-08 10:28:35
哈兽研开发出一种新型口服疫苗递送技术
近日，中国农业科学院哈尔滨兽医研究所在口服亚单位疫苗递送技术方面取得重要进展，成功开发出一种新型、通用且低毒性的细菌仿生囊泡（BBVs）口服疫苗递送技术。相关研究成果于近日发表在《细胞外囊泡杂志（Journal of Extracellular Vesicles）》。目前，猪群普遍存在多种细菌和病毒的混合感染，因此疫苗联合免疫策略备受关注。亚单位疫苗因其安全性而被广泛应用。相比肌肉注射，口服免疫不仅能为猪只提供黏膜免疫，还能降低应激反应，但口服递送抗原面临胃肠道破坏和免疫原性弱的挑战。为此，研究团队通过改造猪霍乱沙门氏菌弱毒株的Lipid A结构来降低其内毒素活性，进一步利用其BBVs作为疫苗递送载体，并通过引入SpyCatcher/SpG双抗原耦合系统和多糖涂层（壳寡糖，COS）以实现多抗原的口服递送。该研究首先以mCherry为抗原模型，评估了该载体口服递送抗原的潜力。结果表明，COS涂层显著减少胃肠液对抗原的破坏，提高抗原在肠道和淋巴组织的靶向递送能力，并有效诱导M1型巨噬细胞极化。随后，使用该递送载体“模块化”展示了猪链球菌2型菌株的谷氨酸脱氢酶（GDH）和伪狂犬病病毒的gD蛋白，口服免疫小鼠后可有效激发体液、黏膜和细胞免疫。在相应病原的致死性攻击时，该疫苗为免疫动物提供了良好的保护。该研究为递送口服亚单位疫苗提供了新技术，为防控多病原感染提供了新思路。猪蓝耳病与伪狂犬病研究创新团队博士研究生沈雪刚为论文的第一作者，杨勇博副研究员、安同庆研究员和蔡雪辉研究员为共同通讯作者。该研究得到了“十四五”国家重点研发计划、黑龙江省自然科学基金重点项目、中国农业科学院基础研究科学中心项目和中国农业科学院高产高效技术集成与示范推广项目等资助。原文链接：https://doi.org/10.1002/jev2.70207
2025-12-08 10:26:32
探秘RNF4基因：猪繁殖性状背后的“幕后推手”
环指蛋白4（RNF4）是一种转录因子，在小鼠的睾丸中表达很高，可与雄激素受体互作。有研究者研究显示，RNF4蛋白作为一种转录协调子，在颗粒细胞、卵细胞及精细胞的发育过程中发挥着重要的调控作用。因此选择RNF4做为影响繁殖性状的候选基因。1 材料与方法1.1 材料猪的耳组织统一放在-20℃保存备用。1.2 方法1.2.1 引物的设计与合成  根据RNF4 基因DNA序列设计引物，退火温度为59.1℃。1.2.2 PCR扩增  PCR扩增后，可见937 bp的清晰目的条带。1.2.3 限制性内切酶酶切（RFLP）  PCR产物经内切酶酶切后，观察其分型结果。2 结果与分析2.1 猪RNF4基因的多态位点检测当多态位点为TC基因型时，可见3个片段（937 bp+545 bp+392 bp）；当多态位点为TT基因型时，可见一个片段（937 bp）（图1）。猪RNF4基因SacII酶切分型结果图1  猪RNF4基因SacII酶切分型结果2.2 猪RNF4基因的基因型和等位基因的频率分布发现RNF4基因经过SacII酶切后，在三个猪群中，C等位基因占优势（表1）。2.3 猪RNF4基因三个基因型与猪所有胎次产仔数性状的关联分析通过在淮猪新品系Ⅱ猪群体中分析发现，CC型个体的所有胎次产仔数显著高于TT型个体1.044头（P＜0.05），C等位基因为优势等位基因。详见表2。3 讨论RNF4基因在颗粒细胞、卵细胞及精细胞的发育过程中发挥着重要的调控作用，并发现，RNF4基因的CC基因型在所检测的3个猪群中占优势，这与其他研究者的结果是一致的。所以，在今后的猪的选育初期，可以参考选择RNF4基因的CC型个体作为一个选留参数，以期提高猪的产仔数。
2025-12-04 10:14:11
哈兽研揭示细胞自噬系统精准清除流感病毒蛋白的新机制
近日，中国农业科学院哈尔滨兽医研究所揭示了E3泛素连接酶TRIM45引导细胞自噬系统精准清除流感病毒PB2蛋白的分子机制，相关研究成果发表在《PLoS Pathogens》杂志上。自噬是一种高度保守的细胞内降解途径，通过溶酶体系统实现对胞质成分的降解与再循环。根据底物向溶酶体递送方式的不同，可分为三种类型：巨自噬、微自噬和分子伴侣介导的自噬（CMA）。已有研究表明，巨自噬在流感病毒的复制周期中扮演重要角色。然而，另一种选择性自噬形式—CMA是否参与流感病毒的复制调控，仍不清楚。该研究发现，TRIM45通过增强CMA途径底物受体LAMP-2A表达及PB2与LAMP-2A互作，促进了CMA介导的PB2降解，从而抑制病毒复制；同时，TRIM45的E3泛素连接酶活性介导蛋白酶CAPN1发生K48泛素化修饰并被蛋白酶体降解，阻止CAPN1对LAMP-2A的切割，进而保持CMA功能完整性。进一步研究表明，PB2蛋白602-606位高度保守的QMRDV基序是PB2结合LAMP-2A并经CMA降解的关键，该基序引入Q602A突变不仅使TRIM45失去介导PB2经CMA途径降解的能力，而且导致病毒在小鼠体内生长滴度和致病力显著提高。该研究阐明了TRIM45通过CMA途径降解PB2蛋白以拮抗流感病毒复制和致病的分子机制。中国农业科学院哈尔滨兽医研究所博士生王一涵和研究员姜丽为论文第一作者，李呈军研究员和陈化兰院士为共同通讯作者。该研究得到了国家重点研发计划、国家自然科学基金、黑龙江省自然科学基金等项目资助。原文链接：https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1013630
2025-11-21 13:36:42
基因编辑技术开辟球虫疫苗研发新路径
