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移液器使用、校准和管理的标准操作规程

2022-04-14 18:46:50

【目的】

本规程规定了移液器使用、校准和管理的标准操作规程，使操作人员和移液器的管理人员能够有章可循，保证移液器的使用、校准和管理符合GLP规范的要求。

【规程】

1 移液器的使用

1.1选择量程合适的移液器：移液器只能在特定量程范围内准确移取液体，如超出*低或*大量程，会损坏移液器并导致计量不准；

1.2 设定容量值

1.2.1 粗调：通过调节旋钮将容量值迅速调整至接近自己的预想值；

1.2.2 细调，当容量值接近设定值以后，应将移液器刻度显示窗平行放至自己的眼前，通过调节旋钮慢慢地将容量值调至预想值，从而避免视觉误差所造成的影响；

1.2.3 设定容量值时的注意事项：在调节量程时，如果要从大体积调为小体积，则按照正常的调节方法，逆时针旋转旋钮即可。但如果要从小体积调为大体积时，则应先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度，再回调至设定体积，这样可以保证量取的*高**度。在设定容量值的过程中，禁止将按钮旋出量程，否则会卡住内部机械装置而损坏了移液器。

1.3吸液嘴（枪头）的装配：把白套筒顶端插入吸液嘴，在轻轻用力下压的同时，把手中的移液器按逆时针方向旋转至吸液嘴卡紧。切记用力不能过猛，更不能采取剁吸头的方法来进行安装。吸液嘴卡紧的标志是略为超过O型环，并可以看到连接部分形成清晰的密封圈。；

1.4预洗吸液嘴：在安装了新的吸液嘴或增大了容量值以后，应该把需要转移的液体吸取、排放两到三次，确保移液工作的精度和准度；

1.5吸液：先将四指并拢握住移液器上部，用拇指按住塞杆顶端的按钮，向下按到**停点，再将吸头垂直浸入液面2~3mm，缓慢平稳松开按钮，吸上液体，并停留1～2秒钟（粘性大的溶液可加长停留时间）；

1.6 移液：缓慢抬起移液器取出吸液嘴，确保吸液嘴外壁无残留液体。可用定性滤纸抹去吸嘴外面可能黏附的液滴。小心勿触及吸液嘴口；

1.7 目测吸入的液体体积是否合理；

1.8 放液：将吸液嘴贴到容器内壁并保持20°-40°倾斜，平稳地把按钮压到**停点，停1-2s（粘性大的液体要加长停留时间）后，继续按压到**停点，排出残余液体。松开按钮，然后将吸液嘴沿着内壁向上移开；

1.9 按吸头弹射器除去吸头，吸取不同样本液体时必须更换吸头；

2 移液器的校准

2.1 为保证取样的准确性，移液器应定期校准，本中心规定移液器一年校准二次，二次间隔不超过7个月，由后勤保障部统一完成。*大量程小于10μL的移液器送有资质的单位校准；

2.2 计量性能要求：移液器在标准温度20℃时，其容量允许误差和测量重复性应符合表1的要求；

2.3 校准条件

2.3.1 校准环境：移液器应在室温为（20±5）℃之间，且室温变化不得大于1℃/h的条件下进行；

2.3.2 校准介质：使用超纯水，提前24h放入实验室内，使其温度与室温温差不得大于2℃；

2.3.3 校准设备：主要设备必须经法定技术机构鉴定合格且在鉴定周期内。电子天平（测量范围200g；分度值0.1mg）；温湿度表；温度计（测量范围（0~50）℃；分度值0.1℃）；烧杯（50ml）1个；烧杯（100ml）1个；定性滤纸若干小块（经恒温处理）；

2.4 校准方法

2.4.1 打开电子天平，空载调零；将温度计放置在盛放超纯水的器皿内；

2.4.2 放入小烧杯待天平显示稳定后，按下归零键归零。给移液器上安装相应的吸液嘴，对移液器的枪头进行预洗，在移液器校准记录表上记录当前的环境温湿度；

2.4.3 将移液器的容量调至被检点；

2.4.4 垂直的握住移液器，将按钮旋转至检定位置，此时将吸液嘴侵入装有超纯水的容器内，并保持在液面下1~3mm处，缓慢放松按钮，等待1s~2s后离开液面，如吸液嘴占有多余液体，则使用定性滤纸吸干（小心勿触及吸液嘴口）；