 近日，中国农业科学院上海兽医研究所动物寄生虫与生物媒介控制团队利用基因编辑技术获得了一种“减毒不减产”的转基因球虫株，展现出优异的疫苗应用潜力。相关研究成果发表在《国际生物大分子杂志（International Journal of Biological Macromolecules）》上。  面对耐药性挑战，对球虫病的免疫预防虽已成主流，但传统活疫苗因存在毒力返强风险而应用受限。基因编辑疫苗凭借其精准调控成为研发新方向，而球虫遗传操作复杂、致病机制不清等问题，制约着高效疫苗抗原的筛选，是当前研发面临的核心瓶颈。  该研究通过基因编辑技术，成功构建了稳定过表达微线体蛋白的转基因球虫株。与亲本株相比，该虫株在致病性显著降低的同时，繁殖能力提升61.0%。免疫攻毒试验证实其具有优异的免疫保护效果。该研究揭示了微线体蛋白调控球虫的多种表型，证实了通过精准调控关键蛋白表达可实现球虫“减毒不减产”，获得兼具低致病性、高免疫原性与良好繁殖性能的候选疫苗株。该研究成果不仅为开发新型球虫病疫苗提供了可靠的技术路径，其建立的基因编辑与表型评估体系也为其他顶复门原虫研究提供了新思路。  该研究得到国家重点研发计划、国家自然科学基金等项目支持。（通讯员 俞仓炜）原文链接：https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2025.148361
2025-11-21 13:33:49
全球牛传染性胸膜肺炎的流行和防控
摘要：本文回顾了全球牛传染性胸膜肺炎（也称牛肺疫）历史流行情况，简述了部分国家牛肺疫消灭史，总结了全球牛肺疫防控成效及进展，分析了全球牛肺疫流行状况及特点。迄今为止，欧洲、北美洲和大洋洲已经彻底消灭了牛肺疫，全球已有24个国家被世界动物卫生组织（WOAH）认可为无牛肺疫国家；2005—2022年，全球共有34个国家（非洲32个、亚洲2个）累计报告疫情4 727起，发病动物365 506头/只；亚洲的马来西亚和沙特阿拉伯存在疫情散发，非洲撒哈拉以南地区是主要流行区域；总体看，全球牛肺疫流行趋势趋缓，特别是近年报告疫情的国家数量和疫情数都大幅下降。此外，本文还简述了我国牛肺疫消灭史。牛传染性胸膜肺炎（contagious bovine pleuropneumonia，CBPP，又称牛肺疫）是由丝状支原体丝状亚种（Mycoplasma mycoides subsp. Mycoides，Mmm）引起的一种高度接触性传染病，临床主要表现为厌食、发热和呼吸症状（如呼吸困难、呼吸急促、咳嗽和流涕等），病变特征为渗出性纤维素性肺炎和浆液性纤维素性胸膜肺炎。牛肺疫的易感动物主要是牛，包括普通牛（Bos taurus）和瘤牛（Bos indicus），亚洲水牛和牦牛也有被感染的报道，绵羊和山羊也能被自然感染。迄今已知人不易感，因此牛肺疫无公共卫生风险。牛肺疫的潜伏期通常为3~8周。牛肺疫主要通过易感动物与被感染动物直接接触而传播，也可通过吸入被感染动物呼出的飞沫传播。牛肺疫具有高度传染性，流行时发病率高，死亡率可高达50%，曾在许多国家的牛群中发生并造成重大经济损失，曾是危害全球养牛业的3种主要疫病之一（其他2种为牛瘟和口蹄疫），是世界动物卫生组织（WOAH）规定的须通报动物疫病，是我国农业农村部规定的一类动物疫病，也是我国继牛瘟之后宣布消灭的第二种动物疫病。全球牛肺疫历史流行状况GO ALL OUT FOR牛肺疫流行历史非常悠久。据文献记载，早在16世纪，欧洲就有了牛肺疫的报道。18世纪下半叶，该病在欧洲大陆广泛传播，后通过殖民活动和活牛贸易传播到世界大部分地区。19世纪，牛肺疫又传入美国、澳大利亚、加拿大以及非洲等地。19世纪末，澳大利亚又成为新的疫源地，将牛肺疫进一步传播到新西兰、印度、中国、蒙古国、朝鲜和日本等国家。20世纪以来，欧洲、美洲和大洋洲国家采取了扑杀、免疫等综合措施，基本消灭了该病，目前牛肺疫主要流行于非洲撒哈拉以南国家。欧洲欧洲是牛肺疫的起源地，最早于16世纪出现疫情；到18世纪下半叶，牛肺疫已在欧洲大陆不少国家流行；19世纪，由于拿破仑战争和国际贸易发展，欧洲地区活牛贸易数量攀升，导致牛肺疫在欧洲大陆迅速传播，最先在荷兰和瑞士暴发疫情，随后传入英国。20世纪20年代以后，欧洲通过禁止牛只流动、扑杀发病的同群牛和接种疫苗等方法，在西欧绝大多数地区扑灭了牛肺疫，但法国和西班牙的边境地区仍有牛肺疫散发，部分国家也多次复发疫情。如：葡萄牙消灭牛肺疫30年后，1983年疫情复发且广泛流行，直到1999年才得以控制；西班牙继1961年发生牛肺疫后，1989年疫情复发，直到1994年才被扑灭；法国继1967发生牛肺疫后，分别于1980、1982、1984年又发生疫情；意大利消灭牛肺疫100年后，1990年疫情复发，直到1993年才被再次消灭。据不完全统计，历史上欧洲共有25个国家报告发生过牛肺疫，但这些国家通过采取扑杀、免疫接种、移动控制等措施，先后消灭了牛肺疫，近20余年来再未发生（表1）。北美洲据不完全统计，历史上北美地区的美国和加拿大两个国家发生过牛肺疫。1843年牛肺疫首次传入美国，至1876年加拿大消灭牛肺疫时，该病仍在美国广泛流行。1879年英国因牛肺疫限制从美国进口牛，因此1884年美国成立了畜牧局（美国兽医机构前身），决定着手消灭牛肺疫。1887年，该局被授权购买和销毁患病动物，并于1889年开始实施检疫；通过临床识别、消除疑似病例以及对场所进行消毒等措施，美国于1892年消灭了牛肺疫，此后再未发生。牛肺疫是19世纪下半叶在北美地区消灭的第一种疫病，且是在没有诊断试验或疫苗的帮助下消灭的。大洋洲据不完全统计，历史上大洋洲地区仅有澳大利亚和新西兰两个国家发生过牛肺疫。1859年，牛肺疫通过从英国进口的牛传入澳大利亚，此后从澳大利亚又传入新西兰。1864年后，新西兰再未发生牛肺疫疫情，而疫情在澳大利亚却持续流行。澳大利亚各州采取染疫动物识别、染疫动物屠宰、屠宰场监测、免疫接种和移动控制等诸多措施，部分州逐渐控制和消灭了牛肺疫。如到1914年，维多利亚州几乎消灭了牛肺疫。1959年，澳大利亚决定进行牛肺疫消灭工作。1968年，联邦政府建立了一套统一的标准体系，划分了疫区、保护区和无疫区，采取有效措施控制和消灭牛肺疫，1968年之后澳大利亚再未发生疫情。1973年，澳大利亚宣布消灭了该病。非洲历史上，牛肺疫传入非洲后持续流行，至今非洲仍是全球牛肺疫最主要流行地区。1854年，牛肺疫从英国和荷兰传入南部非洲，19世纪末又通过从印度进口感染牛传到埃塞俄比亚和苏丹，随后传播到东非和西非。20世纪70—80年代，由于使用疫苗，一些国家的疫情有所控制，但随后受干旱、战争等因素影响，牛肺疫在撒哈拉地区再次呈现地方性流行，并呈加重趋势。如：坦桑尼亚在长达25年未发生疫情后，1990年疫情复发，1995年在全国大暴发；1995年，卢旺达也重新暴发牛肺疫疫情；1939年，博茨瓦纳消灭了牛肺疫，但1995年疫情再次暴发，在扑杀了32万头牛后，直到1995年底疫情才被彻底扑灭。据不完全统计，历史上非洲地区共有30多个国家发生过牛肺疫，迄今仅有安道尔、埃及、南非、博茨瓦纳等极少数国家消灭了牛肺疫，而多数国家仍有牛肺疫流行。亚洲19世纪末，牛肺疫从澳大利亚传入亚洲。据不完全统计，历史上亚洲地区共有印度、巴基斯坦、阿富汗、缅甸、越南、柬埔寨、孟加拉、马来西亚、日本、蒙古国、朝鲜、中国、阿联酋、卡塔尔、科威特、沙特阿拉伯、以色列、也门、约旦和黎巴嫩等20个国家发生过牛肺疫疫情。至今亚洲多数国家已数十年未再出现疫情（表2）。自2005年以来，亚洲地区仅有沙特阿拉伯和马来西亚2个国家报告发生牛肺疫疫情，但有关文献认为亚洲地区有些国家的牛肺疫状况并不清楚。近年全球牛肺疫流行状况和特点GO ALL OUT FOR2005年以来总体流行状况根据WOAH-WAHIS数据统计，2005—2022年全球累计有34个国家报告发生过牛肺疫疫情，累计报告疫情4 727起，累计报告发病动物365 506头/只，死亡30 182头/只（表3）。除亚洲的马来西亚和沙特阿拉伯分别报告发生3起和2起牛肺疫疫情外，其余32个报告牛肺疫的国家均是非洲国家。其中，2005—2022年累计报告牛肺疫疫情数量居前5位的国家分别是加纳、埃塞俄比亚、尼日利亚、多哥和坦桑尼亚，分别报告疫情921、821、301、299和297起，合计占全球疫情总数的56.9%。从报告的病例数来看，刚果（金）最多，达237 544例，占全球总病例数的65.0%；其他报告病例数过万的国家还包括埃塞俄比亚、坦桑尼亚、尼日利亚和安哥拉，分别报告26 405、25 169、18 423和10 585例，这4个国家的病例合计占全球总病例数的22.1%。2005年以来全球牛肺疫流行特点本世纪以来，欧洲、北美、大洋洲等历史上牛肺疫流行严重的地区已彻底消灭牛肺疫，迄今再未复发疫情；亚洲地区多数国家也已控制牛肺疫，仅有马来西亚和沙特阿拉伯报告散发疫情；非洲地区的牛肺疫则一直未得到有效控制，特别是撒哈拉以南地区多数国家的牛肺疫仍呈地方性流行，是近年来全球牛肺疫的主要流行区域。但从最近几年流行情况看，牛肺疫发病国家数量大大减少，疫情数大幅下降，流行总体上呈减缓趋势。时间分布　2005以来，全球报告的4 727起牛肺疫疫情中，2 703起是上半年（1—6月）报告的，2 024起是下半年（7—12月）报告的，分别占57.2%和42.8%，上半年报告的疫情数略多。其中，2008年报告疫情数最多，共509起，而2012年报告发病的国家数量最多，达24个。从各年发病国家数量和疫情数来看，均呈现先增加后减少趋势（图1）。如发病国家数量在2005—2017年总体呈增加趋势，发病国家数量大体在20多个，而在2018—2022年则呈大幅下降趋势，2020、2021和2022年报告发生牛肺疫的国家仅分别有9、7和3个；除2008年报告的疫情数最多外，2005—2019年全球每年报告的疫情数总体呈上升趋势，2019年达到了436起；2020—2022年则显著下降，分别报告110、58和41起疫情。空间分布　2005—2022年报告发生牛肺疫疫情的34个国家中，除马来西亚和沙特阿拉伯2个亚洲国家外，其余32个国家都是非洲撒哈拉以南国家，占全部发病国家数的94.1%，报告的疫情数占全球总疫情数的99.9%。其中，西非、东非、中非和南非地区发病国家数量分别为14、9、6和3个，累计报告疫情数分别为2 306、1 516、438和462起，各占全球总疫情数的48.8%、32.1%、9.3%和9.8%，说明2005—2022年总体上西非、东非地区比中非、南非地区流行更严重。但自2020年以来，非洲发病国家数量和疫情数急剧下降，发病范围已大幅缩小。2020—2022年，累计有9个非洲国家报告发生牛肺疫疫情，累计报告疫情206起，其中西非、东非、南非和中非地区发病国家数量分别为3个（科特迪瓦、尼日尔和尼日利亚）、3个（埃塞俄比亚、苏丹和索马里）、2个（纳米比亚和赞比亚）和1个[刚果（布）]，累计报告疫情数分别为82、78、36和10起。此外，2020年亚洲的马来西亚报告发生3起牛肺疫疫情，17头肉牛和水牛被感染；沙特阿拉伯也曾在2005年报告发生过2起牛肺疫疫情。群间分布　2005—2022年，全球报告的365 506例牛肺疫病例中，涉及的感染动物主要包括牛、水牛、绵羊/山羊、犬和野生动物等5大类。其中，绝大多数国家报告的是牛病例，合计365 031例，占全球总病例数的99.87%；乌干达（2005年）、坦桑尼亚（2019年）和马来西亚（2020年）等3个国家报告了水牛牛肺疫疫情，发病水牛合计13头；沙特阿拉伯（2005年）、安哥拉（2008年）、苏丹（2009年）、坦桑尼亚（2018年）和乍得（2018年）等5个国家在牛肺疫疫情中报告了绵羊/山羊病例，合计报告病例461例，死亡117例；尼日利亚（2009年）报告1例犬病例；卢旺达（2010年）报告了野生动物病例，2只野生动物死亡。全球牛肺疫防控进展GO ALL OUT FOR通过采取免疫、扑杀、移动控制、屠宰场监测等一系列措施，欧洲、北美洲和大洋洲地区已彻底消灭了牛肺疫，亚洲地区多数国家也多年未发生疫情，呈地方性流行的非洲撒哈拉以南地区近年发病国家数量和疫情数也大幅降低，全球牛肺疫防控成效显著。