2.4.5 将吸液嘴流液口靠在天平秤盘上的烧杯内壁，并与其成大约45°角，缓慢地把按钮按至**停止点，等待1s~2s后再将按钮快速完全按下，然后将吸液嘴沿着称量杯的内壁向上移开。

2.4.6 待天平显示稳定后，马上读取并在移液器校准记录表上记录此时电子天平显示出的数值。记录完毕将电子天平复零；

2.4.7 重复5次执行（4）~（6）条。记录完毕，将移液器的容量调至下一被检点继续。被检点遵循从小到大的原则进行调整；

2.5 数据处理

2.5.1 移液器实际容量计算：将所测得的质量值带入以下公式，求得移液器在标准温度20℃时的实际容量值；

式中：V₂₀ ——标准温度20℃时的移液器的实际容量，mL；

m ——被检移液器所排出的超纯水质量， g；

K(t) ——测定值m和测定时超纯水温度的比例系数，列于附录2中；

2.5.2 移液器的容量相对误差计算：将换算得到的实际容量值带入以下公式，求得移液器在标准温度20℃时的容量相对误差；

式中：V ——标称容量，μL；

——5次测量的算数平均值，μL；

2.5.3 移液器的容量重复性计算：将换算得到的实际容量值带入以下公式，求得移液器在标准温度20℃时的容量重复性；

式中：σ_n-1 ——标准偏差；

n ——测量次数；

S ——重复性；

2.5.3 将计算结果填写在移液器校准记录表上，并给出校准结论。

2.6 校准结果处理

2.6.1经校准合格的移液器贴上校准合格证标识，注明校准编号、单位、日期及有效期。校准编号格式由ZJ年度-移液器编号-本年度校准次数组成，如2009年001号移液器的**次校准的号为ZJ09-001-01，此标识于每次校准后更换；

2.6.2 如测试的3个量程有1个量程的容量允许误差和测量重复性超出表1要求，应清洗、修正并重新校准。重新校准仍不合格的，退回厂家修理或作废弃处理；

2.7 移液器的修正

2.7.1 将移液器调整至*小量程，按照校准方法得到当前的实际容量值，根据与标示容量值的差值，通过移液器上的调准旋钮进行调整；

2.7.2 当调整后测得的实际容量值与标示容量值符合表1要求时，将移液器容量调整至中间量程继续测量。中间量程符合要求时，再调整至*大量程继续测量。

2.7.3如果中间量程或者*大量程有一个不符合表1要求时，则需重新调整至*小量程继续修正。直到3个量程的值都符合表1要求为止。

2.7.4 修正完毕的移液器，需重新进行校准。

2.7.5 *小量程低于10μL的，不进行修正。如果*大量程和中间量程符合校准要求的，继续使用，否则返厂维修。

3 移液器的使用注意事项

3.1 如长时间不使用，要把移液枪的量程调至*大值的刻度，使弹簧处于松弛状态以保护弹簧；

3.2 定期清洁移液枪外壁，可以用95%酒精或60%的异丙醇，再用蒸馏水擦拭，自然晾干；

3.3 使用时要检查是否有漏液现象。方法是吸取液体后悬空垂直放置几秒中，看看液面是否下降。如果漏液，则检查吸液嘴是否匹配和弹簧活塞是否正常；

3.4 当移液器吸嘴内有液体时，严禁将移液器水平或倒置放置，以防液体流入活塞室腐蚀移液器活塞；

附表1：移液器容量允许误差和测量重复性

标称容量/μL	校准点/μL	容量允许误差 ±(%)	测量重复性 ≤(%)
20	2	12.0	6.0
	10	8.0	4.0
	20	4.0	2.0
50	5	8.0	4.0
	25	4.0	2.0
	50	3.0	1.5
100	10	8.0	4.0
	50	3.0	1.5
	100	2.0	1.0
200	20	4.0	2.0
	100	2.0	1.0
	200	1.5	1.0
1000	100	2.0	1.0
	500	1.0	1.0
	1000	1.0	0.5
5000	500	1.0	0.5
	2500	0.5	0.2
	5000	0.6	0.2

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