截至目前，全球已有24个国家被WOAH认可为无牛肺疫国家（图2），包括阿根廷、斯威士兰、秘鲁、澳大利亚、法国、葡萄牙、玻利维亚、印度、俄罗斯、博茨瓦纳、意大利、新加坡、巴西、墨西哥、南非、加拿大、蒙古国、瑞士、中国、新喀里多尼亚、美国、厄瓜多尔、巴拉圭和乌拉圭。此外，纳米比亚和赞比亚的牛肺疫官方控制计划也获得WOAH支持。为了进一步改善和协调全球牛肺疫控制政策，2016年联合国粮食及农业组织-世界动物卫生组织-非洲联盟非洲动物资源局-国际原子能机构（FAO-OIE-AU/IBAR-IAEA）牛肺疫咨询小组第五次会议提出了未来控制牛肺疫的协调行动政策建议，总体目标是改进和协调牛肺疫控制措施，具体目标包括提升控制措施效果、实施控制干预措施、改进诊断和治疗方法以及研发新疫苗等，并提出了分阶段实施计划和未来10年消灭牛肺疫的关键点。其中，第一阶段为综合推广控制阶段，为期3~5年，主要任务是评估状况，并制定和实施区域和国家战略；第二阶段是积极控制阶段，为期5~7年，在此期间各国积极开展监测（特别是屠宰场监测），并对执行情况持续进行评估改进。相信未来在这些政策建议指引下，全球的牛肺疫控制政策、措施会更加适用、有效，全球牛肺疫状况会更加改善，牛肺疫控制进程推进会更快。我国牛肺疫消灭情况GO ALL OUT FOR1918年，牛肺疫从北部传入我国，此后在我国东北、西北、西南、华北大范围流行，曾给我国养牛业造成了巨大经济损失。我国自20世纪50年代成功研制一系列牛肺疫弱毒疫苗后，采取以免疫和扑杀相结合的综合性防控措施，经过数十年努力，有效控制了牛肺疫的流行，到1989年后再未发生疫情，取得了消灭牛肺疫的巨大成就，并于1996年宣布消灭了牛肺疫。2011年，我国被WOAH认可为无牛肺疫国家，至今持续维持无疫状态。近年来，全球牛肺疫防控成效显著，疫情主要在非洲撒哈拉以南地区流行，亚洲地区发病国家极少。但由于我国的动物及产品进口需求旺盛，国际交往以及边贸活动频繁，再加上亚洲地区有些国家的牛肺疫状况不明，这些因素对我国的无牛肺疫状况维持构成潜在威胁。为此，当前仍需重视并持续做好牛肺疫防控相关工作，从而维持我国的无牛肺疫状况地位。一要继续落实好进口风险控制，强化国际疫情监视，禁止从牛肺疫感染国家/地区进口牛科动物及其产品，强化活牛及其产品进口风险分析，对进口活牛及其产品按照有关标准实施严格检疫、隔离和消毒等措施，有效降低进口传入风险；二要加强边境地区牛肺疫防控，加强边境地区动物疫病防控基础设施建设，强化部门联防联控，严厉打击活牛及其产品走私活动，防止牛肺疫从边境地区传入；三要持续开展牛肺疫监测，包括临床监测以及血清学、病理学和病原学监测，加强牛肺疫相关知识宣传培训，提升基层对牛肺疫疑似病例的识别和报告能力，发现疑似病例及时采集样品送检；四要做好有关技术研究和储备工作，优化和研发现场快速诊断方法，改进和研究高效优质疫苗，做好应急储备。
2025-11-19 16:19:54
四川省攀西地区蜱携带立克次体检测及基因序列分析
摘要：为了解攀西地区蜱种类及蜱源立克次体的种类和感染状况，采用形态学和PCR方法，对随机采集自攀枝花和凉山州部分地区牛羊体表的252只蜱进行种类鉴定；利用特异性引物对立克次体ompA、gltA基因片段进行PCR扩增，随机选择阳性样本进行测序，并对测序序列进行分析，构建系统发育树。经种类鉴定，攀西地区存在微小扇头蜱和褐黄血蜱2种蜱种；蜱携带立克次体平均阳性率为29.37%（74/252），存在敬信立克次体暂定种（Candidatus Rickettsia jingxinensis）、立克次体共生菌（Rickettsia endosymbiont of Rhipilephalus microplus）、马赛立克次体（Rickettsia massiliae）共3种立克次体，其中敬信立克次体暂定种为优势种，共检出31份。不同县市的蜱携带立克次体阳性率不同，其中盐源县和昭觉县未检测到立克次体，而布拖县（57.14%）、西昌市（55.26%）阳性率较高；牛、羊体表蜱携带的立克次体阳性率分别为29.55%（26/88）和29.27%（48/164），差异不显著。结果表明，攀西地区存在多种蜱传立克次体，其分布范围较广，蜱携带率较高。结果提示，当地应做好蜱传立克次体病的防控，减少其对人和家畜的危害。立克次体是一类以蜱为主要传播媒介的病原微生物，是专性寄生于真核细胞内的革兰氏阴性原核生物，介于细菌与病毒之间，较接近于细菌，在蜱虫体内可经卵垂直传播给下一代，通过叮咬可水平传播给宿主，引起多种人兽共患病。在遗传进化史上，立克次体主要分为斑疹伤寒和斑点热群立克次体。目前我国流行的立克次体至少有10种，包括日本立克次体（Rickettsia japonica）、黑龙江立克次体（Rickettsia heilongjiangensis）、立克次体XY99（Rickettsia sp. XY99）、拉乌尔立克次体（Rickettsia raoultii）、西伯利亚立克次体BJ-90亚种（Rickettsia sibirica subsp. BJ-90）等。近几年我国又发现了几种新的蜱传立克次体，如Candidutus Rickettsia jiaonani、Rickettsia erhaii等。随着新的立克次体不断被发现，该病原逐渐受到了更多学者的重视。我国已先后从黑龙江、新疆、内蒙古、北京、福建、海南、广东、云南、广西、四川等省（区、市）的蜱中检测到立克次体。Yuan等在我国云南、广西、广东等地检测到新型立克次体GD01株，总阳性率为12.5%（71/569）。Zhang等报道我国四川省苍溪县主要流行两种立克次体，总体阳性率为33.5%（63/188）。随着调查研究深入，我国多地发现蜱携带立克次体，且其流行范围广，潜在危害大。攀西地区位于四川省西南部，山场广阔，河谷光热资源丰富，这为动植物的生长发育提供了优良环境，同时也给蜱类孳生提供了条件。本地区牛羊以放牧为主，因此增加了牛羊被蜱叮咬的概率和感染蜱传病原的风险。目前关于攀西地区蜱的区系分布及蜱传立克次体感染情况的调查研究报道较少。为了解攀西地区蜱传立克次体的流行情况，对采集自攀西地区的蜱进行种类鉴定和立克次体分子检测，以期为攀西地区蜱传立克次体病的综合防控提供依据。材料与方法蜱类采集与处理2021年6月至2022年3月，在凉山彝族自治州和攀枝花市，随机选择牛羊，共采集其体表的蜱252只，其中西昌市38只（羊源10只、牛源28只）、盐源县23只（牛源）、美姑县30只（羊源）、木里县19只（羊源）、会东县21只（羊源）、布拖县7只（羊源）、昭觉县7只（牛源）、普格县7只（牛源）、米易县40只（羊源）、盐边县60只（羊源），编号标记后保存于1.5 mL离心管中待检。主要仪器及试剂冷冻混合球磨仪（MM400），德国莱驰公司产品；电泳仪（JY600E），北京君意电泳仪科技有限公司产品；SDS-PAGE凝胶成像系统，美国伯乐GelDocXR+公司产品；银制PCR仪（Nexus GSX）、高速离心机（5810R）、冰箱（U725）、可调微量移液枪，均为德国艾本德公司产品；试剂主要有：2×EasyTaq PCR superMix、DL 2 000 DNA Maker、TBE（tris-硼酸电泳缓冲液）、核酸染料、生理盐水等。基因组DNA提取首先对蜱进行观察，根据邓国藩等主编的《中国经济昆虫志.硬蜱科》进行初步形态学鉴定；然后将蜱虫洗净放入1.5 mL离心管中（如为成蜱可剪取一半），用干净的剪刀将蜱虫剪碎后加入200 μL灭菌生理盐水，再向离心管中加入4粒钢珠，研磨8 min及以上；取出钢珠后，按照血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒说明书提取DNA并置于-80 ℃冰箱保存。蜱种类分子鉴定根据已发表文献对蜱虫16S rRNA进行扩增，引物序列见表1。PCR扩增体系（25.0 μL）：2×EasyTaq PCR superMix 12.5 μL，ddH2O 9.5 μL，引物T16SP1和T16SP2各1.0 μL，模板1.0 μL。PCR扩增程序：95 ℃ 5 min；95 ℃ 45 s、50 ℃ 45 s、72 ℃ 45 s，共38个循环；72 ℃ 6 min。使用1%琼脂糖凝胶电泳检测，所得到的阳性样本进行切胶送生物公司测序，通过序列比对确定蜱种类。立克次体基因扩增及鉴定采用郭利萍报道的引物，扩增外膜蛋白A编码基因（ompA）；采用高悦等报道的套式PCR引物，扩增立克次体柠檬合成酶编码基因（gltA）。以上引物均由上海杰李生物有限公司合成，引物序列见表2。PCR扩增体系（25.0 μL）：2×EasyTaq PCR superMix 12.5 μL，ddH2O 9.5 μL，上、下游引物各1.0 μL，模板1.0 μL。ompA基因扩增程序：94 ℃ 5 min；94 ℃ 30 s、46 ℃ 30 s、72 ℃ 35 s，共35个循环；72 ℃ 6 min。gltA基因第一轮扩增程序：94 ℃ 5 min；94 ℃ 30 s、50 ℃ 30 s、72 ℃ 80 s，共35个循环；72 ℃ 5 min。第二轮扩增程序：94 ℃ 5 min；94 ℃ 30 s、52 ℃ 30 s、72 ℃ 30 s，共35个循环；72 ℃ 5 min。PCR产物用1%琼脂糖凝胶电泳，选取阳性产物送至生工生物工程（成都）有限公司双向测序。立克次体gltA、ompA测序序列分析将测序得到的立克次体gltA、ompA基因片段，经拼接剪切后通过Blast进行同源性比对，下载同源性较高的序列作为参考序列，同时下载不同种立克次体的同源基因序列，利用MEGA-X通过Maximum Likelihood法构建系统发育树，并设置自举值为1 000。数据统计立克次体感染情况用Excel软件分析。对不同地区、不同宿主的蜱携带立克次体阳性率，利用SPSS 21.0软件进行卡方检验。当P＜0.05时，差异显著即存在统计学意义；P＞0.05时，差异不显著。结果蜱虫种类鉴定对252只蜱虫先进行形态观察鉴定，再通过PCR扩增16S rRNA基因，经过1%琼脂糖凝胶电泳，发现电泳条带与目的条带（460 bp）基本一致（图1）。阳性样本测序结果经Blast比对，确定为微小扇头蜱和褐黄血蜱。立克次体PCR扩增PCR扩增结果经1%琼脂糖凝胶电泳后得到的目的条带均与预期目的片段（ompA为510 bp，gltA为381 bp）大小一致（图2），分别扩增出74份ompA基因和11份gltA基因阳性样本。ompA基因序列分析及系统发育树构建　共有29个阳性样本ompA基因测序成功，进行剪切后序列长度约为486 bp。ompA基因片段序列同源性分析显示：主要存在两种斑点热立克次体序列，样本BTY227序列与我国陕西省长角血蜱体内检测到的敬信立克次体暂定种（Candidatus R. jingxinensis，MH932061）同源性为100%（483/483 bp），XCY98与微小扇头蜱中检测到的立克次体共生菌（Rickettsia endosymbiont of Rhipicephalus microplus，MN537556）同源性为100%（486/486 bp）。以Rickettsia akari为外群，基于ompA基因构建的系统发育树（图3）显示：BTY227与敬信立克次体暂定种聚为一支，亲缘关系近；XCY98与立克次体共生菌聚为一支，亲缘关系近，且与马赛立克次体、扇头立克次体有较近的亲缘关系。gltA基因扩增结果分析及系统发育树构建　共有11份阳性样本gltA基因测序成功，序列长度约为366 bp。gltA基因片段序列同源性分析显示：主要存在两种斑点热立克次体序列，样本BTY227与从我国南方微小扇头蜱体内分离的敬信立克次体暂定种（Candidatus R. jingxinensis，MW114883）同源性为100%（366/366 bp），MYY86与从意大利血红扇头蜱体内分离的马赛立克次体（R. massiliae，KJ663741）同源性为99.73%（365/366 bp）。以Rickettsia bellii为外群，基于gltA基因构建的系统发育树（图4）显示：BTY227与敬信立克次体暂定种聚为一支，亲缘关系近；MYY86与马赛立克次体聚为一支，有较近的亲缘关系。蜱传立克次体感染率统计不同种类　从采集的252份蜱样品中，共检出立克次体74份，总体阳性率为29.37%（74/252）。共检出31份敬信立克次体暂定种（Candidatus R. jingxinensis），其中西昌牛源9份、米易羊源5份、普格牛源2份、会东牛源6份、美姑牛源5份、木里羊源1份、布拖羊源3份；检出立克次体共生菌（Rickettsia endosymbiont of Rhipicephalus microplus）2份，均为西昌羊源；检出马赛立克次体（R. massiliae）1份，为米易羊源。由此推断，敬信立克次体暂定种为攀西地区立克次体优势种。不同采集地　本次采集的蜱来自10个县市，不同采集地的蜱携带立克次体阳性率不同。ompA基因检测结果（表3）显示：布拖阳性率最高，为57.14%，其次为西昌55.26%，会东42.86%；经卡方检验，10个县市中，排除未检测到立克次体的盐源、昭觉后，剩余8个县市的蜱携带立克次体阳性率 差异显著（P = 0.023，＜0.05）。gltA基因检测结果（表3）显示：同样是布拖阳性率最高，为28.57%，其次为普格14.29%、美姑13.33%；经卡方检验，10个县市中，排除未检出的县市，不同县市的蜱携带立克次体阳性率差异不显著（P = 0.611）。不同宿主　从总体来看，不同牛羊来源蜱携带的立克次体阳性率相近，其中牛源蜱携带的立克次体阳性率为29.55%，羊源蜱携带立克次体阳性率为29.27%（表4）。经卡方检验，牛、羊宿主蜱携带的立克次体阳性率差异不显著（P = 1.000）。但在西昌市，蜱携带的立克次体情况与宿主有显著差异（P = 0.009），而在美姑县，蜱携带立克次体情况与宿主无显著差异（P = 0.708）。讨论因蜱的发育经历了卵、幼蜱、若蜱、成蜱，因此通过形态学观察需要鉴定人员具有丰富的经验，因此分子学鉴定更受广大学者青睐。用于蜱分子生物学鉴定的基因主要有16S rRNA、COI、COII、ITS-1、ITS-2。16S rRNA基因序列高度保守，因此常作为蜱种类鉴定靶基因。攀西地区幅员辽阔，地理、气候等特点适合蜱生活繁衍。而该地区蜱的区系分布调查仍处于空白。本检测发现，微小扇头蜱为攀西地区的优势蜱种，并分布有褐黄血蜱。该结果与姚晓燕等对我国微小扇头蜱分布情况的总结相符。攀西地区位于川南，与云南省接壤且与其气候特点类似，也属于微小扇头蜱生长的中高适生区。目前针对蜱携带立克次体的检测方法多样，但用于流行病学调查的仍以分子生物学检测方法为主，包括普通PCR、巢式PCR、实时荧光定量PCR及自杀式PCR（suicide PCR）。主要的靶基因有16S rRNA、柠檬合成酶基因（gltA）、外膜蛋白A基因（ompA）、外膜蛋白B基因（ompB）以及细胞表面抗原1（sca1）、细胞表面抗原4（sca4）、17 kDa蛋白抗原等编码基因。其中ompA与ompB对斑点热群立克次体有较好的特异性及鉴别性，即不同斑点热群立克次体，其ompA表现出种的特异性，对斑点热群立克次体的基因型、亚型鉴定及分类具有重要意义，此外ompA基因还可以准确把握斑点热群立克次体的遗传变异特征。唐天才报道四川省石渠县斑点热立克次体总阳性率为49.48%，盛悦报道内蒙古斑点热群立克次体总阳性率为37.7%。而本研究发现，攀西地区蜱携带立克次体阳性率为29.37%，低于上述两个地区。攀西地区作为四川省的西部城市群，有发展农牧业得天独厚的优势，属于典型的半农牧地区，相比纯牧区的内蒙古及石渠县，其立克次体阳性率的差异可能与蜱种类分布及气候、海拔等自然条件不同有关。蜱虫传播需要借助宿主来完成，例如依靠鸟类迁徙、牲畜贸易等。攀西地区各地交通不便，蜱虫传播途径受限，导致各地区蜱种类及数量有差异，进而导致其携带的立克次体阳性率不同。此外，采样过程中经咨询牧民与养殖户得知，不同地区不同养殖户的驱虫意识参差不齐，导致个别地区蜱虫孳生，蜱携带的立克次体阳性率较高。不同宿主蜱携带的立克次体阳性率差异不显著，这与该地区蜱虫无差别叮咬有关，而个别地区阳性率差异显著可能与牛羊养殖模式不同等因素有关。本研究证实，攀西地区存在3种立克次体，其中敬信立克次体暂定种为优势种，其与Guo等报道的陕西省长角血蜱体内敬信立克次体暂定种序列（MH932061）同源性高达100%；且系统发育树显示，两个地区的立克次体处于同一分支。以上表明，敬信立克次体暂定种可能是国内多个地区的立克次体优势种，需要重点加强对其流行的控制。马赛立克次体与斑点热感染有关，首次于法国扇头蜱属体内被发现。Wei等首次在国内西北部的新疆伊犁县图兰扇头蜱体内检测到马赛立克次体，其蜱携带率为3.50%（4/114）；Guo等在西北部塔克拉玛干沙漠图兰扇头蜱体内检测到马赛立克次体，蜱携带率为1.71%（2/117）。本检测发现，微小扇头蜱的立克次体携带率为0.40%（1/252），与上述结果基本相符，存在低携带率现象且都发现于扇头蜱属。综上，攀西地区存在发生立克次体病的潜在威胁，应重视蜱传立克次体病预防。目前攀西地区乃至凉山彝族自治州均缺乏系统的蜱种检测及蜱传立克次体的分析与研究。凉山州及周边多为少数民族群居，天然放牧为主的饲养方式使得人们与自然及牲畜接触增多，被蜱叮咬的概率较大，蜱传立克次体病发病风险较高。因此，当地应做好对牛、羊等家畜的驱虫工作，避免在蜱虫活动高峰期放牧，采取相应防护措施，防止被蜱虫叮咬。各县市应设立哨点医院，重点监测、控制和治疗蜱传立克次体病，做好宣传，提高群众防范意识，以保证公共卫生安全及畜牧业有序发展。
2025-11-19 10:44:17
内蒙古根除外源性牛结节性皮肤病的措施与监督保障
摘要：2020年10月发生外源性牛结节性皮肤病疫情后，内蒙古自治区积极开展流行病学调查和广泛的疫情排查，对疫点实行了封锁、检疫、隔离、扑杀及无害化处理等综合性防控措施，对受威胁区域进行了全面的疫苗免疫，并定期进行检疫和排查。通过采取有效的防控和监督保障措施，使疫病在短期内得到灭源与根除，为当地养牛业健康发展提供了坚实保障。本文从疫病发生与防控过程、监督保障措施、所存问题等方面进行论述，提出了完善相关政策法规和健全检疫监管体系，强化进口及跨省流动动物监管，提升动物疫病防控能力等措施建议。牛结节性皮肤病（lumpy skin disease，LSD）是由痘病毒科山羊痘病毒属牛结节性皮肤病病毒（LSDV）引起的牛全身性感染疫病，2020年农业农村部印发的《牛结节性皮肤病防治技术规范》将其定为二类动物疫病管理。2019年8月，在我国新疆维吾尔自治区首次确诊发生LSD疫情。自2020年10月发生疫情后，内蒙古积极有效应对外源性传入疫病，采取强有力的防控措施和监督保障，使LSD在短期内得到灭源与根除，为养牛业健康发展提供了坚实保障。疫病的发生与防控疫病的发生发病时间　2020年10月，内蒙古锡林郭勒盟西乌珠穆沁旗在动物防疫督察中发现，巴彦胡硕苏木舒图嘎查75头进口牛皮肤出现大面积多发疙瘩样结节症状，伴有体温升高，部分结节破溃结痂，临床疑似LSD。该批牛由智利引进，在江苏省连云港海关隔离场隔离期满后即调入内蒙古。内蒙古自治区动物疫病防控机构立即采集皮肤结节、口鼻拭子和抗凝血样品送检，3 d后，经中国动物卫生与流行病学中心确诊为LSD。疫点分布　内蒙古此次共引进同批次牛3 400头。其中，调入锡林郭勒盟2 974头，涉及5个旗区（其中西乌珠穆沁旗1 039头、正镶白旗130头、正蓝旗1 320头、阿巴嘎旗58头、乌拉盖管理区427头）；调入包头市426头，涉及九原区某牧业有限公司。6个旗区均出现LSD疫情，大部分疫点分布在锡盟。辐射范围　锡林郭勒盟5个旗区引进牛中陆续有964牛头发病，发病率为32.4%；死亡49头，病死率为5.1%；涉及15个苏木乡镇、36个嘎查、89个农牧户。首先发现疫情的西乌珠穆沁旗共进口该批牛1 039头，发现可疑病例273头。包头市九原区某牧业有限公司发病牛9头，发病率为2.1%，无死亡。采样诊断　对所有发病牛采样送内蒙古自治区动物疫病预防控制中心（以下称自治区疫控中心）进行LSDV核酸检测（荧光PCR方法），结果检出LSD阳性。上述地区的发病牛和病死牛均为同批进口牛，疫情未向外扩散，当地其他牛未见发病和死亡现象。防控措施启动应急预案　发病旗区政府紧急启动应急预案，自治区、盟市及相关旗县立即安排防控经费，用于疫情处置、物资购置、疫苗免疫、疫情排查监测和监督保障。自治区疫控中心发布了《内蒙古自治区牛结节性皮肤病防治技术指南》，指导防控工作，农牧部门第一时间派出专家组和技术人员赴发病苏木嘎查、养殖场开展疫情处置和流调。及时处置疫情　确定为外源性疫情后，锡林郭勒盟5个旗区共检测样品3 004份，扑杀并无害化处理发病牛和检测阳性牛1 887头；包头市九原区共检测样品426份，扑杀并无害化处理发病牛和检测阳性牛120头。开展疫苗免疫　按照《牛结节性皮肤病免疫技术规范》对高风险区域的牛进行紧急免疫。锡林郭勒盟动物疫情应急指挥部下发了《关于抓紧组织开展牛结节性皮肤病紧急免疫工作的通知》，对高风险区域苏木乡镇所有47.1万头牛进行了紧急免疫；包头市对九原区存栏的22 095头牛全部进行了紧急免疫。各地均研判疫情，对防控效果开展风险评估，创建并推广综合防控集成技术模式，适时开展牛的疫苗免疫。全方位开展流调　按照《农业农村部关于做好牛结节性皮肤病防控工作的紧急通知》要求及内蒙古自治区农牧厅的工作部署，全区各盟市迅速开展了LSD流调工作，特别针对近年来进口和区外调入的牛。同时，每年结合春秋两季防疫在全区范围内开展专项流调，到目前未发现新发LSD。监管保障监督疫情旗区划定疫点、疫区在自治区督导组和专家组的指导下，各旗区严格按照防治技术规范要求，精准划定疫点、疫区，采取隔离、消毒、检测、扑杀及无害化处理等防控措施，全力处置疫情。监督消毒灭源，消杀传播媒介，净化饲养环境督促养殖场户重视对传播媒介蚊、蝇、蠓、虻、蜱等叮咬昆虫及幼虫的消杀，清除孳生环境。掌握对当地昆虫媒介生物种类、采食习惯、活动规律及叮咬吸血习性，对现有媒介携带病毒及存活方式和危害季节进行调查，最大限度地阻断昆虫媒介的传播途径。建立定期消毒制度，各地将环境消毒灭源作为防疫的常态化工作。疫点病牛扑杀和无害化处理后，对所接触的器具、垫料、饲料、污水及其排泄物、分泌物等同时进行无害化处理，对养殖场地、棚圈及环境进行清洁和消毒。锡林郭勒盟5个旗区累计消毒面积431.311万m2；包头市九原区累计消毒面积13.39万m2。对检测阴性牛实施隔离监管锡林郭勒盟5个旗区和包头市九原区扑杀并无害化处理发病牛和检测阳性牛后，对现存栏的1 344头同批次牛实行了严格隔离。当地动物疫病防控机构指派专人实施定点隔离监管，保障隔离条件，改善隔离场环境条件，做好消毒和消杀昆虫，按时观察牛体健康状况，在隔离期满后，进行再次采样送检，确保疫病彻底消除，消除再感染隐患。实施封锁和限制高风险地区动物流动疫区旗区都在疫点、疫区出入口设置检查站卡，禁止易感动物及产品进出，在锡林郭勒盟设立了26个、在包头市九原区设立了1个消毒检查站。同时，关闭了辖区内的活牛交易市场，对隔离动物下发限制动物移动执法文书，限制高风险地区易感动物向低风险地区流动。各地还建立了有效的疫情巡查和奖励机制，对及时发现疫情和未经检疫购入外地易感动物的举报人员进行奖励，查出了一批违法违规调运牲畜的案件。严格进口牛检疫监管自治区出台规定，要求进口动物须符合中国与输出国政府签订的动物检疫条款和检疫要求，相关材料齐全。进口牛须经临床健康检查、检测阴性、疫苗免疫，凭海关有效检验检疫证明方可引进。动物运抵后24 h内，向所在地旗县级动物卫生监督机构报告，由官方兽医现场查验、核对耳标信息、登记备案后，进行监督隔离观察，隔离观察期满经检疫合格后方可混群饲养。全区各地按规定开展了进口牛专项检查，共检查进口牛15 312头。其中，呼和浩特市组成检查组对所辖4个旗县、11个奶牛场2020年以来进口的4 600头奶牛的购入手续、检疫凭证、免疫消毒记录、养殖档案、健康状况等进行了详细的检查，未发现LSD相关症状的奶牛。精准落实监管责任、开展广泛疫情排查各地制定任务清单，将责任分解落实，按照属地管理的原则，对辖区内牛免疫、备案、调运、检疫、健康状态等进行拉网式摸排。全区LSD疫情排查实行日报制，截至2021年底，全区累计排查养殖场户232.8万个次、屠宰厂636个次、交易场所293个次，排查牛4 136.5万头次。其中，锡林郭勒盟累计排查苏木乡镇2 425个次、养殖场户2 289个次，排查牛855.2万头次；包头市累计排查苏木乡镇318个次、养殖场户2 435个次，排查牛63.42万头次。加强检疫和流通环节监管自治区疫控中心下发了《关于进一步规范动物检疫工作的通知》，严格产地检疫、屠宰检疫的出证、验证和规范管理，落实跨省调运种用乳用动物检疫审批，跨省调时运调运人须持有“动物检疫合格证明”及实验室检测报告，到达目的地后，向所在地旗县级动物卫生监督机构报告。同时，加大对贩运经纪人和运载车辆管控，实行动物贩运经纪人备案登记制度，在新增的“牧运通”模块中开发应用车辆备案系统，实现了畜禽运输备案车辆和动物检疫电子出证的关联，并采集出证后的备案车辆轨迹，达到检疫证明和畜禽运输轨迹同步保存。并根据农业农村部活畜检疫调运反馈信息，对进入内蒙古运输牛的车辆及启用地和运输目的地与当地有关的车辆进行追踪和排查，发现疑似症状时严格按照防治技术规范处置；供屠宰用动物进入的，必须“点对点”调运到屠宰场，调运途中不得卸载。实行报批和指定通道制度部分地方，如锡盟行署下发了《关于加强动物调入监督管理的公告》，实行调入牛报告批准、盟市级报备制度，动物运抵后24 h内现场勘验，监督隔离观察。规定了两处公路进入的指定通道（太仆寺旗检查站和多伦县检查站）负责监督检查、信息登记、车辆消毒和签章。任何单位和个人不得接收未经指定通道动物卫生监督检查站检查、消毒、签章输入的动物和动物产品。依托信息平台精准施策自治区在检疫出证和落地监管等信息化建设中统筹协调、健全数据，对奶牛规模养殖企业实行了畜禽标识可追溯管理，奶牛规模养殖企业将关联信息录入自治区兽医信息化管理系统，并通过动物检疫电子出证系统对跨省区和区内调运的动物进行平台跟踪巡查及到达确认，将启运地出证与目的地反馈实现无缝衔接，有效推进了互联互通，实现了产地与运输环节的全链条监管。疫情处置中发现的问题牛只调运频繁，疫病发生风险增大，进口动物未严格落实落地监管制度此批进口牛是由政府牵头，农牧民与进出口企业签订合同引进的。牛只在海关隔离期满后，被运输至目的地，但未向当地动物卫生监督部门报告，也未实施查验和观察，而是将牛分散到了各购牛场户，造成疫点数显著增多，波及面广的被动局面。基层动物卫生监督机制落实不到位机构改革后，各地动物卫生监督执法机构受到合并、重组、整合、减编等因素影响，人员和经费严重不足，是目前制约动物卫生监督工作的一大难题。养殖场户和基层兽医对新发病识别不够，未及时发现和报告疫情，从发病牛抵达目的地到巡查发现疫情已有半月之久。进口动物隔离监管存在疏漏初步调查引进牛来源国为LSD无疫状态，进口牛到港时全部健康，疑似是在进口后隔离场隔离时染疫的，同批次牛调运至不同地方均有发病，在隔离期满时已有个别牛出现病症，但未引起足够重视。外源性疫病大面积突发，增加疫病防控压力一是隔离同群引进的阴性牛所需的隔离场往往是因地制宜，隔离条件不完全达标；二是在幅员辽阔、道路四通八达的牧区旗县实施疫区封锁和限制高风险地区动物移动方面操作难度大。跨部门间的协调联动及联防联控存短板目前，动物进口隔离期满后对国内调入地如何实施及时有效的跟踪监管仍缺少明确的规定和信息共享，凭海关开具的检验检疫证明即可移动调运动物，到达地落地报告制度难以实施，不能形成监管的及时性和连续性。另外，疫情发生后在追责和及时打击违法违规调运动物方面也应加大同公安等部门的协作配合。对策健全法律法规，加强能力建设应汲取此次外源性疫病发生的教训，完善相关政策法规，健全检疫监管体系，加强基层动物卫生监督的能力建设，落实辖区范围内动物调运流动巡查监管责任，疏通疫情报告渠道，做到疫病早发现、早处置。强化对进口及跨省调运动物的监管严把进口动物检疫关，执行有效的准入和报备制度，加强行业间及部门间的工作协调和信息共享，严格执行抵达目的地的及时监管。对于违法、违规调运动物引发动物疫情的案件要协同海关、公安等部门严厉打击。进一步提升疫病综合防控能力特别要加强基层动物疫病防控基础性设施建设，完善动物疫病应急处置机制，提升实验室诊断水平，建立布局合理、政府主导的动物隔离场和无害化处理厂，达到疫病处置与扑灭的标准化和规范化。进一步明确机构和体制理顺各地动物卫生监督执法的机构和名称，尽量做到统一归口、上下一致、权责明晰、协同联动。要加强执法队伍的建设，配备与监督管理工作相适应的执法人员，提高人员素质，并加大对动物卫生监督执法的经费投入，保障经费投入渠道畅通，并满足执法工作的需要。加强宣传培训通过培训、印发宣传单、挂图等多种方式，加大对养殖、经营、屠宰等相关从业人员疫病防控知识的普及，提高其对LSD的识别能力，帮助其掌握防控要点，增强其自主防范意识，做到群防群控。
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